冯进波
- 作品数:114 被引量:524H指数:11
- 供职机构:山东大学齐鲁医院更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金山东省自然科学基金国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域:医药卫生生物学化学工程轻工技术与工程更多>>
- 转染IL-16基因对T淋巴瘤细胞的增殖抑制作用被引量:7
- 2001年
- 目的 构建 IL-1 6真核表达载体 ,研究其对 T淋巴瘤细胞的增殖抑制作用。 方法 应用 RT-PCR技术从人外周血单个核细胞中获取 IL-1 6c DNA,构建并鉴定真核表达载体 Pc DNA3 -IL-1 6转染 Karpas T淋巴瘤细胞 ,采用 MTT法和流式细胞术分析 IL-1 6对 Karpas T淋巴瘤细胞的增殖抑制。 结果 PT-PCR显示转染 Pc DNA3 -IL-1 6的 Karpas T淋巴瘤细胞高表达 IL-1 6m RNA,MTT法检测显示其对 Karpas T淋巴瘤细胞具有抑制作用 ,流式细胞术检测转染 Pc DNA3 -IL-1 6的 Karpas T淋巴瘤细胞高表达 CD95分子。 结论 成功构建了真核表达载体 Pc DNA3 -IL-1 6,转染 Karpas T淋巴瘤细胞能使其生长受到明显抑制 ,并且 CD95分子表达增高 ,可能与诱导细胞凋亡有关 ,说明向肿瘤细胞转染 IL-1 6是一种有用的肿瘤生物治疗方法。
- 许晓群魏海明冯进波姚成芳王郡甫田志刚
- 关键词:淋巴瘤细胞IL-16转染PCDNA3CD95
- pEGFP-Kallikrein重组真核表达载体的构建及其在兔内皮祖细胞中的表达被引量:3
- 2006年
- 目的:构建携带人组织激肽释放酶(tHK)基因,以绿色荧光蛋白(GFP)为报告基因的重组真核表达载体,并导入兔内皮祖细胞(EPCs)中表达,验证tHK基因修饰EPCs用于血管病治疗的可行性。方法:PCR扩增tHK目的基因,将该全长基因定向克隆至真核表达载体pEGFP-N3上,构建重组质粒载体。并利用脂质体转染体外培养的EPCs,在活细胞状态下用荧光显微镜直接观察tHK-EGFP融合蛋白在细胞中的表达;用RT-PCR方法验证tHK在mRNA水平的表达;用ELISA方法验证tHK蛋白水平的表达。结果:酶切和测序证实pEGFP-Kallikrein重组质粒构建正确,重组质粒载体在EPCs中获得了表达,表达的融合蛋白具有tHK和EGFP的双重活性。结论:通过基因克隆方法成功构建了pEGFP-Kallikrein重组质粒载体,并且在EPCs中稳定表达,为进一步研究tHK基因修饰EPCs双重治疗血管病的技术策略奠定了基础。
- 姜虹李大庆张运刘春喜冯进波王荣
- 关键词:激肽释放酶类内皮干细胞基因转移技术
- 尿毒清对阿霉素肾病大鼠致纤维化因子表达的影响被引量:2
- 2009年
