杨龙圣
- 作品数:27 被引量:135H指数:7
- 供职机构:华中农业大学动物医学院更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金江苏省科技成果转化专项资金江苏省农业科学院科研基金更多>>
- 相关领域:农业科学经济管理医药卫生更多>>
- 几种提纯RHDV方法的比较研究被引量:1
- 2006年
- 运用离子交换层析法、凝胶过滤层析法和密度梯度离心法对已作初步处理的RHDV分别进行提纯,并通过血凝性鉴定、抗原蛋白含量检测、ELISA和SDS-PAGE凝胶电泳等方法检测其纯度。结果表明,通过Sephadex-200凝胶过滤层析法所提纯病毒的血凝性和蛋白浓度最高;稀释至相同的蛋白浓度之后,该法所提纯的病毒ELISA检测的OD值最大;SDS-PAGE电泳条带1条,经免疫转印分析证明,该条带为RHDV蛋白特异性条带。表明通过该法提纯的病毒,回收率最高、蛋白最纯。
- 杨龙圣薛家宾丁国明徐为中陈兴祥孔祥峰胡元亮
- 关键词:RHDVELISA
- 中药成分复方对兔外周血淋巴细胞增殖、IFN-γ和IL-10的mRNA表达以及兔出血症疫苗免疫效果的影响被引量:14
- 2008年
- 【目的】研究两个中药成分复方(cCHMIs)的免疫增强作用和机理。【方法】选择黄芪多糖、淫羊藿多糖、蜂胶黄酮和人参皂苷4种中药成分组成两个复方,用MTT法和荧光定量RT-PCR法测定它们对兔外周血淋巴细胞增殖和IFN-γ、IL-10mRNA的表达影响;并将两个复方作为佐剂,配合兔出血症疫苗免疫幼兔,以铝胶苗和无佐剂苗为对照,分别于免疫后7、14、21、35、49d用MTT法和血凝抑制法测定外周血淋巴细胞增殖和血清抗体的动态变化,于免疫后63d测定免疫器官指数和攻毒保护率。【结果】两个复方在体外均可以显著促进淋巴细胞增殖,提高淋巴细胞IFN-γ、IL-10mRNA的表达;作为佐剂,两个复方可以显著提高免疫兔的血清抗体效价,促进体内淋巴细胞增殖,显著促进圆小囊、肠淋巴结等免疫器官的发育,有较高的攻毒保护效果。【结论】两个复方中药成分具有较强的免疫增强作用,可被开发成新型的免疫增强剂。
- 杨龙圣胡元亮薛家宾王芳王德云徐为中
- 关键词:中药成分复方兔出血症淋巴细胞增殖MRNA表达免疫器官指数
- 中药成分复方对兔外周血淋巴细胞增殖和IL-10 mRNA表达以及兔瘟疫苗免疫效果的影响
- 选择黄芪多糖,淫羊藿多糖,蜂胶黄酮,人参皂甙4中药成分组成2个复方, 用 MTT 法和荧光定量 RT-PCR 法测定了两个中药成分复方对兔外周血淋巴细胞增殖和 IL-10 mRNA 表达的影响。同时将两个中药成分复方与兔...
- 杨龙圣胡元亮薛家宾王芳王德云徐为中
- 关键词:中药成分复方淋巴细胞增殖免疫器官指数
- 文献传递
- 兔出血症发病概况及疫苗研究进展被引量:17
- 2007年
- 兔病毒性出血症(RHD)是由兔出血症病毒(RHDV)引起的一种急性、高度致死性传染病。该病严重危害养兔业,因而引起国际兽医界的高度重视,1989年,国际兽疫局(O IE)将该病正式列为“国际动物保健编目”B类传染病。本文主要对20年来RHD的发病、佐剂灭活疫苗、细胞培养疫苗、基因工程疫苗的研究进展作一综述。
- 杨龙圣薛家宾王芳徐为中王德云胡元亮闻发全
- 关键词:兔病毒性出血症疫苗佐剂基因工程
- 家兔产气荚膜梭菌(A)型疫苗超纳滤膜浓缩工艺研究被引量:4
- 2007年
- 采用超纳滤技术浓缩家兔产气荚膜梭菌(A)型疫苗,建立家兔产气荚膜梭菌(A)型疫苗浓缩工艺。配制家兔产气荚膜梭菌(A)型超纳滤浓缩疫苗,并对其无菌性、安全性和免疫效力进行了检验。结果显示,该工艺可将家兔产气荚膜梭菌(A)型灭活抗原浓缩约7倍,超纳滤膜用NaOH洗后其通量可以恢复;配制的家兔产气荚膜梭菌(A)型超纳滤浓缩疫苗无菌检验合格,安全检验家兔无不良反应,符合动物用生物制品要求;以2 mL/只的剂量免疫家兔,家兔产气荚膜梭菌(A)型超纳滤浓缩疫苗的保护率达100%,传统铝胶疫苗对照组的保护率平均为86.7%,表明超纳滤浓缩疫苗免疫效力优于传统铝胶疫苗。确定了家兔产气荚膜梭菌病(A)型疫苗超纳滤膜膜浓缩的工艺。
