张红艳
- 作品数:34 被引量:51H指数:4
- 供职机构:中国医科大学更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金国家教育部博士点基金辽宁省高校创新团队支持计划更多>>
- 相关领域:医药卫生生物学更多>>
- TGF-β/TβR1通路通过上调MMP2表达促进头颈鳞状细胞癌侵袭被引量:4
- 2012年
- 目的:研究转化生长因子受体1(TβR1)与基质金属蛋白酶-2(MMP2)在头颈鳞状细胞癌中的关系及其对肿瘤细胞侵袭转移机制的调控。方法:构建稳定过表达TβR1的UM-SCC-23细胞系,SDS-PAGE电泳和蛋白质印迹法鉴定细胞系构建。利用Real-time PCR和蛋白质印迹法检测MMP2在稳转细胞系中的表达。细胞侵袭试验检测稳转TβR1的UM-SCC-23细胞系侵袭能力。结果:成功构建了稳定表达TβR1的UM-SCC-23,MMP2在TβR1过表达的UM-SCC-23细胞中基因和蛋白水平表达均增高,稳定表达了TβR1的UM-SCC-23细胞侵袭能力增强。结论:TGF-β/TβR1通路能够上调MMP2表达,促进头颈鳞状细胞癌侵袭能力增强。
- 代炜姚远李彦姝张红艳李妍秦兴军
- 关键词:基质金属蛋白酶-2
- hPAK4基因重组质粒的构建及蛋白表达
- 2010年
- 目的构建hPAK4真核表达载体,证实融合蛋白在细胞内表达,融合蛋白可以用于GST-pulldown实验。方法提取人乳腺癌细胞MCF-7mRNA,反转录为cDNA。PCR扩增hPAK4全长编码基因,亚克隆至含有GST标签的真核表达载体中。将构建的重组质粒测序并转染到人胚胎肾细胞HEK293中,提取细胞蛋白进行Western blot检测,同时进行GST-pulldown实验。结果hPAK4全长基因序列克隆到真核表达载体pEBG中,酶切鉴定片段为1800bp。Westernblot检测到融合蛋白GST-hPAK4的表达,分子量约为94kDa,融合蛋白能够被Glutathione Sepharose4B沉淀。结论成功构建了hPAK4全长基因真核表达载体,同时鉴定了GST-hPAK4融合蛋白的表达,并且能够被Glutathione Sepharose4B沉淀。
- 张红艳李彦姝王春玉苏楠李丹妮李丰
- 关键词:蛋白质印迹融合蛋白
- PAK4负调控胃癌细胞TGF-β1/Smads信号通路
- PAK4是一种丝苏氨酸蛋白激酶,它在多种肿瘤细胞系中高表达,在细胞生长、迁移及侵袭过程中起作用.我们发现了3个新的PAK4互作蛋白:Smad2、Smad3及Smad4.首先,利用体内体外试验证实了它们的相互作用,并确定了...
- 王春玉李彦姝张红艳李丰
- 关键词:TGF-Β1胃癌
- pGEX-5X-1-hLMO4原核质粒构建及重组蛋白表达被引量:4
- 2012年
- 目的:构建hLMO4的原核表达载体并诱导、纯化和鉴定其表达。方法:hLMO4全长编码基因经BamHⅠ和XhoⅠ双酶切后,克隆至GST融合表达载体pGEX-5X-1,异丙基β-D硫代半乳糖苷(IPTG)在BL21大肠杆菌中诱导GST-hLMO4融合蛋白表达,利用Glutathione Sepharose 4B纯化诱导的融合蛋白,并经Western blot鉴定结果。结果:hLMO4编码序列克隆至pGEX-5X-1载体中,双酶切鉴定片段大小为500 bp,在E.coli BL21中IPTG诱导融合蛋白的表达,分子质量约为49 000 Da,成功纯化出GST及GST-hLMO4蛋白,Western blot检测到蛋白表达。结论:构建了hLMO4基因原核表达载体,鉴定了GST-hLMO4融合蛋白表达。
- 张红艳李彦姝姚远王春玉王迪李丰
- 关键词:蛋白纯化融合蛋白
- GL-1196 Suppresses the Proliferation and Invasion of Gastric Cancer Cells via Targeting PAK4 and Inhibiting PAK4-Mediated Signaling Pathways
- Gastric cancer,which is the most common malignant gastrointestinal tumor,has jumped to the third leading cause...
