王国艳
- 作品数：13 被引量：38H指数：5
- 供职机构：滨州医学院烟台附属医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金山东省医药卫生科技发展计划项目山东省自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- siRNA阻断B7H1在人胎盘间充质干细胞上表达对其黏附和迁移的影响
- 2011年
- 背景:人胎盘间充质干细胞表达的共刺激分子B7H1在其负性免疫调节作用中发挥着重要作用,但B7H1对人胎盘间充质干细胞生物学行为的影响尚未见报道。目的:观察阻断B7H1对人胎盘间充质干细胞黏附和迁移的影响。方法:采用消化法分离、培养人胎盘间充质干细胞,体外扩增培养3代后用于实验。用流式细胞仪及RT-PCR检测人胎盘间充质干细胞对B7H1的表达。用阳离子脂质体法将针对B7H1的siRNA转染入细胞,应用RT-PCR法检测B7H1基因在mRNA水平的变化。然后应用细胞计数法检测人胎盘间充质干细胞的黏附能力,Transwell法检测迁移能力。结果与结论:人胎盘间充质干细胞高表达B7H1,siRNA转染能有效阻断B7H1的表达;接种后0.5h阻断组人胎盘间充质干细胞的黏附率与对照组相比差异无显著性意义,但在接种后1,3h阻断组细胞黏附率均明显高于对照组(P<0.05);Transwell检测结果显示,在SDF-1α单独存在条件下、DMEM-LG完全培养基或者人胎盘间充质干细胞培养上清条件下,阻断组细胞的迁移数量均比对照组显著减少(P<0.01)。结果表明阻断B7H1的表达后,人胎盘间充质干细胞的黏附能力增强,而迁移能力受到抑制。提示B7H1在人胎盘间充质干细胞的黏附和迁移中发挥重要作用。
- 张思英王国艳都海波栾希英
- 关键词：人胎盘间充质干细胞SIRNA迁移
- 可溶型B7-H3在原发性肝细胞癌患者血清中的表达及临床意义被引量：13
- 2013年
- 目的检测协同刺激分子B7-H3在肝细胞癌患者血清及组织中的表达,并探讨其临床意义。方法选取原发性肝细胞癌63例患者的癌组织和血清标本;5例肝血管瘤的瘤旁组织作为正常肝组织对照;同期收取50例健康体检人员外周血标本为正常对照。采用ELISA检测肝癌患者和正常人血清中可溶型B7-H3(sB7-H3)的含量,免疫组化检测正常肝组织和肝细胞癌组织中B7-H3的表达。结果肝细胞癌患者外周血清sB7-H3含量为(4143.47±976.27)pg/mL,显著高于正常对照组(2076.18±605.42)pg/mL(P<0.05);且其表达水平与临床分期,是否远处转移及肝癌组织中是否阳性表达B7-H3等参数有关(P<0.05),与年龄、性别、组织学类型、淋巴结转移及肿瘤大小等临床病理参数无关;与血清学指标CA19-9呈明显正相关(P<0.05),但与AFP和CEA水平无相关性。结论肝癌患者血清中sB7-H3表达明显高于正常人,B7-H3表达与疾病临床病理指标相关,表明检测sB7-H3可能对原发性肝癌的诊断有一定价值。
- 王斐斐于国华刘同慎王国艳杨静张光波栾希英
- 关键词：共刺激分子B7-H3ELISA
- B7-H3在人肝癌细胞株HepG2对外周血CD8＋T细胞活化、周期及分泌IL-17调节中的作用被引量：5
- 2012年
- 目的研究B7-H3在人肝癌细胞株HepG2对人外周血CD8^＋T细胞活化、周期及IL-17分泌等调节中的作用。方法RT—PCR及FCM检测B7-H3在HepG2细胞上的表达；应用脂质体法将PGPu6／GFP／neo-B7-H3shRNA质粒转入肝癌细胞株HepG2，阻断B7-H3的表达；免疫磁珠分选健康人外周血CD8^＋T细胞；FCM分析B7-H3分子在HepG2细胞对PHA刺激下CD8^＋T细胞活化、周期及PMA刺激下CD8^＋T细胞分泌IL—17调节中的作用。结果肝癌细胞株HepG2高表达B7-H3分子，PGPU6／GFP／neo-B7-H3shRNA质粒能有效阻断B7-H3在HepG2细胞上的表达；FCM分析结果显示，肝癌细胞株HepG2对CD8^＋T细胞活化及周期均有抑制作用；阻断B7-H3的表达后，明显减弱HepG2细胞对CD8^＋T细胞早期活化表型CD69表达的抑制作用，且能够通过下调CD8^＋T细胞G0／G1期细胞数量，上调S期细胞数量逆转HepG2细胞对CD8^＋T细胞周期的阻滞作用；在HepG2存在条件下，CD8^＋T细胞对IL—17的分泌明显增加，阻断B7-H3的表达后，IL-17的分泌被进一步上调。结论HepG2细胞高表达R7-H3分子；B7-H3能够协同HepG2细胞对CD8^＋T细胞活化表型CD69的表达及细胞周期的抑制作用；HepG2细胞上调CD8^＋T细胞对IL-17的分泌作用，但B7-H3可抑制该上调作用。