- 徐为中薛家宾诸玉梅陈兴祥周永银杨龙圣尹秀凤
- 关键词:家兔产气荚膜梭菌膜浓缩免疫效力
- 兔出血症病毒衣壳蛋白在昆虫细胞中的表达及对家兔的免疫保护效果被引量:27
- 2008年
- 用RT—PCR方法扩增兔出血症病毒(RHDV)衣壳蛋白VP60基因,通过克隆、转化得到重组穿梭载体Bacmid—VP60,用此质粒转染Sf9昆虫细胞,得到重组病毒rAcV—Bac—VP60,经RT—PCR、IFA、SDS-PAGE、Western blotting、HA和HI鉴定,结果显示重组VP60蛋白在Sf9昆虫细胞中得到表达。在不加任何佐剂的情况下,用表达的蛋白免疫3月龄非RHD免疫兔,结果显示,免疫后21天,兔体内可产生抗RHDV抗体,抗体血凝抑制效价为2^6~2^7,该抗体可以抵抗血凝效价为2^10致死剂量RHDV强毒的攻击,本研究为兔病毒性出血症基因工程疫苗的研制奠定了基础。
- 王芳胡波任雪枫范志宇杨龙圣徐为中张则斌何孔旺
- 关键词:兔出血症病毒衣壳蛋白杆状病毒表达系统重组杆状病毒免疫
- 病毒性出血症疫苗免疫剂量对幼兔血清抗体效价的影响
- 选择35、40、45三种日龄新西兰家兔各30只,每个日龄兔随机均分为5组,对照组注射生理盐水, 4个试验组分别注射4种剂量(1ml、2ml、3ml、4ml)的兔病毒性出血症疫苗,分别于免疫前及免疫后1~7周内采血测定血清...
- 杨龙圣薛家宾王芳徐为中胡元亮
- 关键词:免疫剂量抗体效价
- 文献传递
- 免疫日龄对兔病毒性出血症抗体水平和保护率的影响被引量:12
- 2006年
- 通过攻毒试验比较了新西兰家兔免疫前后0、1、2、3和4 log25种抗体水平对病毒性出血症(RHD)的保护效果,同时测定了30、35、40、45、50、55和60日龄非免疫兔的母源抗体效价和用RHD组织灭活苗免疫后8周内血清抗体效价的动态变化。结果表明,抗体效价高于3 log2时可产生100%的保护,2 log2的保护率仅为50%;母源抗体与日龄呈负相关,在30日龄时最高,可以产生有效的保护,在40日龄后已无保护作用;免疫日龄与抗体峰值和有效保护时间呈正相关,30日龄免疫,抗体效价不但不升,反而显著下降,无保护作用;35日龄免疫,抗体峰值较低,有效保护时间仅为2周;大于40日龄免疫,抗体峰值较高,有效保护时间延长。因此建议35日龄首免、2周后二免为最佳免疫程序。
- 薛家宾杨龙圣徐为中胡元亮
- 关键词:兔病毒性出血症免疫日龄抗体效价
- 奶牛子宫内膜炎病原菌的分离鉴定及中药的抑菌作用被引量:38
- 2005年
- 为了研究中药新促孕液防治母畜子宫内膜炎的机理和改进组方,采集南京地区患牛子宫分泌物进行细菌分离及鉴定,并测定了新促孕液及其组分药、其他10味中药及3个复方对主要分离株的体外抑菌作用和最小抑菌浓度。结果,共分离出葡萄球菌10株、链球菌6株、大肠杆菌8株,溶血性和非溶血性大肠杆菌的血清型分别为O159和O110,O159可在68 h内引起小鼠全部死亡,表明葡萄球菌、链球菌和大肠杆菌是主要致病菌,O159具有致病性。新促孕液对6种分离菌株均有较强的抑制作用,淫羊藿、黄柏、硼砂发挥主要作用;其他单味药以丹参、复方以方2的抑菌作用最强,这些可以作为改进新促孕液组方的依据。
- 孔祥峰胡元亮杨龙圣卢宇芮荣张宝康
- 关键词:奶牛子宫内膜炎病原菌分离鉴定
- 兔出血症发病概况及疫苗研究进展
- 兔病毒性出血症(RHD)是由兔出血症病毒(RHDV)引起的一种急性、高度致死性传染病。该病对养兔业危害严重,因而引起国际兽医界的高度重视,1989年,国际兽疫局(OIE)将该病正式列为“国际动物保健编目”B 类传染病。本...
- 杨龙圣薛家宾王芳徐为中王德云胡元亮
- 关键词:RHD佐剂细胞培养基因工程苗
- 文献传递