陈娟
- 作品数：8 被引量：34H指数：3
- 供职机构：江苏大学药学院更多>>
- 发文基金：江苏省卫生厅医学科研项目江苏省自然科学基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- Bcl-6基因3'UTR双荧光素酶报告质粒的构建及其与miR-346靶向关系的验证被引量：1
- 2014年
- 目的:构建Bcl-6基因3'非编码区(3'untranslated region,3'UTR)荧光素酶报告质粒,分析miR-346对Bcl-6的调控作用。方法:通过PicTar数据库和miRanda数据库预测可能与Bcl-6基因3'UTR作用的miRNA;将人工合成的Bcl-6基因3'UTR区序列克隆至荧光素酶报告质粒psiCHECK-2;将重组荧光素酶报告质粒和miRNA mimics共转染293T细胞,用双荧光素酶检测试剂盒测定荧光素酶活性。结果:PicTar数据库和miRanda数据库预测交叉结果显示,miR-346与Bcl-6基因3'UTR存在互补结合位点;构建的荧光素酶报告质粒经酶切及测序鉴定正确;重组质粒和miR-346 mimics共转染293T细胞后,荧光素酶报告质粒表达的荧光素酶活性降低66%左右。结论:成功构建了Bcl-6基因3'UTR荧光素酶报告质粒,筛选出和Bcl-6表达相关的miRNA即miR-346。
- 陈娟袁靖吴晶晶田洁汤新逸芮棵田新宇张悦刘海冰耿丽娜杨珺许化溪王胜军
- 关键词：BCL-6基因微小RNA
- 激光拉曼光谱法无损鉴别三七及其伪品被引量：15
- 2014年
- 应用激光拉曼光谱技术准确无损鉴别三七及其伪品菊三七、藤三七和姜黄。采集了三七及其伪品的拉曼光谱图,并结合二阶导数拉曼图谱对其进行定性鉴别。四种药材的图谱中均出现了1330、1040、943、310 cm-1糖类碳水化合物的拉曼特征峰。三七的谱图中出现了1080 cm-1和1120 cm-1皂苷类化合物的拉曼振动峰;菊三七的谱图中出现了820、899、1144、2935 cm-1b-谷甾醇、吡咯里西啶类生物碱及长链脂肪烃的拉曼特征峰;藤三七的谱图中出现了1462 cm-1和1695 cm-1的腺苷类和尿嘧啶类化合物的拉曼振动峰;姜黄的谱图中出现了962、1187、1433、1596、1630 cm-1等姜黄素类化合物的拉曼振动峰。以上专属特征峰的差异可将三七及其伪品进行很好的区分,并据谱图信息可建立四味中药的拉曼指纹图谱。二阶导数拉曼光谱图可以对三七及其伪品的鉴别结果进行进一步补充验证说明。此方法可准确直接、快速鉴别三七及其伪品。
- 董晶晶陈娟戈延茹戚雪勇
- 关键词：光谱学激光拉曼二阶导数光谱
- TLC-SERS法快速检测复方杜仲胶囊中非法添加化学药物的研究被引量：2
- 2015年
- 建立薄层色谱(TLC)与表面增强拉曼光谱(SERS)联用法快速分析复方杜仲胶囊中非法添加的化学药物。利用TLC以甲苯-乙酸乙酯-乙醇-浓氨水(体积比为12∶3∶3∶0.2)为展开剂,实现模拟阳性药中添加成分的初步分离,再采用SERS分析被分离的化学药物斑点。通过TLC-SERS联用法获得的复方杜仲胶囊中各添加化学药物与各对照品的拉曼光谱图特征峰基本一致。TLC-SERS联用法可快速、准确、灵敏地检测出复方降压类中成药中所添加的化学药物。
- 陈娟孙楠楠邵亚兰倪晓霓戈延茹戚雪勇
- 关键词：光谱学复方中成药非法添加化学药物表面增强拉曼光谱
- GITRL基因SNP-rs2236876分型方法的比较
- 2015年
- 目的:对3种单核苷酸多态(single nucleotide polymorphism,SNP)分型方法进行比较,选择准确有效的SNP分型方法对GITRL SNP-rs2236876A/G进行基因分型。方法:采用Taqman-MGB探针法,限制性片段长度多态性聚合酶链式反应(cleaved amplification polymorphism sequence-tagged sites,PCR-RFLP)法和直接测序法对GITRL SNPrs2236876A/G进行分型并比较。结果:PCR-RLFP法分型结果直接通过电泳图可见,适合少量的实验对象;TaqmanMGB探针法通过不同的荧光区分不同的基因型,适合大量的实验对象;直接测序法交由测序公司测定,样本数量浮动范围较大,费用较高。结论:Taqman-MGB探针法适用于GITRL基因rs2236876A/G基因分型,PCR-RFLP法适用于基因分型结果的验证,直接测序法适用于鉴定有争议的PCR-RFLP法的验证结果。
- 吴晶晶仝佳陈娟袁靖田洁汤新逸王胜军
