谢毅
- 作品数：422 被引量：1,204H指数：16
- 供职机构：上海市计划生育科学研究所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金上海市现代生物与新药产业发展基金上海市科学技术委员会资助项目更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学电子电信农业科学更多>>
- 检测乙、丙型肝炎病毒基因芯片的制备被引量：26
- 2001年
- 目的 :探讨研制检测乙型和丙型肝炎病毒的基因芯片。方法 :以 HBV、HCV高度保守的基因片段为探针 ,同时用没有同源性的植物基因片段为内参照基因 ,制备成“乙、丙型肝炎病毒双检基因芯片”。检测时抽提患者血清中的病毒核酸 ,进行RT- PCR扩增及荧光标记 ,然后与双检基因芯片杂交 ,杂交结果用 Scan Array 30 0 0扫描仪扫描。 结果 :双检基因芯片的内参照结果能做到绝对阳性和绝对阴性 ,同时对不同血清 (正常人血清 ,乙肝 E抗原阳性血清 ,丙肝 RNA阳性血清 ,乙肝、丙肝阳性混合血清 )能有效检测区分。 结论 :本研究成功地制作了乙、丙型肝炎病毒双检基因芯片 。
- 吴海顾少华胡志前许一斌徐东应康谢毅毛裕民
- 关键词：基因芯片基因诊断乙型肝炎病毒丙型肝炎病毒
- 我国7株旋毛虫基因组DNA的研究被引量：9
- 1995年
- 对我国７株旋毛虫基因组ＤＮＡ，采用５种限制性内切酶分析表明，来自猪体的旋毛虫酶谱相似，来自犬、猫体的旋毛虫酶谱相似，而猪体与犬、猫体的旋毛虫酶谱差异明显。同时采用随意扩增的多态ＤＮＡ分析，引物为：５＇ＡＡＴＴＣＧＣＧＧＣＣＧＣＧＴＣＧＡＣ３＇，各分离株显示自己特有带型。比较不同地区猪体或犬、猫体的旋毛虫及同一地区不同宿主的旋毛虫的相似率。提示：地区差异愈大，相似率愈小；宿主亲缘愈远，其相似率愈小。似乎我国旋毛虫可分为两群：一群是猪体旋毛虫，另一群是犬、猫体旋毛虫。
- 何忠平陈佩惠谢毅卢思奇王凤芸
- 关键词：旋毛虫基因组DNA
- 一条人脑胶质瘤相关新基因的克隆与表达被引量：3
- 2006年
- 目的运用基因芯片技术获取正常成人脑组织与人脑胶质瘤中差异表达的基因,并对其中一条与脑胶质瘤相关的新基因进行了克隆和表达的研究。方法抽提正常成人脑组织与人脑胶质瘤组织中的mRNA来制备探针,经杂交、洗涤后,通过计算机观察二者表达谱的差异情况,对 681F05克隆子进行了Northern blot,生物信息学分析和蛋白质的表达。结果通过四次基因芯片筛选,获得15条与胶质瘤相关的新基因,经northern blot证实681F05基因在人正常脑组织中低表达, 而在人脑胶质瘤中高表达。BLASTn和BLASTx分析显示,它们编码蛋白与线虫Cyp-10蛋白同源性分别为52％和72％。cDNA序列分析发现这两个克隆是同一个基因[命名为cyclophilin—like gene (PPIL3)]的两个不同的剪切体(PPIL3a和PPIL3b)。并在大肠杆菌中得到了PPIL3a和PPIL3b与 GST较好表达的融合蛋白。结论基因芯片筛选正常脑组织与人脑胶质瘤差异表达的基因具有样品用量少,高质量,高速度,高敏感等特性。681F05基因可能是与人脑胶质瘤形成有关的一条全长新基因。
- 祁震宇惠国桢张世明李瑶周宗祥顾少华应康谢毅
- 关键词：基因芯片脑胶质瘤融合蛋白全长新基因