- 王斐斐王国艳张光波林艳华栾希英
- 关键词：人肝细胞癌CD8^+T细胞B7-H3
- PD-1与其他蛋白质的互作网络分析及验证
- 2017年
- 目的构建程序性死亡-1(PD-1)及其配体与其他蛋白质的相互作用网络,加深对PD-1信号通路研究的认识,为PD-1及其相关配体的基础及临床应用研究提供理论资料。方法通过PubMed检索PD-1及其配体的研究文献,基于文献挖掘对已报道的与PD-1及其配体存在相互作用的蛋白质进行统计,并以这部分蛋白质进行二次检索及文献挖掘统计,最后用软件Cytoscape构建相互作用网络并进行分析;寻找网络中与细胞迁移有关的分子及其与PD-L1之间的关系,并利用荧光定量PCR及迁移试验进行验证。结果在构建出的PD-1/PD-L1及PD-1/PD-L2分子互作网络中分别共计122个、126个分子,这些分子在T细胞受体信号通路、细胞黏附、JAK-STAT信号通路及细胞因子间相互作用等众多生物过程中起到重要作用;基于互作网络显示,PD-L1会间接影响到CXCR4的表达,这一推测被荧光定量PCR及迁移试验结果所支持。结论通过生物信息学手段对互作网络蕴含的信息进行挖掘发现,PD-1/PD-L1通路与PD-1/PD-L2通路的作用机制存在差异。同时,利用基于文献挖掘及生物信息学的方法研究PD-1信号通路是1种可以合理利用生物文献数据,为实际试验提供指导的好方法。
- 姜茹姜杰谭宏伟修燕王国艳
- 关键词：生物信息学PD-1PD-L1PD-L2
- PD-L1在人胎盘源间充质干细胞对脐血CD8^+T细胞免疫调节中的作用被引量：6
- 2012年
- 目的:研究PD-L1在人胎盘源间充质干细胞(Human placenta mesenchymal stem cell,hPMSCs)介导的对脐血CD8+T细胞活化、周期及对IL-17分泌免疫调节中的作用。方法:RT-PCR及FCM检测hPMSCs对PD-L1的表达;应用化学合成的PD-L1 siRNA阻断PD-L1在hPMSCs上的表达;免疫磁珠分选脐血CD8+T细胞;FCM分析阻断PD-L1后,hPMSCs对PHA刺激下CD8+T细胞活化、周期及PMA活化下CD8+T细胞分泌IL-17的影响。结果:hPMSCs高表达PD-L1分子,PD-L1 siRNA能有效阻断hPMSCs对PD-L1的表达;FCM分析结果显示,hPMSCs能够抑制CD8+T细胞对CD69的表达,但阻断PD-L1后,CD69的表达与未阻断组相比无明显变化;与未阻断组相比,处于G0/G1期的CD8+T细胞数量明显减少,处于S期的细胞数量明显增加;在hPMSCs存在条件下,脐血CD8+T细胞对IL-17的分泌明显增加,阻断PD-L1的表达后,IL-17的分泌被进一步上调。结论:PD-L1在hPMSCs上表达能够协同hPMSCs对脐血CD8+T细胞周期的抑制,并且能够抑制hPMSCs上调CD8+T细胞对IL-17的分泌。
- 王国艳李广云王斐斐张思英都海波栾希英
- 关键词：PD-L1
- PDL2在人胎盘源间充质干细胞对外周血T细胞免疫调节中的作用
- 研究背景:人胎盘间充质干细胞(human placenta derived mesenchymal stem cells,hPMSCs)体外能够抑制T细胞的活化、增殖及对IL-2和IFN-γ的分泌。资料显示,负性共刺激分...
- 王国艳李恒王斐斐栾希英
- 关键词：T细胞
- PDL2在人胎盘间充质干细胞上的表达调控及生物学意义研究
- 一、PDL2在人胎盘源间充质干细胞上表达的生物学意义目的：通过沉默PDL2在人胎盘间充质干细胞(human placenta derived mesenchymal stem cells, hPMSCs)上的表达,研究P...
