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人TGF融合疫苗诱导抗体在貂肺上皮细胞的活性检测: 2005年; 目的TGFβ1疫苗诱导Balb/c小鼠产生抗体及对TGFβ1体外中和活性。方法通过已构建成功的TGFβ1疫苗免疫小鼠,诱导产生高效价中和抗体,抗TGFβ1抗体及合成的抗原肽ELISA法检测免疫血清抗体滴度,经貂肺上皮细胞生长抑制法,检测抗体血清对TGFβ1体外中和活性。结果抗TGFβ1疫苗可以诱导高滴度的抗体产生,可与抗TGF抗体及抗原肽结合,可以阻断TGFβ1对貂肺上皮细胞的抑制活性。结论构建的抗TGFβ1疫苗可以诱导高滴度的中和抗体产生,在体外阻断TGFβ1活性,可以作为抗纤维化疫苗用于抗纤维化动物模型研究。; 郭永红郝志明罗金燕王俊红; 关键词：肺上皮细胞活性检测融合疫苗血清抗体滴度疫苗诱导体外阻断

利拉鲁肽经AMPK途径对平滑肌细胞KCa3.1蛋白表达的影响: 2020年; 目的探讨利拉鲁肽经激活腺苷酸活化的蛋白激酶(AMPK)途径对平滑肌细胞KCa3.1蛋白表达的影响。方法制备SD大鼠血管平滑肌细胞模型,大鼠主动脉平滑肌细胞采用利拉鲁肽进行干预,测定未加入利拉鲁肽及加入利拉鲁肽15 min后磷酸化AMPK(PAMPK)/AMPK比值。将平滑肌细胞分为4组培养:A组为正常组,B组采用血管紧张素Ⅱ100 nmol/L,C组采用利拉鲁肽1μmol/L+血管紧张素Ⅱ100 nmol/L,D组采用利拉鲁肽1μmol/L+AMPK阻滞剂4μmol/L+血管紧张素Ⅱ100 nmol/L。培养72 h后使用Western-Blotting检测KCa3.1蛋白表达。结果显微镜下可见细胞呈长梭状、三角状,α-actin细胞免疫荧光染色后,胞浆着色为红色,确认为血管平滑肌细胞。利拉鲁肽与大鼠血管平滑肌作用15 min后,与基线比较PAMPK水平明显上升,PAMPK与AMPK比值明显上调,差异有统计学意义(P<0.05)。C组平滑肌细胞KCa3.1蛋白表达较B组下降(P<0.05)。结论利拉鲁肽可激活AMPK细胞通路,抑制平滑肌细胞上KCa3.1蛋白表达。; 董鹏李小红王俊红刘超峰王玉环张春虹; 关键词：平滑肌细胞利拉鲁肽

临床思维训练在发热待查疾病临床教学中的应用被引量：1: 2019年; 临床医生的思维能力是诊治疾病的基础,思维能力的培养对于实习阶段医学生至关重要,也是医学实践教育的重点和难点,本文利用思维导图和具体病例进行纵向及横向思维能力的训练,结合发热待查疾病,构建发热待查疾病尤其是伴有肝损伤疾病立体思维图谱,有利于临床思维的培养及疾病的精准诊断,培养高素质医学生。; 郭永红王俊红; 关键词：发热纵向思维横向思维思维导图

重组双链及单链腺相关病毒介导Exendin-4表达效率的比较: 2015年; 比较双链腺相关病毒(Double-stranded adeno-associated virus,ds AAV)及单链AAV(Singlestranded adeno-associated virus,ss AAV)介导Exendin-4分泌表达效率。应用基因工程方法构建ds AAV/p SSHG/Exendin-4,与重组ss AAV比较转染NIH3T3细胞效率及转染后细胞上清Exendin-4浓度,免疫组化检测Exendin-4表达。经限制性内切酶及测序证实载体构建成功,测定重组ds AAV p SSHG/Exendin-4滴度为2.5×1011pfu,较重组ss AA滴度高(2.5×109pfu);ds AAV/p SSHG/GFP转染NIH3T3细胞表达绿色荧光强;ELISA法检测感染重组ds AAV的NIH3T3细胞上清中Exendin-4的浓度为181.1±8.75pmol/ml,较重组ss AAV分泌浓度(133.81±8.09pmol/ml)升高(P<0.05);重组ds AAV及ss AAV转染NIH3T3细胞Exendin-4表达均为阳性。重组ds AAV可分泌表达Exendin-4并较ss AAV具有更高效转染能力,为研究Exendin-4功能及应用于临床打下基础。; 王俊红问姣董鹏张静焦杨郭永红; 关键词：EXENDIN-4 腺相关病毒