- 目的观察尿毒清对阿霉素(ADR)肾病大鼠肾脏转化生长因子-β1(TGF-β1)、金属蛋白酶1组织抑制剂(TIMP-1)、纤溶酶原激活物抑制物1(PAI-1)和骨调素(OPN)mRNA表达的影响,探讨尿毒清治疗慢性肾脏疾病的机制。方法成年雄性SD大鼠24只,采用单侧肾切除加重复尾静脉注射ADR的方法制作ADR肾病模型,随机分为正常组(N组)、模型组(M组)、尿毒清组(Ni组)、贝那普利组(B组)4组,每组6只。用药第4、8周后观察各组大鼠24h尿蛋白定量、血脂、血浆总蛋白(TP)、血浆白蛋白(ALB)、尿素氮(BUN)、肌酐(Scr)的水平,实时荧光定量PCR测定第8周肾组织中TGF-β1、TIMP-1、PAI-1及OPN mRNA的表达。结果尿毒清和贝那普利均能减少ADR肾病大鼠尿蛋白,降低BUN、Scr,升高血浆蛋白,纠正脂代谢紊乱,减少TGF-β1、TIMP-1、PAI-1及OPNmRNA的表达,与M组相比有显著差异(P<0.01);而Ni组PAI-1 mRNA水平较B组显著降低(P<0.01)。结论尿毒清可下调ADR肾病大鼠肾脏组织TGF-β1、TIMP-1、PAI-1及OPN mRNA的合成,可能是其治疗慢性肾脏疾病的重要机制之一。
- 王娜亓敏梁素忍冯进波彭涛裴斐胡昭
- 关键词:尿毒清阿霉素肾病金属蛋白酶1组织抑制剂纤溶酶原激活物抑制物1骨调素
- RASSF1 A基因在子宫内膜癌组织中的表达及意义被引量:5
- 2007年
- 目的:探讨RASSF1A(RAS相关区域家族1A)基因转录表达与子宫内膜癌发生、发展的关系。方法:采用逆转录-聚合酶链反应(PT-PCR)方法检测50例子宫内膜癌组织及20例正常子宫内膜组织中RASSF1A mRNA的表达水平。结果:①RASSF1A mRNA在所有正常子宫内膜组织中表达,而在子宫内膜癌组织中存在较高的表达缺失率(54%);②RASSF1A mRNA的表达缺失与子宫内膜癌手术病理分期、淋巴结转移、肌层浸润及病理组织学类型有明显相关性(P<0.05);RASSF1A mRNA表达缺失与年龄和病理分级未见明显相关(P>0.05)。结论:RASSF1A转录表达缺失可能参与调控子宫内膜癌的发生、发展过程,并进而影响其生物学特点及预后。
- 南芳芳姜洁夏敏董冯进波
- 关键词:子宫内膜肿瘤逆转录聚合酶链反应
- sMICA基因的克隆表达及其纯化被引量:1
- 2005年
- 目的构建重组MICA原核表达载体并探讨MICA对NK细胞毒效应的影响。方法经RT-PCR从Hela细胞获取MICA基因,经适当酶切后构建表达载体pBV220-MICA,转入大肠杆菌DH5α进行表达。重组MICA蛋白经纯化后与NK92细胞孵育观察对NK细胞毒效应的影响。结果带有重组质粒pBV220-MICA的大肠杆菌经热诱导后,以可溶性形式表达重组MICA蛋白,纯化后的重组MICA蛋白纯度为95%。经重组MICA处理的NK92细胞对MICA表达阳性的肿瘤细胞的杀伤作用明显降低。结论构建了pBV220-MICA重组质粒,并在大肠杆菌中获得可溶性表达,为研究MICA与NK细胞受体的相互作用机制奠定了基础。
- 王郡甫许晓群张彩冯进波张建华刘金生于锡巧田志刚
- 关键词:MICA基因克隆原核表达
- 重组人白细胞介素15表达载体的构建及其在大肠杆菌中的高效表达被引量:2
- 2000年
- 目的 :获得重组人白细胞介素 1 5 (rhIL 1 5 )高效表达菌株。方法 :经细菌脂多糖 +γ干扰素活化的人外周血单个核细胞提取细胞总RNA ,用RT PCR方法扩增出编码人IL 1 5cDNA的基因片段 ,采用 pBV2 2 0表达载体 ,经DNA重组技术构建IL 1 5基因工程菌。结果 :核酸序列测定与预期一致 ,所表达的IL 1 5经SDS PAGE证明分子量约 1 5kD ,表达量占菌体总蛋白的 2 8% ,经CTLl2 细胞检测 ,表达产物粗提物 1∶1 0 0复性后效价可达到1 0 6IU /ml。结论 :构建的基因工程菌为IL 1 5高效表达菌株。
