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一种IBV S1及Cps MOMP基因二联表位疫苗的构建及应用: 本发明公开了一种IBV S1及Cps MOMP基因二联表位疫苗的构建及应用。主要是通过在线生物软件对IBV S1基因和Cps MOMP基因进行表位筛选，所筛选的表位使用连接肽进行连接，构建出一条具有高免疫原性、副作用较小...; 金天明扈立伟任君卢宝平刘青朱凡杰顾天越包利霞刘婷婷王鑫源朱晓琛

基于MOMP衣原体疫苗的研究进展被引量：1: 2023年; 主要外膜蛋白(MOMP)是衣原体外膜复合物的主要成分,与衣原体的免疫原性、侵袭力及毒力密切相关,是衣原体的主要疫苗候选抗原。本文主要对MOMP及其相关疫苗研究进行综述,以望为靶向MOMP的新型或临床衣原体疫苗研发提供理论依据。; 李勇浩王宗保王川; 关键词：衣原体 MOMP 亚单位疫苗 DNA疫苗纳米疫苗

一种基于鸽源鹦鹉热衣原体MOMP蛋白的抗体间接ELISA检测方法的建立被引量：1: 2023年; 为建立一种检测鸽源鹦鹉热衣原体(Chlamydia psittaci,Cps)抗体的间接ELISA方法,将Cps的主要外膜蛋白(Major outer membrane protein,MOMP)基因分别克隆至2个原核表达载体,获得了2种带有不同标签的重组蛋白MOMP-GST和MOMP-His,利用MOMP-His重组蛋白免疫制备多克隆抗体,MOMPGST重组蛋白经抗MOMP的家兔源多抗验证后作为包被抗原,经条件优化,建立基于鸽源Cps的MOMP蛋白的间接ELISA方法。结果显示,成功表达了大小约为51 ku的MOMP-His和65 ku的MOMP-GST重组蛋白,制备的抗MOMP家兔源多克隆抗体效价在1∶409 600以上。该ELISA方法的最适条件为:抗原包被质量浓度为0.5 mg/L,抗原包被液为CBS,抗原包被条件为37℃1 h;封闭液为50 mL/L FBS,封闭条件为37℃2 h;血清稀释度为1∶200,血清孵育时间为30 min;酶标二抗稀释度为1∶8 000,酶标二抗孵育时间为1 h;底物反应时间为5 min。特异性试验结果显示,该方法仅能检测鸽源Cps阳性血清,与鸽Ⅰ型副黏病毒等其他常见鸽病毒阳性血清均无交叉反应。敏感性试验结果显示,当鸽阳性血清稀释到1∶1 600时检测结果仍为阳性,且批内批间的重复变异系数均在6%以内。结果表明,本研究建立的检测Cps的MOMP抗体的间接ELISA方法特异性强、敏感性高和重复性好,且可用于鸽Cps疫苗免疫抗体水平检测与流行病学调查。; 路文彬庞洪泽刘琳敏田甜张武超袁万哲; 关键词：鹦鹉热衣原体间接ELISA

IBV S1及Cps MOMP基因二联表位疫苗的构建及其免疫效果评价: 鸡传染性支气管炎（Infectious bronchitis,IB）是由传染性支气管炎病毒（Infectious bronchiti virus,IBV）引起的急性、高度传染性的呼吸道疾病,感染IBV的家禽易受到细菌或其...; 扈立伟; 关键词：IBV CPS MOMP 表位疫苗