- 关键词：TAQMAN-MGB探针PCR-RFLP
- 表面增强拉曼光谱法快速分析中药三七的有效成分被引量：8
- 2015年
- 目的:建立表面增强拉曼光谱(surface enhanced Raman spectroscopy,SERS)法快速分析中药三七中的有效成分。方法:对三七药材进行简单的预处理,分别测试三七药材粉末、三七水提和醇提样品的表面增强拉曼光谱;再结合薄层色谱分离技术,测试三七醇提取样品中单一有效成分的表面增强拉曼光谱,并对所获得的图谱进行解析。结果:直接测试三七药材粉末、三七水提和醇提样品的表面增强拉曼光谱有微弱信号;三七醇提取样品经过TLC技术分离后的单一组分可获得较理想的表面增强拉曼光谱。结论:建立的快速分析三七有效成分的表面拉曼光谱法具有简便,快速,专属性好,灵敏度高等特点,可拓展到其他中药材的质量控制和分析鉴定中。
- 卫程华陈娟许曼翎戚雪勇
- 关键词：表面增强拉曼光谱
- 小鼠CCL20 mRNA实时荧光定量PCR检测方法的建立被引量：2
- 2012年
- 目的:建立检测小鼠脂肪组织中趋化因子CCL20(CC chemokine ligand 20)mRNA的实时荧光定量PCR(real-time fluorescence quantitative PCR,qRT-PCR)的方法。方法:分离小鼠脂肪组织细胞,经PMA和离子霉素刺激4 h后收集细胞提取总RNA并逆转录为cDNA。采用qRT-PCR方法检测趋化因子CCL20 mRNA的表达水平。评价该方法的特异性,同时应用该方法检测小鼠脂肪组织中趋化因子CCL20mRNA相对表达水平。结果:建立了小鼠脂肪组织中趋化因子CCL20的SYBR Green实时荧光定量PCR检测方法,结果显示该方法的熔解曲线为单峰,同时核酸电泳显示一条特异性条带。检测结果表明高脂饮食诱导的肥胖小鼠脂肪组织中趋化因子CCL20的相对表达水平明显高于正常饮食对照组(t=3.02,P<0.05)。结论:建立了检测小鼠脂肪组织中趋化因子CCL20 mRNA的实时荧光定量PCR方法,特异性好、灵敏性强,为进一步研究小鼠CCL20的生物学功能提供了实验基础。
- 陈艳红朱晨露魏衍财秦伟田洁袁靖陈娟吴晶晶汤新逸许化溪王胜军
- 关键词：SYBR实时荧光定量PCR
- 桥本甲状腺炎患者Th17细胞比例升高被引量：9
- 2012年
- 目的研究桥本甲状腺炎（HT）患者Th17细胞及其相关因子的变化。方法选取30例桥本甲状腺炎患者，并以30名健康对照进行研究。Th17细胞采用流式细胞术测定，孤儿核受体γt（RORγt）和白细胞介素（IL）-17采用实时定量PCR测定，IL-6和IL-23采用ELISA法测定。结果（1）与健康对照相比，桥本甲状腺炎患者外周血中Th17细胞比例明显增加[（0．75±0．79）％对（0．28±0．23）％]，RORγt水平增高（0．30±0．38对0．04±0．02，均P〈0．05）；（2）桥本甲状腺炎患者血清中IL-6和IL-23水平显著高于健康对照组（3．66±4．70对0．47±1．11，154.7±75．81对80．65±61．41．均P〈0．05）；（3）桥本甲状腺炎患者Th17细胞与甲状腺球蛋白抗体（TgAb）水平呈正相关（r=0．8484，P=0．0077）；（4）桥本甲状腺炎患者甲状腺组织中表达RORγt和IL-17基因。结论桥本甲状腺炎患者体内Th17细胞及相关因子异常增高。
- 柳迎昭朱晨露田洁陈建华陈建国陈娟许化溪王胜军
- 关键词：桥本甲状腺炎TH17细胞自身免疫甲状腺
- 小鼠白介素17受体A胞外段的表达、纯化及鉴定
- 2012年
- 目的:分别克隆小鼠白介素17受体A胞外段(mIL-17RAaa32-322)及小鼠IgG2AFc(mIgG2AFc)基因,构建mIL-17RAaa32-322-mIgG2AFc融合蛋白原核表达载体,并在体外表达、纯化及鉴定。方法:利用基因重组技术构建pET32a(+)-mIL-17RAaa32-322-mIgG2AFc原核表达载体,并在E.coli Rosetta中表达mIL-17RAaa32-322-mIgG2AFc融合蛋白,经镍离子螯合层析分离纯化后,用SDS-PAGE电泳和蛋白质印迹法进行鉴定。结果:成功构建pET32a(+)-mIL-17RAaa32-322-mIgG2AFc原核表达载体,获得高效表达的融合蛋白,且蛋白质印迹证实为目的蛋白。结论:获得mIL-17RAaa32-322-mIgG2AFc融合蛋白,为进一步研究其生物学功能奠定基础。
- 魏衍财朱晨露陈艳红秦伟田洁袁靖陈娟吴晶晶汤新逸Samuel Essien Baidoo许化溪王胜军
- 关键词：原核表达纯化