- 张健张红艳李丰
- RGS5在乳腺癌组织和细胞系中的表达和定位
- 2018年
- 目的:探讨G蛋白信号转导调节蛋白5(RGS5)在人乳腺癌细胞系中的表达。方法:提取人正常乳腺上皮细胞HBL100,人乳腺癌细胞系MCF-7,ZR-75-1,ZR-75-30,MDA-MB-231,HCC1937的总蛋白和总RNA,提取细胞的总蛋白和总RNA进行蛋白免疫印迹和实时定量PCR检测RGS5的表达。共聚焦激光扫描显微镜观察RGS5胞内定位;免疫组化检测RGS5在乳腺肿瘤组织中表达情况。结果:MDA-MB-231细胞系中RGS5基因表达上调,MCF7和ZR-75-1细胞系中RGS5蛋白表达提高。结论:RGS5在乳腺癌细胞的高表达可能参与其生长和转移,揭示RGS5可能是人乳腺肿瘤的治疗靶点。
- 孙舟彤何妍彦张红艳
- 关键词:乳腺癌蛋白表达
- CUEDC2通过上皮-间质转化促进人乳腺癌MCF-7细胞侵袭转移被引量:6
- 2016年
- 目的:探讨CUE结构域2(CUE domain-containing 2,CUEDC2)蛋白对人乳腺肿瘤细胞侵袭转移的作用机制。方法:人乳腺肿瘤细胞MCF-7转染的Myc-CUEDC2真核表达载体,提取转染细胞的总蛋白和总RNA进行蛋白免疫印迹和实时定量PCR检测上皮-间质转化(EMT)标志物上皮-钙黏蛋白(E-cadherin)和转录因子SLUG的表达。结果:过表达CUEDC2蛋白能够下调E-cadherin蛋白和基因的表达,而上调转录因子SLUG基因和蛋白的表达。结论:CUEDC2可能参与调节乳腺肿瘤细胞发生上皮-间质转化,促进乳腺肿瘤侵袭转移的发生,CUEDC2可能是人乳腺肿瘤侵袭转移的治疗靶点。
- 李彦姝汤丽娜张红艳高云凌李丰
- 关键词:乳腺肿瘤上皮-间质转化
- 氟西汀对星形胶质细胞中ΔFosB表达的影响
- 前言:
转录因子△FosB是Fos家族的一名成员,是FosB基因的剪接变体,与Fos家族其它成员一样,在接受急性刺激后,能够短暂而迅速的在特定区域表达,在接受长期刺激后,△FosB能够在脑内特定区域聚集,这些刺...
- 张红艳
- 关键词:氟西汀星形胶质细胞蛋白表达抗抑郁药蛋白免疫印迹
- 文献传递
- GFP-hERα重组质粒的构建及蛋白表达和细胞内定位的研究
- 2011年
- 目的构建hERα真核表达载体并证实融合蛋白在细胞内表达及定位。方法以pcDNA3.1-flag-hERα重组质粒(Dr.Muyan M馈赠)为模板,PCR扩增hERα全长编码基因,亚克隆至pEGFP-C1表达载体。将构建的重组质粒测序并转染到乳腺癌细胞MCF-7中,提取细胞蛋白进行Western blot检测。利用共聚焦激光扫描显微镜观察pEGFP-hERα在MCF-7细胞内定位。结果 hERα全长基因序列克隆到了真核表达载体pEGFP-C1中,酶切鉴定片段为1800bp。Western blot检测到了融合蛋白表达,分子量约为95KD,pEGFP-hERα在乳腺癌细胞MCF-7细胞内定位于细胞核内。结论成功的构建了hERα全长基因真核表达载体pEGFP-hERα,融合蛋白定位于乳腺癌细胞核内。
- 刘芙蓉李彦姝张红艳李丰
- 关键词:WESTERNBLOT
- 医学研究生分子细胞生物学技术实验课的探索与改革被引量:3
- 2019年
- 分子细胞生物学是在分子水平研究细胞生命活动基本规律的前沿学科。在研究生教学中开设分子细胞生物学技术实验课,可以有效地提高研究生科研思维及动手能力。为此,中国医科大学分子细胞生物学教研室在研究生选修课教学中设置了分子细胞生物学技术实验课。通过系统理论讲授与实验操作相结合的方式,不仅启迪了研究生(特别是临床型研究生)的科研思路,同时通过研究生亲自参与分子克隆、细胞培养、荧光素酶双报告基因检测等实验操作及数据分析,提高了研究生的动手操作和科研分析能力,为研究生未来的科学研究奠定了基础。
- 李洋张红艳李丰
- 关键词:医学研究生教育