程轶喆
- 作品数：21 被引量：42H指数：3
- 供职机构：山东大学医学院更多>>
- 发文基金：山东省自然科学基金国家自然科学基金山东省卫生厅科技基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学轻工技术与工程化学工程更多>>
- 优化密码沙眼衣原体主要外膜蛋白基因的设计合成与表达
- 2005年
- 目的:设计合成优化密码沙眼衣原体主要外膜蛋白(MOMP)基因,克隆构建优化密码MOMP(HuMOMP)基因的真核表达质粒及EGFP-HuMOMP融合基因表达质粒。方法:利用软件分析比较鼠肺炎沙眼衣原体(MoPn)与人类等哺乳动物基因组密码子使用的差异,根据所得数据对MOMP基因进行优化设计与合成。双酶切pUC-HuMOMP质粒,游离HuMOMP片段,定向克隆入pcDNA3的相应位点,构建重组真核表达质粒pcDNA3-HuMOMP;双酶切游离pcDNA3-HuMOMP中的HuMOMP片段,定向克隆入pEGFP-C1的相应位点,构建重组真核表达质粒pEGFP-HuMOMP;pEGFP-HuMOMP质粒体外脂质体转染COS-1细胞,24h后观察荧光蛋白的表达。结果:合成的HuMOMP基因全长1125bp,经DNA测序无误。酶切鉴定pcDNA3-HuMOMP及pEGFP-HuMOMP质粒获得预期分子量DNA片段。EGFP-HuMOMP融合基因在COS-1细胞中获得明显表达,表达产物定位于胞浆。结论:设计合成的优化密码HuMOMP基因能够在哺乳动物细胞中成功表达。
- 郑燕赵蔚明王红周亚滨栾怡齐眉程轶喆贾继辉于修平
- 关键词：基因表达遗传密码
- 济南地区献血者中人疱疹病毒8型(HHV-8)IgG抗体的检测及相关危险因素分析被引量：12
- 2006年
- 目的:了解人疱疹病毒8型(HHV-8)在济南地区不同献血者中的感染情况,并对其与年龄、性别、HBV、HCV、梅毒螺旋体的相关性进行统计学分析。方法:以HHV-8 ORF K8.1合成多肽为抗原,采用ELISA方法检测献血者血清中相应IgG水平。结果:520份血清中抗HHV-8 ORFK8.1抗体的总体检出率为5.962%(31/520),有随年龄增加而增高的趋势,但与性别、HBV、HCV、梅毒螺旋体的相关性无统计学意义。结论:济南地区献血者中有一定比率的HHV-8感染。采取措施,防止HHV-8经输血传播具有一定的现实意义。
- 齐眉赵蔚明周亚滨栾怡卞继锋王红程轶喆刘娟唐伟于晗
- 关键词：献血者人疱疹病毒8型免疫球蛋白G
- 巨细胞病毒感染人脐静脉内皮细胞后RAGEmRNA的时序性表达及其意义
- 2006年
- 目的:研究人巨细胞病毒(HCMV)感染对人脐静脉内皮细胞(HUVEC)糖基化终产物受体(RAGE)表达的影响,探讨HCMV感染致动脉粥样硬化的作用机制。方法:用HCMV感染HUVEC,采用RT-PCR方法检测不同感染时段细胞RAGEmRNA的表达。结果:HCMV感染HUVEC后,0 h时RAGEmR-NA有基础水平的表达,4 h开始升高,8 h时表达水平明显升高,随感染时间延长,表达量逐渐增高,感染24 h时达高峰,48 h开始回落,72 h表达量仍维持在较高的水平,显著高于0 h。各时段与0 h比较,均有统计学意义(P<0.01)。结论:HCMV感染人脐静脉内皮细胞后能够促进RAGE mRNA的表达,并且呈时间依赖性。HCMV有可能通过上调RAGE介导内皮细胞的炎症反应,促进动脉粥样硬化的发生、发展。
- 吴建敏周亚滨程轶喆李树英唐伟赵蔚明贾继辉栾怡齐眉王红刘娟于晗于修平
- 关键词：人巨细胞病毒人脐静脉内皮细胞
- 山东省部分献血员中人疱疹病毒8型感染的血清流行病学调查被引量：1
- 2005年
- 人疱疹病毒8型(HHV-8)目前被认为是卡波肉瘤(KS)的致病因子,其引起的KS在艾滋病患者中发病率高达50%.流行病学研究认为,HHV-8在其他人群中也有不同程度的流行.为了解HHV-8在山东地区人群中的感染情况,我们首先在献血人员中进行了HHV-8感染的血清学检测分析.
