王德宝
- 作品数：63 被引量：116H指数：5
- 供职机构：中国科学院上海生命科学研究院生物化学与细胞生物学研究所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家高技术研究发展计划国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生农业科学更多>>
- 建议开展核糖体RNA拓扑学与核糖体失活蛋白的研究
- 1991年
- (一)核糖体RNA拓扑学研究的重要性核糖体是细胞合成蛋白质的唯一场所。核糖体包括两个亚基,由RNA和蛋白质组成,蛋白质占1/3,而RNA占2/3,即RNA是主要组分。蛋白质生物合成的大多数步骤,包括肽链合成的起始、延伸和终止都是在核糖体上进行的。整个合成过程涉及二百多种生物大分子的协同作用。在蛋白质生物合成中,重要的是肽键的形成。这一化学反应就是在核糖体上进行的。核糖体的任何个别组分或局部组分都不能催化肽键的形成,而必须是完整的核糖体。
- 刘望夷王德宝
- 关键词：核糖体核糖核酸拓扑学失活蛋白
- 酵母丙氨酸tRNA类似物的合成及其生物活力的测定被引量：3
- 1991年
- 在体外系统中,T 7-RNA聚合酶转录编码酵母丙氨酸tRNA及其半分子的DNA,获得不含修饰核苷酸的酵母丙氨酸tRNA及其5’半分子(1-35位核苷酸)和3'半分子(37-75位核苷酸).在T4-RNA连接酶的催化下,不含修饰核苷酸的5'半分子(1-35位核苷酸)和3'半分子(37-75位核苷酸)分别与天然的3'半分子(36-75位核苷酸)和5'半分子(1-36位核苷酸)连接成tRNA类似物.用以上方法得到了酵母丙氨酸tRNA的3个类似物:(1)tRNA的5'半分子不含修饰核苷酸;(2)tRNA的3'半分子不含修饰核苷酸;(3)整个tRNA分子不含有修饰核苷酸.在鼠肝氨酰tRNA合成酶系统中测定tRNA接受丙氨酸的活力,在兔网质无细胞蛋白质合成系统中测定tRNA将丙氨酸参入蛋白质的活力.结果是:5'半分子不含修饰核苷酸者,其接受丙氨酸的活力降低52％,而参入丙氨酸的活力基本不变;3'半分子不含修饰核苷酸者,其接受丙氨酸的活力降低79％,参入活力降低57％;整个分子不含修饰核苷酸者接受丙氨酸的活力降低85％,参入活力降低47％.这些结果说明修饰核苷酸,尤其是3'半分子的修饰核苷酸与tRNA的接受活力和参入活力间有密切的关系.
- 刘建华王德宝
- 关键词：酵母丙氨酸TRNA
- 全文增补中
- 反义寡核苷酸抑制人急性早幼粒细胞白血病细胞增殖和蛋白表达
- 2001年
- 目的 :研究反义寡核苷酸 (antisenseoligonucleotides)对人体引起急性早幼粒细胞白血病的HL 6 0细胞增殖和蛋白质表达的抑制作用。方法 :设计和合成了不同序列、长度和核苷酸磷酸根上有无修饰的多种脱氧寡核苷酸片段 ,进行了对HL 6 0细胞的生长抑制和蛋白表达的抑制试验 ,也测定了它们对人体正常淋巴细胞的毒性。结果 :发现互补于C mycmRNA的 2个区域的反义寡核苷酸序列 (5′ 4 4 6 1和 5′ 556 576 )有较好的抑制效率 ,在一定时间内 ,HL 6 0细胞增殖抑制分别达到 59.5%和6 2 .7% ,并且它们对人体正常淋巴细胞无毒性作用。结论 :我们新设计的互补于 5′ 4 4 6 1序列片段对HL 6 0细胞增殖有抑制作用 ,有望发展成抑制HL 6 0细胞增殖的核酸药物。
- 裘慕绥陈健王德宝单易非汤华高红阳
- 关键词：反义寡核苷酸细胞增殖
- 几种核糖体失活蛋白对超螺旋环状DNA的切割与解旋作用被引量：2
- 1992年
- 天花粉蛋白(trichosanthin)是一种单链核糖体失活蛋白(ribosome-inactivating protein,RIP),它失活核糖体的机制属于RNA N-糖苷酶型。最近Li等发现天花粉蛋白可作用于超螺旋环状DNA,将其切割与解旋成缺口及线状分子,但并不作用于线状DNA。
- 凌俊刘望夷王德宝