- 有氧运动和罗格列酮对NOD小鼠PPARγ、GLUT4和FABPs基因表达的影响被引量：7
- 2005年
- 目的 :研究有氧运动和罗格列酮对NOD(Non -ObeseDiabetic)小鼠PPARγ ,GLUT4和FABPs基因表达的影响。方法 :将 30只NOD小鼠分为 3组 :对照组 (Ⅰ组 )、用药组 (Ⅱ组 ,灌喂罗格列酮 12周 )和运动组 (Ⅲ组 ,进行 12米 /分钟、5 5分钟 /天的跑台训练 12周 )。检测NOD小鼠各项血液生化指标 ,RT -PCR半定量测定肝脏、脂肪和骨骼肌组织PPARγ、GULT4和FABPsmRNA表达。结果 :对照组NOD小鼠血糖显著高于用药组和运动组 (P <0 0 5 ) ,但用药组和运动之间无显著差异。用药组和运动组血脂发生有益变化。与对照组相比 ,用药组和运动组肝脏、骨骼肌和脂肪组织的PPARγ表达增加 1～ 2倍 ,脂肪和骨骼肌GULT4表达均增加 1倍以上 ,脂肪组织A -FABPmRNA水平和骨骼肌H -FABPmRNA水平均高于对照组。结论 :罗格列酮和有氧运动可能通过PPARγ介导GLUT4和FABPs表达上调调节糖脂代谢 ,但是否由PPARγ直接调控GLUT4转录 ,还需要更充分的实验证据的支持。
- 胡红梅许豪文应康季朝能李瑶谢毅毛裕民
- 关键词：PPARΓNOD小鼠罗格列酮GLUT4跑台训练有氧运动
- 化学合成恶性疟原虫杂合抗原基因表达产物免疫功能的研究被引量：1
- 1995年
- 本文报道化学合成恶性疟原虫杂合抗原基因３个重组克隆菌表达产物，经ＰＡＧＥ纯化后，免疫家兔制备血清，进行琼脂双向扩散和酶联免疫吸附试验及Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ和疟原虫体外生长抑制试验，结果表明化学合成恶性疟原虫杂合抗原基因表达产物均具有良好的免疫原性及明显的抑制其原虫体外生长的作用。
- 陈仕荣胡亚芳钟雄林王昌才马维芳郭茂云王启松谢毅
- 关键词：疟原虫恶性疟原虫免疫血清化学合成
- HPV58型E1^E4蛋白的表达纯化和多克隆抗体的制备被引量：2
- 2012年
- 目的:构建pRSET-A\E1^E4原核表达载体,获得E1^E4蛋白的多克隆抗体。方法:在BL21(DE3)细胞中诱导E1^E4融合蛋白表达,收集包涵体经过镍柱纯化后免疫新西兰白兔,获得的抗血清经硫酸铵沉淀法纯化得到抗体。结果:经Western blotting检测表明制备的E1^E4蛋白多克隆抗体特异性较好。结论:成功获得了纯化的E1^E4蛋白抗体,有助于后续HPV58型E1^E4蛋白功能和B细胞抗原表位的研究。
- 薛冰高锦阳唐海平王健谢毅徐万祥顾少华
- 关键词：蛋白表达抗体制备
- 风湿性心脏病心肌线粒体DNA^（4977）的定量研究被引量：10
- 1995年
- 为了探讨风湿性心脏病（风心病）心肌慢性缺血、缺氧损害心肌功能的机理，作者采用聚合酶链反应（ＰＣＲ）技术检测了１６例风心病患者心肌线粒体ＤＮＡ４９７７片段（ｍｔＤＮＡ４９７７）缺失率，同时测定了心肌丙二醛（ＭＤＡ）含量和超氧化物歧化酶（ＳＯＤ）活性。ＰＣＲ结果显示：正常对照组（ｎ＝１０）、年龄＞４５岁，ｍｔＤＮＡ４９７７缺失水平低，缺失率最高为０．００４２％，风心思音ｍｔＤＮＡ４９７７均有缺失，缺失率为０．０２％～１．２６％，明显高于对照组。由于ｍｔＤＮＡ４９７７缺夫导致氧化磷酸化复合物的蛋白质基因丢失，使氧化磷酸化抑制，ＡＴＰ合成减少，致使心肌功能恢复较差，另外．氧自由基可导致ｍｔＤＮＡ的损伤并产生缺失，风心病心肌ＭＤＡ含量增加，ＳＯＤ活力下降，表明心肌氧自由基量增加，序在ｍｔＤＮＡ４９７７缺失的内部条件。