- 王国艳
- 关键词：间充质干细胞胎盘共刺激分子T细胞免疫调节JAK-STAT
- 文献传递
- B7-H3在人肝癌细胞株HepG2上的表达对外周血CD8~+T细胞的免疫调节作用
- 研究背景:CD8+T细胞是介导肿瘤免疫应答的重要效应细胞,资料表明肝癌患者中CD8+T细胞亚群明显升高,但其具体机制尚不明确。B7-H3,又称CD276,是协同共刺激分子B7家族成员之一,在T细胞介导的免疫应答中发挥重要...
- 王斐斐魏海冬王国艳栾希英
- 关键词：肝癌HEPG2CD8+T细胞B7-H3
- 文献传递
- PDL2在人胎盘源间充质干细胞对外周血T细胞免疫调节中的作用被引量：4
- 2012年
- 目的研究程序性死亡配体2（programmed death ligand2，PDL2）在人胎盘源间充质干细胞（human placenta mesenchymal stem cell，hPMSCs）对外周血T细胞活化、增殖及周期免疫调节中的作用。方法RT-PCR、激光共聚焦（1aser scanning confocal microscopy，LSCM）及流式细胞术（flow cytometry，FCM）检测PDL2在hPMSCs上的表达；应用PDL2siRNA阻断PDL2在hPMSCs上的表达；密度梯度离心法分离纯化T细胞；FCM分析阻断PDL2后，hPMSCs对植物血凝素（PHA）刺激下T细胞活化及波佛脂（PMA）活化下T细胞增殖和周期的影响。结果hPMSCs高表达PDL2分子，PDL2siRNA能有效阻断PDL2在hPMSCs上的表达；FCM分析结果显示，hPMSCs能够抑制CD69在T细胞上的表达，但阻断PDL2后，CD69的表达与未阻断组相比无明显变化；hPMSCs能够显著抑制PMA活化的T细胞的增殖，且阻断PDL2后，其增殖指数被进一步上调；与未阻断组相比，处于G0／G1期的T细胞数量明显减少，处于S期的细胞数量明显增加。结论PDL2在hPMSCs上表达能够协同hPMSCs对外周血T细胞周期的抑制，进而抑制T细胞的增殖。
- 王国艳李广云林艳华王斐斐张丽霞栾希英
- 关键词：间充质干细胞胎盘T细胞
- IFN-γ对人胎盘源间充质干细胞上PDL2表达及诱导外周血CD8^＋IL-10^＋T细胞亚群分化的调节作用被引量：3
- 2014年
- 目的：探讨IFN-γ对人胎盘源间充质干细胞（humanplacentamesenchymalstemcells，hPMSCs）上程序性死亡配体2（programmeddeathligand2，PDL2）的表达及诱导外周血CD8＋IL-10＋T细胞亚群分化的调节作用。方法应用酶消化法分离hPMSCs；RT-PCR和FCM分析hPMSCs上PDL2的表达，以及IFN-γ对PDL2表达的影响；Ficoll密度梯度离心法分离健康人外周血单个核细胞（PBMC），并用E花环法纯化T细胞；FCM分别检测PDL2单克隆抗体（McAb）阻断及IFN-γ刺激条件下，hPMSCs对PHA和CD3/CD28McAb活化的T细胞中CD8＋IL-10＋T细胞亚群变化。结果hPMSCs高表达PDL2，IFN-γ能够上调hPMSCs上PDL2的表达；FCM分析结果显示，hPMSCs可诱导CD8＋IL-10＋T细胞亚群的分化，在PHA和CD3/CD28McAb活化条件下，外周血T细胞中CD8＋IL-10＋T细胞亚群比例在有hPMSCs存在组明显高于无hPMSCs存在组（P＜0．01）；阻断PDL2的表达后，hPMSCs对T细胞向CD8＋IL-10＋T细胞亚群诱导分化能力明显下降；IFN-γ刺激后的hPMSCs对外周血中CD8＋IL-10＋T细胞亚群的诱导作用明显上调。结论hPMSCs能够诱导外周血中T细胞向CD8＋IL-10＋T细胞亚群分化，PDL2能够协同hPMSCs诱导CD8＋IL-10＋T细胞亚群形成；IFN-γ通过上调hPMSCs对PDL2的表达，促进hPMSCs对外周血T细胞向CD8＋IL-10＋T细胞亚群转化的调节作用。
- 李恒王国艳王炜玮王斐斐刘冉冉栾希英
- 关键词：IFN-Γ