双链腺相关病毒介导表达Exendin-4治疗糖尿病大鼠的研究被引量：2: 2013年; 目的构建、鉴定自身互补双链DNA的腺相关病毒（scAAV）重组载体，使其分泌表达Exendin-4，检测其转导效率并观察在糖尿病大鼠模型中的治疗作用。方法应用基因工程方法改建穿梭质粒pSSHG-CMV，插入外源性基因Exendin-4，构建重组scAAV载体，感染HEK293细胞，ELISA检测转染NIH3T3细胞上清Exendin-4滴度，链佐霉素诱导20只6周龄体质量180～220 g SD成年雄性大鼠为糖尿病鼠模型，逆向注射重组scAAV于糖尿病大鼠颌下腺，检测其血糖及胰岛素分泌水平。结果重组scpSSHG/exn4可有效包装和复制，病毒滴度为2.5×1011pfu/mL，转染细胞上清分泌Exendin-4浓度可达到4.53 ng/mL，scAAV治疗组血糖浓度在2、4周及8周均低于对照组[分别为（639.17±27.89）vs （396.00±34.00），（657.02±39.87） vs （315.62±42.56），（215.6±24.7） vs （458.6±19.7） mg/dL]，胰岛素浓度均高于对照组[分别为（156.8±24.5） vs （535.9±35.6），（236.5±12.3） vs （495.3±18.6），（620.43±46.90） vs （381.56±21.78） pg/mL]，二者比较有显著统计学差异（P〈0.05）。结论成功构建重组双链腺伴病毒scAAV-Ex-4，具有高效转导能力，对糖尿病大鼠模型具有控制血糖及增加胰岛素分泌作用。; 王俊红王枫董鹏徐静谢璇郭永红; 关键词：EXENDIN-4 2型糖尿病大鼠

二甲双胍对2型糖尿病合并非酒精性脂肪肝大鼠肝脏SIRT1和UCP2表达的影响被引量：21: 2013年; 目的:观察二甲双胍对2型糖尿病(T2DM)合并非酒精性脂肪肝(NAFLD)大鼠肝脏沉默调节蛋白1(SIRT1)、线粒体脱偶连蛋白2(UCP2)表达的影响,探讨其对T2DM合并NAFLD的干预治疗效果及可能机制。方法:雄性SD大鼠36只,随机分为正常对照组(NC组,12只)、T2DM合并NAFLD对照组(MC组,12只)和T2DM合并NAFLD二甲双胍治疗组(A组,12只)。通过高脂高糖饮食加小剂量链脲佐菌素建立T2DM合并NAFLD大鼠模型。建模成功后,A组给予二甲双胍300 mg/(kg.d)灌胃8周。实验结束时测各组大鼠空腹血糖(FBG)、肝功能、血脂、游离脂肪酸(FFA)、空腹胰岛素(FINs);观察肝组织的病理变化;免疫组织化学法及Real-time PCR法测定肝组织中SIRT1和UCP2的表达情况。结果:MC组大鼠FBG,ALT,AST,TC,TG,LDL-C,VLDL,FFAs,FINs,HOMA-IR均较NC组大鼠升高(P<0.05),HDL-C较NC组减低(P<0.05);给予二甲双胍治疗后,大鼠上述血清学指标均较MC组有所改善(P<0.05),MC组大鼠肝脏SIRT1表达较NC组明显降低(P<0.05),而UCP2表达较NC组明显升高(P<0.05),经二甲双胍治疗后,SIRT1表达较MC组升高(P<0.05),而UCP2较MC组降低(P<0.05)。SIRT1与UCP2的表达呈负相关(r=-0.61,P<0.01)。结论:在T2DM合并NAFLD大鼠肝组织中SIRT1表达明显降低,UCP2表达明显升高,而二甲双胍可以上调SIRT1的表达及下调UCP2的表达,并且SIRT1与UCP2的表达存在负向调节关系。; 徐静李楠王俊红张春虹丁石梅焦杨张静; 关键词：2型糖尿病非酒精性脂肪肝二甲双胍