- 钱伟谢毅张宝仁朱家麟郝家骅陈如坤蔡凯华吴小舟
- 关键词：风湿性心脏病心肌线粒体DNA聚合酶链反应
- 恶性疟原虫cDNA克隆(CO111)的序列测定和分析
- 1999年
- 目的: 测定和分析cDNA 克隆(CO111)与抗恶性疟原虫兔血清和1株单克隆抗体呈阳性反应的序列。方法:采用PCR扩增CO111 克隆的cDNA 片段,纯化后经Klenow 酶补平,与M13m p18 载体连接,转化到大肠杆菌(E.coli) JM109。PCR筛选和鉴定M13单链,PEABI373ADNA自动测序仪测序,PC/GENE和GenBank (EM-BL)等软件进行序列分析和比较。结果:CO111 cDNA克隆含有233对核苷酸对。与GenBank 数据库中恶性疟原虫DNA比较,未发现与该cDNA相同的序列。结论:分离出1
- 王燕妮黄燕李明孙万邦谢毅李英杰
- 关键词：恶性疟原虫抗原亲水性
- 基因芯片技术及其应用被引量：32
- 2001年
- 基因芯片的产生仅 10年左右的时间 ,但在制备方法及应用方面都得到了极快的发展。本文对基因芯片的产生及发展、主要制备原理以及应用作了概括的介绍。目前 ,基因芯片最常用的介质是表面修饰了特殊基团的玻片 ,使 DNA分子通过共价键同玻片相连。通常被固定的元素是 DNA片段或寡核苷酸。最常用的制备技术是直接点样法 ,即以针点或喷点的方式制备微矩阵基因芯片 ;此外 ,还有原位合成法及电定位法等制备芯片。基因芯片的应用概括起来有两大用处 :检测基因的量及检测基因的结构 (质 ) ,前者主要用于大规模检测基因表达的改变情况 ;后者主要指 DNA的序列分析 ,包括测序及再测序、SNP分析、突变检测等 ,因此在后基因组研究。
- 裘敏燕李瑶谢毅毛裕民
- 关键词：基因芯片原位合成基因表达谱
- 兔抗hCG CP22抗血清体外抑制肿瘤细胞生长的研究
- 2011年
- 目的:探讨抗原抗体反应检验若干人肿瘤细胞分泌β-hCG情况,和抗hCGCP22抗血清体外抑制肿瘤的作用。方法:采用细胞免疫荧光染色测定5个肿瘤细胞株是否表达β-hCG,用CCK-8试剂盒检测CP22抗血清(AS CP22)和β-hCG羧基端37肽(CTP)抗血清(AS CTP)体外抑制肿瘤细胞生长的光密度。结果:以AS CP22为探针和AS CTP为阳性对照,体外培养的人胰腺癌BXPC-3、人卵巢癌HO-8910和人结肠癌Lovo细胞膜上都能观察到绿色荧光,提示肿瘤细胞均表达β-hCG亚单位,而人前列腺癌PC-3和Du-145细胞则未检测到绿色荧光;与正常兔血清(NS)比较,AS CP22和AS CTP均可显著的体外抑制BXPC-3和HO-8910细胞生长,P<0.001。AS CP22抑制BXPC-3和HO-8910肿瘤细胞的作用都强于AS CTP,P<0.05。结论:人胰腺癌BXPC-3、人卵巢癌HO-8910和人结肠癌Lovo细胞在体外培养的情况下均表达β-hCG亚单位,且它们的体外生长都能被兔抗hCG嵌合肽(CP22)抗血清体外抑制。
- 何亚萍徐万祥廖矛川孙志达季朝能顾少华陈金中谢毅
- 关键词：人肿瘤细胞Β-HCG抗血清免疫荧光染色
