刘恭鑫 作品数:9 被引量:156 H指数:5 供职机构: 复旦大学附属中山医院 更多>> 相关领域: 医药卫生 更多>>
黄芪对感染病毒大鼠心肌细胞L型钙通道的效应 被引量:43 1998年 目的:了解黄芪对感染柯萨奇病毒心肌细胞 L 型钙通道的影响,以探讨黄芪用于心肌炎治疗的作用机制。方法:以柯萨奇 B_3病毒感染急性分离的成年大鼠心肌细胞,利用膜片钳技术记录 L 型钙通道电流。结果:黄芪不影响正常心肌细胞 L 型钙通道电流的幅度,但可减缓 L 型钙通道电流的衰减。病毒感染增加心肌细胞 L 型钙通道电流的幅度,并改变其电压依赖性而使电流电压曲线向左下偏移。黄芪可抑制病毒感染细胞 L 型钙通道电流的增加。结论:黄芪通过抑制感染细胞经 L 型钙通道的跨膜钙内流和稳定 L 型钙通道的作用,可防止病毒感染可能导致的细胞内钙超载和异常电活动。 刘恭鑫 杨英珍 顾全保 郭棋 虞勇关键词:柯萨奇 柯萨奇B_3病毒对心肌细胞离子通道电流的影响 1999年 目的 :探讨柯萨奇B3病毒 (coxsackievirusB3,CVB3)对大鼠心肌细胞离子通道的影响 ,以了解病毒感染导致细胞电生理活动异常的机理。方法 :酶消化法获得单个心肌细胞后利用膜片钳全细胞电流记录技术观察CVB3对L型钙通道电流、钠通道电流、外向钾电流和内向整流性钾电流的影响。结果 :CVB3感染使L型钙通道电流、外向钾电流增加 ,内向整流性钾电流减小 ,对钠通道电流无明显影响。结论 :CVB3对L型钙通道电流、外向钾电流和内向整流性钾电流的影响可能是病毒感染后细胞损伤和产生异常电活动的原因。 鲍伟胜 刘恭鑫 杨英珍 王春雷关键词:柯萨奇B3病毒 钙通道电流 钾通道 病毒性心肌炎 心肌细胞的Na^+/Ca^(2+)交换 被引量:3 1998年 心肌细胞的正常功能依赖于细胞内的钙离子平衡,而心肌细胞膜上的Na^+/Ca^(2+)交换载体(NCE)是调节细胞内钙离子平衡的主要途径之一。NCE是一种双向转运载体,既可将细胞内的Ca^(2+)转运到细胞外,又可将细胞外的Ca^(2+)转运到细胞内,因而在心肌舒张和收缩过程中具有重要的意义。 刘恭鑫 杨英珍关键词:心肌细胞 柯萨奇B3病毒对心肌细胞钙平衡的影响 被引量:8 2000年 目的 探讨柯萨奇B3病毒 (CoxsackievirusB3,CVB3)对膜离子通道及离子交换载体的影响 ,了解病毒感染导致细胞内钙超载的原因。方法 酶灌注法获得单个心肌细胞后用光聚焦显微镜和钙离子荧光探针 (Fluo 3/AM)检测CVB3感染对心肌细胞内游离钙离子浓度的影响及利用模片钳全细胞电流记录技术观察CVB3对L型钙通道电流、钠通道电流和钠钙交换电流的影响。结果 CVB3感染使细胞内的游离钙浓度从 5 1nmol/L± 44nmol/L增加到 339nmol/L± 2 0 8nmol/L ,使L型钙通道电流从 4.13pA/pF± 0 .75pA/pF增加到 4.9pA/pF± 1.4pA/pF ,使内向钠钙交交换电流从 - 0 .46pA/pF± 0 .2 1pA/pF降低到 - 0 .2 8pA/pF± 0 .16pA/pF ,并使钠钙交换电流的逆转电位从 - 2 9.4mV±7.0mV移向 - 41.2mV± 14mV。结论 CVB3增加L型钙通道电流 ,抑制内向钠钙交换电流是感染细胞内钙离子增多的一个方面。可能是病毒感染后细胞损伤和产生异常电活动的原因。 刘恭鑫 杨英珍 顾全保 郭棋 虞勇关键词:柯萨奇病毒B组 钙代谢障碍 病毒性心肌炎 心肌细胞感染病毒后钙、钾通道电流及其表达改变和牛磺酸的作用 被引量:1 2003年 目的 观察心肌细胞感染病毒后心肌细胞钙、钾通道电流及通道表达改变和牛磺酸的作用。方法 (1 )体外心肌细胞感染病毒 :用胰蛋白酶和胶原酶消化法分别获得大鼠、乳鼠培养和分离的心肌细胞并感染柯萨奇B3病毒 ,用于检测Ca2 +跨膜内流、电压依赖性钙通道电流 (ICa)和外向钾通道电流 (Iout)。 (2 )在体小鼠感染病毒 :BALB c小鼠腹腔内注射柯萨奇B3病毒 7d后取出心脏用于检测电压依赖性钙通道α1 亚单位抗原和电压调控性钾通道 (Kv)mRNA的表达。相应各组加入不同剂量的牛磺酸并观察其作用。结果 (1 )感染柯萨奇B3病毒后Ca2 +跨膜内流量及ICa增加 ,牛磺酸对其有抑制作用。 (2 )柯萨奇B3病毒感染使Iout明显增大 ,牛磺酸可使病毒感染后的Iout趋于恢复正常。(3)柯萨奇B3病毒感染后小鼠心肌出现强电压依赖性钙通道α1 亚基抗原阳性信号 ,Kv1 2、Kv2 1、Kv4 2mRNA与 3种探针的杂交信号亦明显增强 ,牛磺酸可使增强的阳性信号减弱。结论 柯萨奇B3病毒感染后心肌细胞钙、钾离子通道电流及表达均增加 。 宿燕岗 杨英珍 鲍伟胜 刘恭鑫 葛均波 陈灏珠关键词:钾通道电流 钙通道 牛磺酸 病毒性心肌炎 大鼠心肌细胞L型和T型钙通道的特性 被引量:6 1998年 目的研究大鼠心肌细胞L型和T型钙通道的特性。方法参照Hamil法记录全细胞跨膜钙电流。结果T型和L型钙通道可并存于大鼠心肌细胞膜上。T型钙通道激活电压在-70~-60mV,持续时间在20~30ms,电流幅度较小;L型钙通道激活电压在-30~-20mV,持续时间在150~200ms,电流幅度较大。在细胞外钙离子浓度为0.5、2和10mmol/L时,L型钙通道的平均电流分别为(1.43±0.36)、(1.96±0.39)和(4.13±0.75)pA/pF;峰电流分别为(5.50±1.58)、(8.17±2.14)和(13.63±3.59)pA/pF;电流幅度随时间变化可分为无明显衰减、缓慢衰减和快速衰减3种方式。与豚鼠心肌细胞相比,大鼠心肌细胞对钙通道特异性阻断剂相对不敏感。结论L型钙通道是大鼠心肌细胞膜上的主要电压依赖性钙通道,而T型钙通道在心室肌细胞上不起主要作用。 刘恭鑫 杨英珍 顾全保 顾全保 郭棋关键词:钙通道 膜片钳 电生理学 黄芪对感染病毒大鼠心肌细胞钙通道及钠钙交换载体的效应 被引量:43 1999年 目的与方法:以柯萨奇B3病毒感染急性分离的成年大鼠心肌细胞,利用膜片钳记录技术了解黄芪对感染柯萨奇病毒后心肌细胞L型钙通道及钠钙交换载体的影响,以探讨黄芪用于心肌炎治疗的作用机制。结果:黄芪不影响正常心肌细胞L型钙通道电流的幅度,但可减缓L型钙通道电流的衰减。黄芪也不影响内向NCE电流,但使外向NCE电流增加,从而使动作电位期间由NCE转运入细胞内的钙离子增加。病毒感染增加心肌细胞L型钙通道电流的幅度,抑制内向钠钙交换电流,并使钠钙交换电流的逆转电位负移。黄芪可抑制病毒感染细胞L型钙通道电流的增加,减轻CVB3对内向NCE电流的抑制作用和使负移的逆转电位正常化。结论:黄芪通过拮抗CVB3感染对L型钙通道和钠钙交换电流的影响,可防止病毒感染可能导致的细胞内钙超载和异常电活动,从而对感染细胞起到保护作用。 刘恭鑫 杨英珍 顾全保 顾全保 虞勇关键词:柯萨奇病毒 钙通道 心肌 中医药疗法 Effects of taurine on L-type voltage-dependent Ca^(2+) channel in rat cardiomyocytes infected with coxsackievirus B_3 被引量:3 1998年 目的:观察牛磺酸对正常和感染柯萨奇B3病毒大鼠心肌细胞L型钙通道的影响.方法:用膜片箝技术记录经L型钙通道的Ca2+电流.结果:正常心肌细胞L型钙通道的Ca2+电流密度为41±08pA/pF,柯萨奇B3病毒感染后Ca2+电流密度增加到49±14pA/pF.牛磺酸16mmol·L-1不仅使正常心肌细胞L型钙通道的Ca2+电流密度降为35±05pA/pF,也使感染柯萨奇B3病毒后心肌细胞的Ca2+电流密度降为38±08pA/pF.柯萨奇B3病毒感染使引起最大Ca2+电流的膜电压(Vp)由8±8mV减为5±3mV,牛磺酸可使降低的Vp恢复到8±4mV.结论:牛磺酸抑制柯萨奇B3病毒感染引起的Ca2+电流的增加,并使因感染而降低的引起最大Ca2+电流的膜电压正常化.牛磺酸对L型钙通道的影响是牛磺酸减轻病毒感染引起的细胞内Ca2+增加和异常电活动的机制之一. 刘恭鑫 杨英珍 顾全保 顾全保 刘艳红关键词:柯萨奇B病毒 膜片箝技术 大鼠、豚鼠心肌细胞的简单、快速分离 被引量:51 1997年 本文介绍了一种简单、快速分离成年大鼠、豚鼠心肌细胞的方法。所分得的细胞形态结构完整,具有良好的钙耐受性,膜片钳上易于形成高阻抗接封,因而适于作各种电生理记录。 刘恭鑫 顾全堡 郭棋 杨英珍关键词:细胞分离 心脏 心肌细胞