重组转化生长因子β1疫苗防治小鼠肝纤维化研究: 目的:构建重组转化生长因子β1(TGF β 1)疫苗,刺激机体产生抗TGF β 1抗体中和过量的TGF β 1防治肝纤维化,为肝纤维化的防治和细胞因子疫苗制备提供新的途径。方法:原核表达TGF β 1抗原决定簇与乙型肝炎...; 郭永红罗金燕郝志明王俊红; 文献传递

Ⅱ型糖尿病患者血糖对肝功能和血脂的影响及其意义被引量：11: 2015年; 目的:探讨II型糖尿病患者血糖浓度对患者肝功能及血脂指标的影响及其意义。方法:选取某三级甲等医院内分泌科已确诊为II型糖尿病患者408例,根据空腹血糖浓度(FPG)分为三组:(A组,FPG<8.0 mmol/L;B组,8.0≤FPG<11.0 mmol/L;C组,FPG≥11 mmol/L),检测三组患者的肝功能指标及血脂指标,进而对其肝功能损害及血脂的异常情况进行分析,其数据结果应用统计学软件SPSS 17.0处理。结果:与A组及B组相比较,C组患者肝功能损伤更为严重,表现为:肝酶显著升高(P<0.05);胆红素显著升高(P<0.05);球蛋白显著升高(P<0.05);总胆固醇、甘油三酯水平异常(P<0.05)。其结果均有统计学意义。结论:II型糖尿病患者随着其血糖浓度升高可造成肝功能损伤及血脂异常,血糖监测及控制对糖尿病患者的身体健康状况具有重要意义。; 罗苗李军民李梦颖谈昀王俊红权晓娟张磊刘寒强王枫; 关键词：糖尿病肝功能血脂

气压治疗对2型糖尿病下肢周围神经病变患者神经症状及缺血状态的效果观察被引量：14: 2016年; 目的观察气压治疗对2型糖尿病下肢周围神经病变患者神经症状及缺血状态的影响。方法对2013年3月—2015年10月收治的2型糖尿病下肢周围神经病变113例的临床资料进行回顾性分析。按治疗方案分为A组(61例)与B组(52例)。两组均给予常规治疗,A组应用甲钴胺联合气压治疗,B组单纯应用甲钴胺。观察两组治疗前后血糖与血脂水平、神经症状、缺血状态的改善情况及临床疗效。结果两组治疗前后血糖与血脂水平比较差异无统计学意义(P>0.05)。治疗后两组神经系统症状评分(NSS)、密西根糖尿病性周围神经病评分(MDNS)与治疗前比较降低,腓总神经的感觉神经传导速度(SNCV)和运动神经传导速度(MNCV)与治疗前比较增大,且A组治疗后NSS与MDNS评分低于B组,SNCV、MNCV高于B组(P<0.05)。A组治疗总有效率高于B组(P<0.05)。结论气压治疗利于改善肢体动脉缺血及全身血液循环,在2型糖尿病下肢周围神经病变患者中应用可促进神经症状缓解及改善缺血状态。; 陈媛王俊红张婷婷薛阳利杨妙妍; 关键词：糖尿病神经病变气压治疗侧支循环

重叠PCR克隆Exendin-4的基因及序列分析被引量：1: 2013年; 目的克隆Exendin-4 39肽氨基酸序列基因编码区cDNA。方法根据Exendin-4氨基酸序列编码cDNA,设计正、负向引物/模板链,利用重叠延伸PCR法扩增出Exendin-4编码区基因DNA片段;将获得的基因片段插入pGEM-T-Easy质粒中;转化到大肠杆菌DH5α后挑选阳性克隆,利用限制性内切酶及核苷酸序列分析技术鉴定重组质粒。结果经质粒DNA酶切分析及序列测定,获得了Exendin-4 DNA片段序列。结论本研究成功克隆了Exendin-4 cDNA,为下一步构建Exendin-4真核表达载体打下基础,也为Exendin-4基因治疗糖尿病提供了前提条件。; 王俊红郭永红张静徐静谢璇杨广笑王全颖王枫; 关键词：EXENDIN-4 重叠延伸PCR 基因克隆

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王俊红

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