刘喜东
- 作品数:4 被引量:8H指数:2
- 供职机构:吉林大学生命科学学院更多>>
- 发文基金:教育部“新世纪优秀人才支持计划”国家自然科学基金国家重点实验室开放基金更多>>
- 相关领域:理学化学工程更多>>
- 基于蛋白质组学的细胞色素P450和葡萄糖醛酸转移酶亚型绝对定量分析被引量:2
- 2014年
- 利用蛋白质组学方法,将大鼠肝微粒体样品进行胰蛋白酶水解;再利用液相色谱-串联质谱法(LCMS/MS),采用多反应监测模式(MRM),通过测定蛋白质水解后产生的特征酶切肽段,实现同时对大鼠肝微粒体内药物代谢酶P450和UGT的绝对定量。本实验首先建立标准工作曲线,对肝微粒体样品中P450和UGT进行定量,在线性范围内,相关系数r>0.995,线性关系良好,定量限≤10 nmol/L;以合成的稳定同位素标记特征肽段作为内标,对UGT1A1进行定量分析。结果表明,同位素标记特征肽段与未标记肽段色谱行为与质谱响应一致,在基质溶液中同位素标记肽段线性关系良好,利用标准曲线法和稳定同位素稀释法测得UGT1A1含量分别为17.30和18.23 nmol/g,两种方法所得结果基本一致,但稳定同位素稀释法操作简便,更适用于复杂样品的高通量测定。
- 刘喜东朱俊丛宇婷胡良海叶明亮顾景凯邹汉法
- 关键词:葡萄糖醛酸转移酶多反应监测肝微粒体细胞色素P450气相色谱-串联质谱
- 基于LC-MS/MS技术的药物代谢酶绝对定量方法研究
- 药物进入体内后可以通过原形或者活性/非活性的代谢产物被清除。当药物主要以代谢方式清除时,代谢途径对药物的安全性和疗效有很大的影响。在参与药物代谢的各类酶中,由CYP 酶和尿苷二磷酸-葡糖醛酸转移酶(UGT)介导的代谢反应...
- 胡良海刘喜东杨波顾景凯
- 关键词:药物代谢酶LC-MS/MS
- 药物代谢酶CYP450的种属差异性分析
- 药物在体内要经过吸收、分布、代谢和排泄的过程。在这个过程中,药物的代谢是影响药效和安全性的重要因素。在长期的进化过程中,为了适应环境变化,机体通过药物代谢酶类基因突变,以产生相应的酶蛋白来对付环境中的外来化合物,使得药物...
- 刘喜东杨波葛广波杨凌胡良海顾景凯
- 关键词:CYP450酶多反应监测种属差异
- 酶切型稳定同位素标记肽段为内标用于药物代谢酶的绝对定量分析被引量:6
- 2015年
- 利用带有酶切位点的稳定同位素标记肽段作内标,采取3种方式处理样品,考察了不同的样品处理过程对实验结果准确性的影响。首先合成不同长度的带有酶切位点的肽段,考察其酶解过程,实验结果表明,胰蛋白酶的活性位点具有一定的选择性,最终确定目标肽段两端分别加入3个氨基酸所形成的肽段为内标。分别采用在酶解前加入带酶切位点的稳定同位素标记肽段、不带酶切位点的稳定同位素标记肽段以及在酶解过程后、质谱检测前加入不带酶切位点的稳定同位素标记肽段3种方式处理样品。结果表明,采取第一种方式处理样品的测定结果更接近真实值,相对偏差范围更小,可减小蛋白质绝对定量分析的误差,提高分析结果的重现性。
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- 关键词:酶切位点药物代谢酶