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李彦姝: 作品数：46 被引量：59H指数：4; 供职机构：中国医科大学更多>>; 发文基金：国家自然科学基金国家教育部博士点基金辽宁省高校创新团队支持计划更多>>; 相关领域：医药卫生生物学语言文字文化科学更多>>

合作作者

GFP-hERα重组质粒的构建及蛋白表达和细胞内定位的研究: 2011年; 目的构建hERα真核表达载体并证实融合蛋白在细胞内表达及定位。方法以pcDNA3.1-flag-hERα重组质粒(Dr.Muyan M馈赠)为模板,PCR扩增hERα全长编码基因,亚克隆至pEGFP-C1表达载体。将构建的重组质粒测序并转染到乳腺癌细胞MCF-7中,提取细胞蛋白进行Western blot检测。利用共聚焦激光扫描显微镜观察pEGFP-hERα在MCF-7细胞内定位。结果 hERα全长基因序列克隆到了真核表达载体pEGFP-C1中,酶切鉴定片段为1800bp。Western blot检测到了融合蛋白表达,分子量约为95KD,pEGFP-hERα在乳腺癌细胞MCF-7细胞内定位于细胞核内。结论成功的构建了hERα全长基因真核表达载体pEGFP-hERα,融合蛋白定位于乳腺癌细胞核内。; 刘芙蓉李彦姝张红艳李丰; 关键词：WESTERN BLOT

小鼠3D3／LYRIC基因重组质粒构建及蛋白表达和定位: 2011年; 目的构建小鼠3D3/LYRIC真核表达载体并证实融合蛋白在细胞内的表达及定位。方法提取小鼠乳腺上皮细胞系C127的mRNA,反转录为cDNA。PCR扩增m3D3/LYRIC全长编码基因,亚克隆至pEGFP-C1表达载体中。将构建的重组质粒测序并转染到腺样囊性癌细胞系ACC-2中,提取细胞蛋白进行Western blot检测。利用免疫荧光显微镜观察pEGFP-m3D3/LYRIC在腺样囊性癌ACC-2细胞内的定位。结果 m3D3/LYRIC全长基因序列克隆到真核表达载体pEGFP-C1中,酶切鉴定片段大小为1 740 bp。Western blot检测到融合蛋白GFP-m3D3/LYRIC表达,分子量约为91 kDa。pEGFP-C1-m3D3/LYRIC主要在细胞质内定位,在细胞核内未见表达。结论成功构建了m3D3/LYRIC全长基因真核表达载体,pEGFP-m3D3/LYRIC蛋白主要定位于细胞质内。; 代炜李彦姝李妍孙长伏; 关键词：腺样囊性癌 AEG-1

人SCG10基因原核质粒构建及其重组蛋白表达: 2011年; 目的构建SCG10的原核表达载体并诱导、纯化和鉴定其表达。方法 pcDNA3.1-SCG10质粒用BamHⅠ和XhoⅠ双酶切后,克隆至pGEX-5X-1载体,IPTG(异丙基硫代半乳糖苷)在BL21大肠杆菌中诱导glutathione S-transferase(GST)-SCG10融合蛋白表达,利用GST-beads纯化诱导的融合蛋白,经Western blot印迹鉴定。结果 SCG10全长编码序列克隆至pGEX-5X-1载体中,双酶切鉴定片段大小为500 bp,在BL21大肠杆菌中IPTG诱导融合蛋白的表达分子量为47 kDa,成功纯化出GST及GST-SCG10蛋白,Wstern blot检测到蛋白表达。结论构建了SCG10基因原核表达载体,鉴定了GST-SCG10融合蛋白表达。; 刘芙蓉李彦姝张红艳苏楠李家滨李丰; 关键词：融合蛋白 WESTERN BLOT

乳腺癌细胞系中雌激素下调E-钙粘蛋白表达水平被引量：2: 2012年; 目的观察雌激素(E2)对乳腺癌MCF7细胞中E-钙粘蛋白基因(CDH)的调控。方法使用Western blot、Real Time PCR分别在蛋白和RNA水平上观察雌激素如何影响E-钙粘蛋白。使用双荧光素酶报告系统检测雌激素如何影响E-钙粘蛋白启动子活性。结果雌激素下调乳腺癌MCF7细胞中E-钙粘蛋白的蛋白和RNA水平,并且能够下调E-钙粘蛋白的启动子活性。结论雌激素下调乳腺癌细胞中E-钙粘蛋白基因,为进一步探讨乳腺癌发病机制提供有力证据。; 张红艳李彦姝王春玉王迪柯强李丰; 关键词：雌激素 E-钙粘蛋白

