顾全保 作品数:22 被引量:226 H指数:8 供职机构: 复旦大学上海市针灸经络研究中心 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 上海市科学技术发展基金 国家重点基础研究发展计划 更多>> 相关领域: 医药卫生 生物学 自然科学总论 文化科学 更多>>
黄芪对感染病毒大鼠心肌细胞L型钙通道的效应 被引量:43 1998年 目的:了解黄芪对感染柯萨奇病毒心肌细胞 L 型钙通道的影响,以探讨黄芪用于心肌炎治疗的作用机制。方法:以柯萨奇 B_3病毒感染急性分离的成年大鼠心肌细胞,利用膜片钳技术记录 L 型钙通道电流。结果:黄芪不影响正常心肌细胞 L 型钙通道电流的幅度,但可减缓 L 型钙通道电流的衰减。病毒感染增加心肌细胞 L 型钙通道电流的幅度,并改变其电压依赖性而使电流电压曲线向左下偏移。黄芪可抑制病毒感染细胞 L 型钙通道电流的增加。结论:黄芪通过抑制感染细胞经 L 型钙通道的跨膜钙内流和稳定 L 型钙通道的作用,可防止病毒感染可能导致的细胞内钙超载和异常电活动。 刘恭鑫 杨英珍 顾全保 郭棋 虞勇关键词:柯萨奇 用于针刺穴位研究的结缔组织片模型 被引量:5 2009年 目的:先前研究发现,穴区功能与穴区结缔组织结构有密切关系,本文旨在建立基于穴区原位组织上的膜片钳研究方法。方法:急性分离出SD大鼠"后三里"穴皮下结缔组织,并安置在含有孵育液的浴槽内。组织片内肥大细胞可用甲苯胺蓝或中性红进行标记。在膜片钳实验中,通过记录电极对组织片内原位肥大细胞施加-30、-60和-90 cmH2O的负压刺激,并记录细胞上机械激活性全细胞电流。结果:制备的皮下结缔组织片标本经甲苯胺蓝或中性红染色显示,肥大细胞散在分布于组织片中的基质中。肥大细胞脱颗粒现象也能通过染色清晰可见。膜片钳记录表明穴区组织片肥大细胞的全细胞电流随着机械负压的施加而增大。结论:大鼠穴区皮下结缔组织片原位肥大细胞全细胞电流能被机械刺激激活。结合显微技术和电生理技术,大鼠"后三里"穴区皮下结缔组织片可以做为研究针刺效应外周机制的一种模型,并提示穴位肥大细胞可能参与针刺过程中机械信号的转导。该模型也可为今后进一步在细胞水平上研究穴位中细胞、胶原纤维、蛋白多糖等各成分的特性及其之间的相互作用提供基础。 汪丽娜 Wolfgang Schwarz 顾全保 丁光宏关键词:针刺 肥大细胞 膜片钳 柯萨奇B3病毒对心肌细胞钙平衡的影响 被引量:8 2000年 目的 探讨柯萨奇B3病毒 (CoxsackievirusB3,CVB3)对膜离子通道及离子交换载体的影响 ,了解病毒感染导致细胞内钙超载的原因。方法 酶灌注法获得单个心肌细胞后用光聚焦显微镜和钙离子荧光探针 (Fluo 3/AM)检测CVB3感染对心肌细胞内游离钙离子浓度的影响及利用模片钳全细胞电流记录技术观察CVB3对L型钙通道电流、钠通道电流和钠钙交换电流的影响。结果 CVB3感染使细胞内的游离钙浓度从 5 1nmol/L± 44nmol/L增加到 339nmol/L± 2 0 8nmol/L ,使L型钙通道电流从 4.13pA/pF± 0 .75pA/pF增加到 4.9pA/pF± 1.4pA/pF ,使内向钠钙交交换电流从 - 0 .46pA/pF± 0 .2 1pA/pF降低到 - 0 .2 8pA/pF± 0 .16pA/pF ,并使钠钙交换电流的逆转电位从 - 2 9.4mV±7.0mV移向 - 41.2mV± 14mV。结论 CVB3增加L型钙通道电流 ,抑制内向钠钙交换电流是感染细胞内钙离子增多的一个方面。可能是病毒感染后细胞损伤和产生异常电活动的原因。 刘恭鑫 杨英珍 顾全保 郭棋 虞勇关键词:柯萨奇病毒B组 钙代谢障碍 病毒性心肌炎 山莨菪碱对γ-氨基丁酸转运蛋白的效应 顾全保 费俭 剑星 张钰 郭礼和关键词:山莨菪碱 Γ-氨基丁酸 转运蛋白 神经性疾病 文献传递 不同发育时期中华绒螯蟹血淋巴渗透压的分析 被引量:9 1990年 中华绒螯蟹血淋巴渗透压随不同的生长阶段而异;不论是在淡水中,还是在不同盐浓度的海水中,都具有保持血淋巴高渗调节控制的能力。青春期前,6—9月份,血淋巴渗透压自390mOsm/Kg H_2O升至560mOsm/Kg H_2O;青春期后,9—12月份,自555mOsm/Kg H_2O升至656mOsm/Kg H_2O,但12月到翌年3月份却明显下降。雌蟹从淡水移入海水后的血淋巴渗透压调升速度,青春期后是青春期前的三倍左右。 