公共文化服务平台

搜索到273篇“ RHDV“的相关文章

经典RHDV与RHDV2对家兔致病性和组织嗜性的比较研究: 2024年; 为了比较经典兔出血症病毒(RHDV)与兔出血症病毒2型(RHDV2)对家兔的致病性与组织嗜性差异,试验将15只45~50日龄家兔随机分成3组,分别为经典RHDV攻毒组、RHDV2攻毒组和对照组,每组5只,经典RHDV攻毒组和RHDV2攻毒组每只家兔分别皮下注射含2×10^(8)copies/μL经典RHDV和RHDV2的病毒悬液1 mL,对照组每只家兔皮下注射PBS 1 mL,持续观察并记录每组的精神状态、体重变化、采食情况、运动状况和死亡情况,并于攻毒36 h后处死并剖检各组未死亡家兔。无菌采集各组肝脏、肺脏、脾脏、肾脏、心脏、脑、胃、肠、蚓突、圆小囊进行石蜡切片制作、H.E.染色和组织病变观察。各组无菌多点位采集等量心脏、肝脏、脾脏、肺脏、肾脏组织,提取病毒RNA反转录成cDNA后采用实时荧光定量PCR方法检测各组织中病毒载量。结果表明:攻毒后第6~10小时,经典RHDV攻毒组和RHDV2攻毒组均表现为精神沉郁、厌食、静卧、嗜睡、反应迟钝、体重下降等临床症状。经典RHDV攻毒组于攻毒后第24~25小时死亡3只,死亡率为60%(3/5);RHDV2攻毒组于攻毒后第8~21小时全部死亡,死亡率达100%(5/5);对照组5只家兔均存活且无异常表现。剖检可见经典RHDV攻毒组和RHDV2攻毒组气管环状出血,且RHDV2攻毒组气管中出现大量泡沫;经典RHDV攻毒组和RHDV2攻毒组肝脏质脆、肿大、出血,肺脏严重出血,心脏有明显出血点,脾脏明显肿大,经典RHDV攻毒组的组织匀浆中仅检出经典RHDV,RHDV2攻毒组的组织匀浆中仅检出RHDV2。经典RHDV攻毒组和RHDV2攻毒组的组织切片中可见多组织器官变性、坏死、扩张或淤血,其中RHDV2攻毒组肝脏和脾脏的损伤程度大于经典RHDV攻毒组;而蚓突、圆小囊和脑部未见明显病理变化;对照组所有组织器官均未见明显病变与异常。经典RHDV攻毒组内脏病毒载量从高到低依次为肝脏、脾脏、肾脏、肺脏和心脏;RHDV2攻毒组内脏病; 肖璐于吉锋谢晶曹冶叶勇刚李兴玉吴学婧毛从剑潘梦叶健强林毅魏勇杨竣雁康润敏; 关键词：兔瘟组织嗜性