- 齐眉赵蔚明张心声周亚滨栾怡于修平贾继辉王红程轶喆刘娟唐伟
- 关键词：人疱疹病毒8型血清流行病学调查献血员HHV-8HHV-8致病因子
- 密码修饰可增强沙眼衣原体MOMP DNA质粒免疫小鼠的免疫应答
- 2006年
- 目的探讨密码修饰对沙眼衣原体主要外膜蛋白(MOMP)基因表达和DNA质粒免疫的影响。方法根据人类密码子使用偏好对鼠肺炎沙眼衣原体(Chlamydia trachomatis mouse pneumoni-tis)MOMP基因进行优化修饰,设计合成人源化MOMP基因(HuMOMP)。构建以pcDNA3为载体的含HuMOMP及含野生型MOMP基因(WtMOMP)的真核表达质粒。瞬时转染COS-1细胞,Western blot方法比较HuMOMP基因及WtMOMP基因在哺乳动物细胞中的蛋白表达水平。DNA质粒肌内免疫BALB/c小鼠,检测小鼠血清特异性抗体、DTH和淋巴细胞增殖反应,比较优化密码MOMP基因和野生型MOMP基因DNA质粒免疫的免疫效果。结果人工合成HuMOMP基因,成功构建重组真核表达质粒pcDNA3-HuMOMP及pcDNA3-WtMOMP。转染细胞Western blot结果显示,HuMOMP基因的蛋白表达水平明显高于WtMOMP基因。ELISA结果表明,HuMOMP DNA质粒免疫组小鼠血清特异性IgG抗体有所升高;细胞免疫检测结果显示,HuMOMP DNA质粒免疫组小鼠足垫肿胀程度增强、淋巴细胞增殖实验刺激指数(SI)增高,两者与WtMOMP DNA质粒免疫组相比P<0.05,差异均有统计学意义。结论人源化密码修饰能够增强沙眼衣原体MOMP基因在哺乳动物细胞中的蛋白表达及DNA质粒免疫小鼠的免疫反应,这对于新型衣原体DNA疫苗的研究具有重要意义。
- 郑燕赵蔚明王红周亚滨栾怡齐眉程轶喆唐伟于晗杨熙
- 关键词：沙眼衣原体MOMP密码子
- 促进乳头状瘤病毒L1蛋白表达和DNA疫苗免疫效应的研究
- 2006年
- 目的探讨促进乳头状瘤病毒(PV)晚期基因L1的蛋白表达和DNA疫苗免疫效应的途径及可能的机制。方法分别将含人源化优化密码BPVL1-GFP融合基因(HL1-GFP)和野生型BPVL1-GFP融合基因(WL1-GFP)的真核表达质粒体外单独转染或与tRNAser真核表达质粒共转染人角质形成细胞HaCAT,荧光显微镜及Western blot方法观察L1-GFP融合蛋白的瞬时表达情况。半定量RT-PCR分析不同PV L1基因mRNA的表达。BALB／c小鼠股四头肌内分别接种野生型、优化密码L1 DNA疫苗,同时将L1 DNA疫苗与tRNAser真核表达质粒混合后接种小鼠,观察诱导产生的体液免疫反应。结果野生型WL1-GFP融合基因在HaCAT细胞中未能有效表达,优化密码HL1-GFP基因在HaCAT细胞中的蛋白表达水平明显增强;但两者在mRNA水平差异无统计学意义。WL1-GFP与tRNAser真核表达质粒共转染细胞中L1蛋白的表达较单独转染WL1-GFP基因时增强。动物DNA免疫结果表明,优化密码HL1 DNA疫苗接种可使小鼠特异性L1中和抗体水平明显升高;而野生型WL1 DNA疫苗接种组小鼠仅产生低滴度的L1抗体,WL1 DNA疫苗与tRNAser真核表达质粒混合接种使小鼠的L1抗体水平增加。结论优化密码能显著促进乳头状瘤病毒晚期基因L1在哺乳动物细胞中的表达和DNA疫苗的免疫反应;补充外源tRNAser基因能够提高野生型L1基因的蛋白表达和DNA疫苗诱导的体液免疫应答。
- 王红赵蔚明齐眉周亚滨栾怡程轶喆于修平
- 关键词：乳头状瘤病毒L1基因TRNA蛋白表达DNA免疫
- 人巨细胞病毒和糖基化终产物共同作用对血管内皮细胞的影响
- 2007年