顾全保 王幽兰 左嘉客 何林岗关键词:中华绒螯蟹 血淋巴 渗透压 新生小鼠兴奋性氨基酸转运蛋白家族成员cDNA的克隆和分析 2000年 兴奋性氨基酸转运蛋白家族包含几种结构相似的膜蛋白,它们在终止谷氨酸的突触传递作用,维持神经系统正常的递质水平起重要作用。为了在同一物种中研究这些蛋白和基因的功能,本工作对新生小鼠脑的兴奋性氨基酸转运蛋白家族成员进行了克隆,获得了3个谷氨酸转运蛋白亚型(mGLAST-1,mGLT-1,mEAAC1)和一个中性氨基酸转运蛋白(mASCT1)的cDNA,其中在小鼠中mASCT1序列为首次发表。序列分析表明,mASCT1cDNA的长度为3787hp,编码一个532个氨基酸残基的蛋白,和人的ASCT1蛋白序列有89.3%的同源性,用非洲爪蟾卵母细胞表达系统证实了它具有转运丝氨酸的活性。同时,我们的研究表明,兴奋性氨基酸转运蛋白mRNA的5’UTR和3’UTR普遍存在组成和长度的不均一性,这种现象可能提示该家族成员的基因表达具有转录后调控机制。 彭基斌 费俭 黄芳 金小平 顾全保 郭礼和关键词:兴奋性氨基酸 基因克隆 维拉帕米对CVB_3感染心肌细胞Ca^(2+)内流及CVB_3-RNA含量的影响 被引量:1 1996年 观察了维拉帕米(Verapamil,Ver)对感染柯萨奇B_3病毒(CVB_3)的大鼠培养心肌细胞Ca^(2+)内流及CVB_3-RNA复制的影响。结果发现在感染48h后,Ver对感染细胞及正常对照的Ca^(2+)内流均有显著的抑制作用(P<0.01);若在病毒感染同时加入Ver,经48h培养后,细胞中CVB_3-RNA含量显著高于病毒对照组(P<0.05)。提示钙拮抗剂(如Ver)可减少病毒感染引起的心肌Ca^(2+)内流增加,有可能减轻感染细胞的继发性Ca^(2+)损伤;但Ver会促进病毒RNA的复制,提示在急性病毒性心肌炎临床上用Ver治疗心律失常时宜慎重。 郭棋 彭天庆 杨英珍 顾全保 赵剑星关键词:柯萨奇B3病毒 维拉帕米 钙内流 全文增补中 耳蜗毛细胞分离方法的改良 1998年 目的探讨耳蜗毛细胞的分离方法。方法选出生3周的SD大白鼠,雌雄兼用,在自制的外淋巴液中取出耳蜗基底膜,置于0.25mg/ml木瓜蛋白酶中,37℃30min消化后,洗去酶液,用钢针在普通解剖镜下剥离毛细胞并置倒置相差显微镜下观察,记录成活时间。结果每侧耳蜗可获200左右成活的毛细胞,5h后仍有70%的毛细胞成活。结论用自制改良外淋巴液,并简化了操作过程,可以满意地获得形态。 张勤修 迟放鲁 曹恒明 赵剑星 赵剑星关键词:耳蜗 毛细胞 大白鼠 大鼠心肌细胞L型和T型钙通道的特性 被引量:6 1998年 目的研究大鼠心肌细胞L型和T型钙通道的特性。方法参照Hamil法记录全细胞跨膜钙电流。结果T型和L型钙通道可并存于大鼠心肌细胞膜上。T型钙通道激活电压在-70~-60mV,持续时间在20~30ms,电流幅度较小;L型钙通道激活电压在-30~-20mV,持续时间在150~200ms,电流幅度较大。在细胞外钙离子浓度为0.5、2和10mmol/L时,L型钙通道的平均电流分别为(1.43±0.36)、(1.96±0.39)和(4.13±0.75)pA/pF;峰电流分别为(5.50±1.58)、(8.17±2.14)和(13.63±3.59)pA/pF;电流幅度随时间变化可分为无明显衰减、缓慢衰减和快速衰减3种方式。与豚鼠心肌细胞相比,大鼠心肌细胞对钙通道特异性阻断剂相对不敏感。结论L型钙通道是大鼠心肌细胞膜上的主要电压依赖性钙通道,而T型钙通道在心室肌细胞上不起主要作用。 刘恭鑫 杨英珍 顾全保 顾全保 郭棋关键词:钙通道 膜片钳 电生理学 黄芪对感染病毒大鼠心肌细胞钙通道及钠钙交换载体的效应 被引量:43 1999年 目的与方法:以柯萨奇B3病毒感染急性分离的成年大鼠心肌细胞,利用膜片钳记录技术了解黄芪对感染柯萨奇病毒后心肌细胞L型钙通道及钠钙交换载体的影响,以探讨黄芪用于心肌炎治疗的作用机制。结果:黄芪不影响正常心肌细胞L型钙通道电流的幅度,但可减缓L型钙通道电流的衰减。黄芪也不影响内向NCE电流,但使外向NCE电流增加,从而使动作电位期间由NCE转运入细胞内的钙离子增加。病毒感染增加心肌细胞L型钙通道电流的幅度,抑制内向钠钙交换电流,并使钠钙交换电流的逆转电位负移。黄芪可抑制病毒感染细胞L型钙通道电流的增加,减轻CVB3对内向NCE电流的抑制作用和使负移的逆转电位正常化。结论:黄芪通过拮抗CVB3感染对L型钙通道和钠钙交换电流的影响,可防止病毒感染可能导致的细胞内钙超载和异常电活动,从而对感染细胞起到保护作用。 刘恭鑫 杨英珍 顾全保 顾全保 虞勇关键词:柯萨奇病毒 钙通道 心肌 中医药疗法