密码子优化的RHDV2双VP60基因重组杆状病毒构建及表达蛋白免疫原性分析被引量：1: 2024年; [目的]试验旨在优化兔出血症病毒2型(Rabbit hemorrhagic disease virus 2,RHDV2)病毒样颗粒(virus-like particle, VLP)疫苗的制备策略,探究RHDV2 VLP疫苗对家兔的免疫原性,为低成本、高产量RHDV2新型疫苗研发提供新思路。[方法]根据昆虫细胞的密码子偏好性优化合成RHDV2 VP60全基因,将双VP60基因插入真核载体pFastBacTMDual,转化携带Bacmid质粒的大肠杆菌DH10Bac感受态细胞,构建含双VP60基因的重组杆粒Bacmid-VP60-VP60,转染Sf9昆虫细胞,通过Western blotting、间接免疫荧光试验(IFA)及透射电镜对重组杆状病毒Bacmid-VP60-VP60进行表达验证;将优化策略制备的重组蛋白抗原与氢氧化铝佐剂按照9∶1比例制备VLP灭活疫苗,通过安全性检验、最小免疫剂量、免疫持续期等评估优化策略制备的RHDV2 VLP疫苗的保护效果。[结果]试验成功构建重组杆粒Bacmid-VP60-VP60。Western blotting鉴定结果显示,重组杆状病毒转染Sf9细胞表达出大小约60 ku的RHDV2 VP60蛋白。IFA鉴定结果显示,感染重组杆状病毒的Sf9细胞产生了大量的黄绿色荧光,表明重组杆状病毒在Sf9细胞中大量表达VP60蛋白。透射电镜观察结果显示,VP60蛋白折叠成VLP,大小为40 nm左右,呈现球形结构,表面光滑。优化策略制备的RHDV2 VLP疫苗对家兔具有良好的安全性和免疫原性,最小免疫剂量为0.5 mL/只,免疫持续期可达210 d以上。[结论]试验构建了含有密码子优化的双VP60基因的重组杆状病毒,并在昆虫细胞中成功表达RHDV2 VP60蛋白,该蛋白制备的VLP疫苗对家兔具有良好的免疫原性。; 于吉锋谢晶黄勇肖璐林毅曹冶叶勇刚魏勇吴学婧李江凌康润敏; 关键词：密码子偏好性重组杆状病毒免疫原性

动物疫病鉴别检测技术第2部分：兔出血症病毒经典型与兔出血症病毒2型: 本文件描述了兔出血症病毒（Rabbit haemorrhagic disease virus,RHDV）经典型与兔出血症病毒2型（Rabbit haemorrhagic disease virus 2,RHDV2）实时荧...; 肖跃强沈志强孙培姣杨慧刘吉山王玉茂王金良谢金文黄兵于新友郭广君

LAMP-CRISPR/Cas12a可视化鉴别RHDV 1型和2型的试剂盒及方法: 本发明提供了LAMP‑CRISPR/Cas12a可视化鉴别RHDV 1型和2型的试剂盒及方法，属于病原微生物检测技术领域。本发明建立了针对RHDV1和RHDV2的LAMP‑CRISPR/Cas12a快速检测试剂盒和方法，...; 宋艳华王芳伍孟婷陈萌萌仇汝龙范志宇胡波魏后军葛雷李一鸣

RAA-LFD检测RHdV-2方法的建立: 2024年; 【目的】建立基于重组酶介导的核酸等温扩增(RAA)的侧流层析试纸条(LFD)方法,用于快速诊断兔出血症病毒(RHdV)2型(RHdV-2)。【方法】采用生物信息学软件分析RHdV-2、RHdV 1型(RHdV^(-1))基因组,筛选RHdV-2特异且保守的片段,设计RAA-LFD探针与特异性引物,以筛选最适引物及其浓度;对RAA-LFD检测的最适反应温度和时间进行优化,并对该方法的灵敏性、特异性、重复性进行评价及临床样品检测。【结果】同源性分析表明,RHdV-2的VP60基因存在特异且保守的序列。基于VP60基因设计3对引物,发现上游引物序列为5'-TCATTTGTACCCTTCAGCGGTACCACCATCC-3'、下游引物序列为5'-CCCGGCTGTTGTCTGGTTTATGCCATTT-3'的扩增效果最好,引物与探针混合液的最适浓度为5.000μmol·L^(-1)。用LFD-RAA方法检测RHdV-2的最适反应温度为39℃,最适反应时间为30 min。敏感性检测结果显示:以RHdV-2 VP60重组质粒为模板的最低检出量为6.7×103 ng·μL^(-1)。用建立的RAA-LFD方法对RHdV^(-1)的检测结果呈阴性,对RHdV-2的检测结果呈阳性,表明该方法的特异性良好。重复性检测结果显示,同一批次和不同批次试剂盒的检测结果均一致,表明重复性好。31份临床样品检测结果显示,5份为RHdV-2阳性样品。【结论】建立的检测RHdV-2的RAA-LFD方法具有简捷、易操作的特点,适合养殖场对RHdV-2的快速诊断。; 刘立荣许高琳郑娱游泽龙王全溪; 关键词：兔出血症病毒