- 关键词：核糖体失活蛋白
- 酵母tRNA结合蛋白(43kD蛋白)羧端cDNA的克隆及其序列测定被引量：1
- 2002年
- 为了研究酵母分子量为 4 3kD的tRNA结合蛋白的基因来源 ,通过溴化氰部分化学裂解此蛋白 ,产生的 18kD肽段经过蛋白质氨端序列测定 ,测得 18kD肽段氨端部分序列为AFTFKK .针对序列AFTFKK设计简并引物 ,利用简并PCR方法和cDNA的 3′末端的快速扩增方法 (3′RACE) ,成功克隆 4 3kD蛋白mRNA的 3′端序列 .DNA序列测定结果表明 ,该序列位于 3 磷酸甘油酸激酶 (PGK1)基因 10 0 3位— 170 0位 ,长度为 6 98bp ,编码 3 磷酸甘油酸激酶羧基端的 180氨基酸残基以及 3′端非翻译区 .结果证实 ,4
- 刘全胜刘建华金由辛王德宝
- 关键词：酵母克隆
- 两株中和性抗hTNFα单抗可变区与hTNFα相互作用的计算机模拟及实验研究
- 2000年
- 在SGI图形工作站上,用同源蛋白结构预测的方法,建立了2株中和性抗hTNFα小鼠单抗(1C3E6,3F6A10)可变区的三维结构模型;并在实验研究2株单抗表位特异性的基础上,根据2株单抗与hTNFα分子表面的形状、静电性、疏水性、氢键等性质,对2株单抗可变区与hTNFα分子的可能结合模式进行了模拟和分析。再根据结合模型,设计并制备了2个hTNFα突变体,然后从实验与计算机模拟两方面着手,对比研究了hTNFα突变前后与两株单抗的结合能力与结合方式的变化。对比研究结果支持了结合模型,该结合模型的建立,为下一步的抗体人源化或小分子化改造等打下了基础。
- 陈建军孙苗方佳刘惠陈常庆王德宝
- 关键词：HTNFΑ单克隆抗体
- 大鼠甘氨肽α-羟化单氧酶在昆虫细胞中的活性表达被引量：2
- 1998年
- 将编码大鼠甘氨肽α－羟化单氧酶（ＰＨＭ）ｃＤＮＡ基因，插入昆虫杆状病毒转移表达载体ｐＢａｃＰＡＫ８，构建成表达质粒ｐＢａｃＰＨＭ２，与修饰的银纹夜蛾核多角体病毒ＢａｃＰＡＫ６线性化ＤＮＡ共转染秋粘虫细胞Ｓｆ２１，通过同源重组，得到在核多角体蛋白基因启动子控制下的ＰＨＭ基因的重组病毒ＢａｃＰＨＭ。用ＢａｃＰＨＭ感染Ｓｆ２１细胞，无血清培养上清在７２小时后检测到酰胺化酶最高活力；用细胞免疫组化法和免疫印迹法检测表达产物，胞内及胞外培养上清液中均显示有约４１ｋＤ的ＰＨＭ表达产物，胞内、胞外产量分别约为５μｇ／１０５细胞数、１μｇ／ｍｌ培养基／１０５细胞数，且分泌至培养基中的酶活力远高于胞内。
- 江智红黄荣杨宇虹吴祥甫李伯良王德宝
- 关键词：酰胺化核多角体病毒活性表达PHM
- 带脱氧反密码子的酵母丙氨酸tRNA类似物失去了它的掺入活力被引量：1
- 1993年
- 在另一篇文章中,我们已经证明酵母丙氨酸tRNA接受茎中某些2′-羟基对于该tRNA与氨酰tRNA合成酶的识别是重要的。本文希望探讨酵母丙氨酸tRNA反密码子中的核糖的功能。我们以前的研究证明,酵母丙氨酸tRNA反密码环并不参与tRNA与合成酶的相互作用。因此可以用脱氧核糖核苷酸取代tRNA的反密码子而不用担心接受活力的丧失。我们的研究也证明了具有GGC(天然的为IGC)
- 龚佩娟包俊茹金由辛王德宝
- 可溶性核糖核酸的研究 Ⅴ N-甲酰溶肉瘤素及5-氟尿嘧啶对吉田肉瘤可溶性核糖核酸的影响
- 众所周知,肿瘤的恶性生长与蛋白质生物合成有密切关系,而可溶性核糖核酸,(以下簡称s-RNA)在蛋白质生物合成过程中起着重要作用。因此,研究抗肿瘤药对肿瘤 s-RNA有无作用将有助于闡明其作用机制。本文报告临床有效的两种抗...
- 韓銳王德宝
- 文献传递
- 可溶性核糖核酸的研究 Ⅲ 酵母可溶性核糖核酸中抗碱二核苷酸的分离与鉴定
- Tomlinson和Tener指出,若在DEAE-纤維素柱层析的洗脫液中添加尿素分離核酸的酶介产物,則低聚核苷酸的层析行为只与其所带負电荷的数目有关,而与碱基組成关系不大。参照上述結論,我們用类条件分离酵母可溶性核糖核酸...
- 祁国荣王德宝
- 文献传递