- 孙汭田志刚魏海明刘杰张捷冯进波
- 关键词:DNA重组大肠杆菌IL-15
- 人瘦素的基因克隆及其在COS-7细胞中的表达被引量:4
- 2003年
- 目的 构建重组人瘦素哺乳细胞表达载体并在COS 7细胞表达重组人瘦素。方法 提取脂肪细胞总RNA ,用RT PCR扩增人瘦素cDNA并克隆至载体 pUCm T ,并对克隆基因进行DNA序列分析。以克隆的人瘦素cDNA为模板 ,用特异引物扩增瘦素基因 ,经KpnI和BamHI酶切 ,插入相应酶切的哺乳细胞表达载体pcDNA3 ,构建重组哺乳细胞表达载体并转染COS 7细胞 ,RT PCR和Western印迹检测其在COS 7细胞中的表达。结果 RT PCR扩增的DNA片断和预期的人瘦素cDNA大小一致 ;序列分析显示 ,克隆的基因序列和文献报道的人瘦素基因序列一致 ;经RT PCR和Western印迹鉴定 ,转染的COS 7细胞可表达、分泌人瘦素。结论 构建了人瘦素的哺乳动物细胞表达载体 ,并成功地在COS 7细胞中获得重组人瘦素的分泌表达。
- 董秀华赵跃然游力冯进波许晓群田志刚刘伟李洁清侯殿俊乔建维商希梅
- 关键词:基因克隆COS-7细胞基因表达激素
- 乳腺癌转移抑制基因对卵巢癌转移表型的逆转研究
- 目的:研究乳腺癌转移抑制(BRMS1)基因对卵巢癌细胞A2780体内外生物学行为的影响。方法: 应用BRMS1基因转染卵巢癌细胞A2780,体外观察细胞增殖、凋亡、细胞间缝隙通讯连接、粘附转移实验、细胞超微结构的变化,应...
- 姜洁夏敏孔北华南芳芳董喆冯进波
- 文献传递
- 高脂血症患者血浆血管紧张素Ⅱ水平与其血小板1型受体表达的相关性被引量:6
- 2007年
- 目的通过观察高胆固醇血症患者血管紧张素Ⅱ与其1型受体表达的变化,探讨肾素—血管紧张素系统在动脉粥样硬化发生中的作用。方法在本院健康查体中心随机选取健康对照40例(对照组)和高胆固醇血症患者60例(高脂组),分别自肘静脉取血,分离血清、血浆并提取血小板。放射免疫法检测血浆的血管紧张素Ⅱ水平,逆转录聚合酶链反应和Western blot方法分别检测血小板1型受体表达的mRNA和蛋白质表达水平。结果高脂组的血浆血管紧张素Ⅱ水平较对照组明显升高(92.13±25.27比50.85±21.12,P<0.01),血小板的1型受体mRNA和蛋白质表达较对照组明显升高(0.93±0.22比0.25±0.06,P<0.01;1.35±0.32比0.42±0.10,P<0.01);高脂组血管紧张素Ⅱ与1型受体表达的相关分析显示,1型受体表达与血浆的血管紧张素Ⅱ呈显著正相关(r=0.369,P<0.01)。结论高胆固醇血症患者血小板1型受体的表达增高与血浆血管紧张素Ⅱ浓度增加有关。
- 李永红葛志明王其新冯进波蔡尚郎安毅董果雄张运
- 关键词:内科学高脂血症动脉粥样硬化血小板
- 先天性巨结肠层粘连蛋白基因与RET基因表达的关系被引量:1
- 2006年
- 我们通过实时荧光定量PCR技术对先天性巨结肠(Hirschsprung’s disease,HD)病儿层粘连蛋白基因与RET基因的表达以及它们的相关性进行了研究,现将结果报告如下。
- 李爱武张文同栾怡段祥升冯进波王凤英
- 关键词:先天性巨结肠RET基因基因表达实时荧光定量PCR技术DISEASE