- 目的:观察人巨细胞病毒(human cytomegalovirus,HCMV)和糖基化终产物(advanced glycation endproducts,AGEs)共同作用对血管内皮细胞(vein endothelial cells,ECV)氧化应激的影响及对糖基化终产物受体(the receptor for advanced glycation end products,RAGE)表达的影响,明确HCMV和AGEs在致内皮细胞损伤作用中是否具有协同效应,探讨HCMV和AGEs致动脉粥样硬化(AS)发生和发展的可能机制。方法:用HCMV和AGEs分别及共同作用于ECV,将实验对象分为:对照组、HCMV组、牛血清白蛋白(BSA)组、AGEs组、AGEs+HCMV组5组;用激光共聚焦显微镜检测细胞内活性氧(ROS)的改变;采用RT-PCR方法检测血管内皮细胞RAGEmRNA的表达。结果:HCMV感染ECV后,对照组荧光强度和BSA组荧光强度均较弱,两组间比较差异无统计学意义(P>0.05);AGEs组和HCMV组荧光强度强于对照组(P<0.01);AGEs+HCMV组荧光强度高于AGEs组和HCMV组(P<0.05),两者联合作用存在协同效应。对照组和BSA组ECV细胞RAGEmRNA均有低水平表达,两组之间比较无差异(P>0.05);AGEs组和HCMV感染组RAGEmRNA表达量高于对照组(P<0.01);AGEs+HCMV组表达量高于AGEs组和HCMV组(P<0.01)。在相同病毒滴度感染的情况下,随AGEs浓度增加RAGEmRNA的表达增高,呈浓度依赖性;在相同AGEs浓度作用时,随HCMV感染滴度增加RAGEmRNA的表达水平升高,呈滴度依赖性。各组之间比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论:HCMV和AGEs均能够增强血管内皮细胞氧化应激,促进RAGEmRNA的表达,两者共同作用时呈协同效应。HCMV和AGEs有可能通过协同增强氧化应激、进一步上调RAGEmRNA的表达,介导血管内皮细胞的炎症反应,促进动脉粥样硬化的发生、发展。
- 李树英吴建敏周亚滨张风雷程轶喆于晗齐眉唐伟王红刘娟
- 关键词：人巨细胞病毒糖基化终产物血管内皮细胞氧化应激受体
- 线粒体在酵母菌耐酒精中的作用
- 该论文工作利用原生质体融合技术,将耐酒精酵母菌Saccharomycescerevisiae40A的线粒体导入酒精敏感酵母菌SaccharomycescerevisiaeK5-5A的呼吸缺陷型中,比较融合菌株与两个亲本菌...
- 程轶喆
- 关键词：酿酒酵母耐酒精线粒体
- 文献传递
- 优化密码对牛乳头瘤病毒L1基因粘膜免疫的增强作用被引量：1
- 2003年
- 为探讨优化密码对牛乳头瘤病毒 1型主要晚期基因 (BPV1L1)免疫原性的影响 ,分别将含野生型和优化密码的人源化BPV1L1基因的真核表达质粒转入减毒沙门菌S BRD5 0 9后 ,通过滴鼻、阴道免疫、静脉注射、腹腔注射等途径免疫小鼠 ,经VLPELISA方法测定抗L1构象性抗体产生 ,MTT法观察诱导的特异性细胞免疫反应。抗体检测结果显示 ,经粘膜免疫途径 ,与含有野生型L1基因的表达质粒pcDNA3WBPVL1相比 ,含优化密码L1基因的pcDNA3HBPVL1诱导产生的SIgA、IgG明显升高 ,而细胞免疫反应无明显差异。表明优化密码能促进乳头瘤病毒晚期基因L1诱导的体液免疫反应 ,减毒沙门菌是PVL1DNA疫苗粘膜免疫的有效载体。
- 王红赵蔚明周亚滨贾继辉栾怡齐眉程轶喆于修平
- 关键词：乳头瘤病毒密码减毒沙门菌DNA疫苗
- 大蒜素与两性霉素B体外联合应用抑制白色念珠菌菌丝形成的研究被引量：8
- 2010年
- 目的研究大蒜素与两性霉素B体外联合应用对白色念珠菌菌丝形成的抑制作用,并检测联合应用时细胞毒性的变化。方法采用微量稀释法测定两类药物联合抗白色念珠菌的作用,采用FICI法对联用结果进行评价。用10%小牛血清RPMI1640培养基诱导菌丝形成,检测大蒜素与两性霉素B联合应用对白色念珠菌芽管率和菌丝形成的影响。通过对细胞形态的观察及MTT法检测联合用药后对人宫颈上皮细胞H8毒性的变化。结果两种药物联用对白色念珠菌表现为协同作用,大蒜素能够加强两性霉素B抑制菌丝形成的能力,联合用药后能够显著降低对H8细胞的毒性。结论大蒜素能够提高两性霉素B抗白色念珠菌的作用,是临床上减少两性霉素B用量,减轻其副作用的最佳选择。
- 王晓燕齐眉李玉瑭孙允东张晓丽刘娟程轶喆于晗周亚滨
- 关键词：大蒜两性霉素B药物相互作用菌丝