酵母双杂交顺转法筛选相互作用蛋白质: 本文运用改良的顺序转化酵母双杂交技术,筛选信号转导分子 PAK4的相互作用蛋白。提供了一种有效、经济而快速的酵母双杂交筛选相互作用蛋白质的方法。构建重组诱饵质粒 pGBKT7/PAK4,制备酵母 AH109感受态,将重组...; 李彦姝; 关键词：PAK 酵母双杂交; 文献传递

hLMO4基因重组质粒的构建及蛋白表达和定位被引量：4: 2009年; 目的构建hLMO4真核表达载体并证实融合蛋白在细胞内表达及定位。方法提取人乳腺癌MCF-7细胞的mRNA,反转录为cDNA。PCR扩增hLMO4全长编码基因,亚克隆至pCDNA3.1-myc-hisA表达载体中。将构建的重组质粒测序并转染到胃癌细胞BGC823中,提取细胞蛋白进行Western blot检测。利用共聚焦激光扫描显微镜观察pEGFP-LMO4在乳腺癌MCF-7细胞内定位。结果hLMO4全长基因序列克隆到了真核表达载体pCDNA3.1-myc-hisA中,酶切鉴定片段为500bp。Western blot检测到了融合蛋白表达,分子量约为23KD。pEGFP-LMO4在乳腺癌MCF-7细胞内定位以细胞核为主,在细胞浆内少量表达。结论成功的构建了hLMO4全长基因真核表达载体,pEGFP-LMO4蛋白定位于乳腺癌细胞质和核内。; 李彦姝王春玉苏楠张红艳李丹妮李丰; 关键词：乳腺癌 WESTERN BLOT

CUEDC2通过活化PI3K/Akt信号通路促进乳腺癌细胞的生长被引量：9: 2017年; 目的:探讨CUE结构域2(CUE domain-containing 2,CUEDC2)蛋白在人乳腺癌细胞中的生物学作用。方法:人乳腺肿瘤细胞MCF-7转染的Myc-CUEDC2真核表达载体,提取转染细胞的总蛋白检测磷酸化Akt和总Akt的表达变化。利用CCK-8检测过表达CUEDC2后MCF-7细胞的生长。结果:CUEDC2能够活化Akt,使磷酸化Akt表达增加,能够促进人乳腺癌细胞生长。结论:当乳腺癌中CUEDC2表达增高时,能够引起PI3K/Akt信号通路活化,促进肿瘤细胞生长。; 李彦姝高云玲张红艳汤丽娜刘芙蓉李丰; 关键词：乳腺肿瘤 CUEDC2 细胞生长

PAK4促进人乳腺肿瘤细胞G1/S期转化机制探讨被引量：7: 2015年; 目的研究p21蛋白激活激酶4(p21protein activated kinase 4,PAK4)对人乳腺肿瘤细胞生长的影响。方法人乳腺肿瘤细胞MCF-7转染不同剂量PAK4真核表达载体或慢病毒敲除PAK4表达,收集细胞提取蛋白进行蛋白质印迹法检测PAK4和Cyclin D1表达。流式细胞仪检测PAK4过表达和敲除后对细胞生长周期影响。结果过表达PAK4明显上调人乳腺肿瘤细胞MCF-7中的Cyclin D1蛋白表达,引起G1期细胞减少(从80%下降到55%),导致G1/S期转化细胞增多。慢病毒敲除人乳腺肿瘤细胞MCF-7中的PAK4表达降低了的Cyclin D1蛋白表达,使G1期的细胞增加12%,而S期的细胞下调7%。结论 PAK4调节Cyclin D1表达,促进人乳腺肿瘤细胞MCF-7G1/S期转化,揭示PAK4可能是重要的人乳腺肿瘤治疗靶点。; 李彦姝张红艳刘芙蓉李丰; 关键词：乳腺肿瘤 CYCLIN D1 细胞周期慢病毒

信号转导分子PAK4相互作用蛋白质的筛选: 信号转导分子PAK4相互作用蛋白质的筛选前言肿瘤是世界范围内人类疾病,其发病率持续上升,严重威胁着人们的身心健康。因此,对于肿瘤的发病机制及诊断治疗研究成为我国目前对肿瘤研...; 李彦姝; 关键词：酵母双杂交肿瘤; 文献传递