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MTT比色法测定7株抗hIL-5mAb对TF-1细胞的增殖抑制活性: 1998年; 利用人红白血病细胞系（ＴＦ－１）细胞具有对ｈＩＬ－５依赖生长的特性，采用四甲基偶氮唑盐（ＭＴＴ）法〔１〕对所制备的抗ｈＩＬ－５ｍＡｂ进行活性测定。１材料与方法１．１细胞和试剂ＴＦ－１由中国科学院上海生物工程研究中心保存，ｈＩＬ－５标准品为英国Ｐｅｒｏ...; 史皆然方佳孙滨卢芳陈常庆; 关键词：单克隆抗体免疫活性比色法

人肿瘤坏死因子α组合突变体生物学特性的研究被引量：1: 2001年; 目的研究ｈＴＮＦα的结构与功能。方法比较了野生型ｈＴＮＦα与其单突变体Ｒ２Ｋ－、Ｎ３０Ｓ－、Ｒ３２Ｗ－和Ｌ１５７Ｆ－ｈＴＮＦα及两种组合突变体Ｒ３２Ｗ－Ｌ１５７Ｆ－ｈＴＮＦα和Ｒ２Ｋ－Ｎ３０Ｓ－Ｒ３２Ｗ－Ｌ１５７Ｆ－ｈＴＮＦα的细胞毒活性、受体结合能力，以及动物体内毒性。结果发现两种组合突变体基本保持了与野生型相当的对人肿瘤细胞的细胞毒活性，但对小鼠Ｌ９２９细胞的活性明显下降；两种组合突变体与ｈＴＲ７５的结合能力的下降程度要大于ｈＴＲ５５；小鼠体内毒性测定实验表明，两种组合突变体的毒性显著降低，其中双突变体的ＬＤ５０为野生型的３００倍左右，而四突变体对小鼠的体内毒性比野生型下降了７００倍以上；四突变体对恒河猴的体内毒性也比野生型ｈＴＮＦα明显降低。结论获得具有潜在应用价值的ＴＮＦ－α四突变体。; 卢芳刘惠罗锐陈常庆; 关键词：肿瘤坏死因子Α 生物学特性细胞毒活性

含P_R启动子的原核高效表达载体的构建及应用被引量：3: 1999年; 组建了一个仅含ＰＲ启动子的原核高效表达载体ｐＲＣ，它同时含有ｃⅠ调控基因、多酶切位点和两个强的转录终止序列．现已成功地用于表达重组人肿瘤坏死因子α（ｈＴＮＦα）、重组人白细胞介素３（ｈＩＬ３）和抗溶菌酶（ＨＥＬ）抗体Ｆｄ基因，表达量均占菌体总蛋白的３６％以上．同时还研究了不同的宿主菌和原核增强子序列等因素对ＰＲ启动子载体表达的影响．此外，还比较了分别以ＰＲ、ＰＬ或ＰＲＰＬ作为启动子时表达ｈＴＮＦα的情况，结果表明，单用ＰＲ或ＰＬ启动子可获得与使用ＰＲＰＬ; 陈建军孙苗陈常庆卢芳王德宝; 关键词：启动子增强子

人肿瘤坏死因子受体及其与人肿瘤坏死因子相互作用的研究: 为了研究人TNF p75受体(hTR75)的功能以及它与人TNF p55受体(hTR55)的相互作用,用电脉冲将hTR75及其缺失TRAF2结合位点以及缺失胞内区突变体的基因转入只有内源hTR55表达的HEp-2细胞中构...; 卢芳; 关键词：人肿瘤坏死因子细胞毒活性 TRAF2 基因表达细胞毒效应; 文献传递

hsTR55/TR75-preS1融合蛋白的表达与应用: 2001年; 目的简化测定hTNFα及其突变体的受体竞争结合活性的方法。方法将乙型肝炎病毒表面抗原(HBsAg)前区(preS1)肽段(2～50)编码区,分别融合于hsTR55和hsTR75基因的C末端组成融合受体分子基因,并利用细小RNA病毒属脑炎心肌炎病毒EMCV的内核糖体进入位点(internalribosomeentrysite,IRES),构建了hsTR55/hsTR75以及它们与preS1组成的融合受体分子hsTR55hsTR75-preS1基因和新霉素抗性(neoR)基因的双顺反子表达载体,转染BHK-21细胞后用G-418持续筛选得到稳定表达目的蛋白的细胞株。结果RT-PCR及ELISA均证实,两种融合受体分子表达,并且表达上清对hTNFα的活性均具有一定的中和作用。在对表达上清进行ELISA定量后,我们还用Biosensor方法测定了这些可溶性受体分子与hTNFα的结合常数。结果表明,在融合preS1肽段前后,hTNFα与受体分子的解离常数变化不大。结论利用表达的两种融合受体分子,成功地建立了一种检测hTNFα及其突变体的受体竞争结合活性的ELISA法,并利用该法测定了野生型hTNFα及其4种突变体的受体竞争结合活性,所获结果与利用125I-hTNFα测定的结果具有相当的可比性。; 方佳卢芳陈常庆; 关键词：人肿瘤坏死因子可溶性受体 PRES1

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卢芳