LAMP-CRISPR/Cas12a可视化鉴别RHDV 1型和2型的试剂盒及方法: 本发明提供了LAMP‑CRISPR/Cas12a可视化鉴别RHDV 1型和2型的试剂盒及方法，属于病原微生物检测技术领域。本发明建立了针对RHDV1和RHDV2的LAMP‑CRISPR/Cas12a快速检测试剂盒和方法，...; 宋艳华王芳伍孟婷陈萌萌仇汝龙范志宇胡波魏后军葛雷李一鸣

RHDV2可视化LAMP检测冻干微球的试制: 兔出血症（rabbit hemorrhagic disease）俗称兔瘟,是由嵌杯病毒科兔病毒属的兔出血症病毒（rabbit hemorrhagic disease virus,RHDV）引起的一种热性、急性传染病。该病...; 张晗

Kozak序列引导的表达兔出血症病毒2型VP60蛋白重组腺病毒的构建及鉴定被引量：3: 2023年; 【目的】试验旨在以复制缺陷型人5型腺病毒(Ad5)为载体,构建Kozak序列引导的表达兔出血症病毒2型(RHDV2)VP60蛋白的重组腺病毒,为RHDV2新型疫苗研究提供依据。【方法】修饰、合成带有Kozak序列的VP 60基因序列,将其与腺病毒穿梭质粒进行重组,转化大肠杆菌TOP10感受态细胞,构建重组腺病毒穿梭质粒,并利用酶切与测序对重组腺病毒穿梭质粒进行鉴定;采用Ad Max腺病毒包装系统,基于HEK293细胞进行穿梭质粒与腺病毒骨架质粒的定点同源重组,构建重组腺病毒Ad5-RHDV2-VP60并感染HEK293细胞,通过RT-PCR、Western blotting及间接免疫荧光试验(IFA)对重组腺病毒进行表达验证;利用Reed-Muench方法测定重组腺病毒的病毒滴度。【结果】重组腺病毒穿梭质粒酶切鉴定结果可见2条大小分别为3895和1752 bp的条带,测序比对结果显示,其与GenBank中公布的相应序列相似性>99%,表明穿梭质粒构建成功。RT-PCR结果可见大小约为515 bp的特异性条带;Western blotting结果显示,大小约为60 ku的VP60蛋白特异性条带;IFA观察结果显示,感染重组腺病毒的HEK293细胞产生了绿色荧光,表明重组病毒能在HEK293细胞中表达VP60蛋白,且该蛋白具有良好的抗原性;病毒滴度测定结果显示,初代重组腺病毒的TCID_(50)为10^(5.5)/0.1 mL。【结论】本试验构建了含RHDV2 VP 60基因的重组腺病毒,并成功表达了RHDV2 VP60蛋白,为进一步研究开发RHDV2疫苗提供了病毒模型。; 肖璐于吉锋罗燕谢晶叶勇刚吴学婧毛从剑李兴玉曹冶林毅潘梦叶健强魏勇康润敏; 关键词：兔瘟重组腺病毒 HEK293细胞 KOZAK序列

RHDV RdRp基因的克隆分析及其蛋白功能初步研究: 兔病毒性出血症（Rabbithemorrhagicdisease,RHD）又称兔瘟，是由杯状病毒科兔病毒属兔出血症病毒（Rabbithemorrhagicdiseasevirus，RHDV）引起的一种急性、高度传染性疾病...; 庞雪晴; 关键词：兔病毒性出血症多克隆抗体

一种同时检测RHDV1和RHDV2的引物、探针及其试剂盒: 本发明公开了一种同时检测RHDV1和RHDV2的引物、探针及其试剂盒。引物序列如SEQ ID NO.1～4所示，探针序列分别如SEQ ID NO.5和SEQ ID NO.6所示，探针的5’端标记有荧光基团，3’端标记有猝...; 杜德燕邱文英罗颖易洁申建青李金海

加载更多 ∨

相关作者

用户反馈

相关作者

用户登录

用户反馈