基于截短MOMP蛋白的绵羊流产衣原体抗体间接ELISA方法的建立被引量：1: 2023年; 为了建立检测绵羊流产衣原体MOMP(main outer membrane protein)蛋白抗体的间接ELISA方法,试验将编码MOMP蛋白的基因序列经密码子优化后进行基因合成,并克隆和原核表达截短蛋白,以该蛋白为抗原建立绵羊流产衣原体抗体的间接ELISA方法,优化该方法的反应条件,同时验证其特异性、敏感性和重复性,最后用该方法对临床待检羊血清进行检测,并与间接血凝试验试剂盒的检测结果进行比较。结果表明:截短蛋白MOMP201~390的表达、纯化效果最好。经探索,优化后的间接ELISA方法最优反应条件:抗原包被浓度为1 mg/L,37℃包被2 h,待检血清最佳稀释度为1∶100,血清和酶标二抗的最佳作用时间分别为45 min、60 min。建立的间接ELISA方法的敏感性较高,特异性和重复性较好,使用该方法从209份临床待检羊血清样本中检出47份阳性血清,与间接血凝试验试剂盒分别检测临床待检羊血清样本86份,总符合率为80.23%。说明基于截短蛋白MOMP201~390建立的绵羊流产衣原体抗体间接ELISA方法可用于绵羊流产衣原体临床血清抗体的检测及流行病学调查。; 刘欣钊张芳毓魏天王成宇王思月刘悦曲可朱日宁鞠安琪马惠海张建峰王永志; 关键词：流产衣原体 WESTERN-BLOT 间接ELISA

基于截短绵羊鹦鹉热衣原体r MOMP_(183-390)蛋白的间接ELISA检测方法建立与应用被引量：2: 2023年; 为建立绵羊鹦鹉热衣原体(Cp)间接ELISA抗体检测方法,本实验将编码Cp主要外膜蛋白MOMP的omp A基因序列按大肠杆菌密码子偏好性优化后,合成质粒p ET-28b(+)-omp A,另外设计特异性引物,分别将omp A截短克隆至p ET-28b(+)载体中构建重组表达质粒p ET-28b(+)-omp A_(1-182)和p ET-28b(+)-omp A_(183-390),测序鉴定正确后分别转化至E.coli BL21(DE3)感受态细胞中,经IPTG诱导并纯化后,经western blot鉴定3个重组蛋白,结果显示,重组MOMP_(183-390)蛋白(r MOMP_(183-390))表达效果最好。以r MOMP_(183-390)作为包被抗原,采用方阵滴定法优化各反应条件,初步建立了检测Cp抗体的间接ELISA方法。采用建立的该方法检测羊痘病毒、布鲁氏菌、羊口疮病毒、小反刍兽疫病毒、口蹄疫病毒等羊临床常见病的阳性羊血清,结果显示,除Cp外,该方法与其他阳性羊血清均无交叉反应,特异性强;将Cp阳性血清2倍倍比稀释(1∶50~1∶6400)后采用该方法检测,结果显示,当Cp阳性血清稀释达1∶1600时,仍可检测到抗体,敏感性高;批内、批间重复性试验结果显示,变异系数均小于10%。采用本研究建立的ELISA方法,以及间接血凝(IHA)试验和western blot分别检测随机选取的120份临床羊血清,结果显示该方法与IHA、western blot的总符合率分别为85%和91.67%;进一步采用建立的间接ELISA方法检测381份吉林省5家羊场的绵羊血清样品,结果显示阳性率为22.83%(87/381)。本研究建立的绵羊Cp omp A重组截短蛋白的间接ELISA抗体检测方法敏感性高、特异性强、重复性好,为Cp临床样品检测及流行病学调查提供了可靠的技术手段。; 曲磊朱日宁鞠安琪魏天肖丹王成宇王思月张芳毓王永志; 关键词：鹦鹉热衣原体间接ELISA

基于将MOMP VS4抗原靶向至抗原呈递细胞的衣原体疫苗: 衣原体是细胞内细菌病原体，是造成各种感染的原因。本发明人生产了一种针对抗原呈递细胞(即树突状细胞)的表面抗原(即CD40)的抗体，其中重链和/或轻链与沙眼衣原体的MOMP VS4结构域缀合，其用作疫苗用途。; Y·利维S·卡迪诺M·森特利弗L·迪厄多内S·祖拉夫斯基G·祖拉夫斯基

MOMP蛋白在制备鹦鹉热衣原体mRNA疫苗中的应用: 本发明属于免疫技术领域，具体涉及MOMP蛋白在制备鹦鹉热衣原体mRNA疫苗中的应用。本发明以MOMP蛋白为抗原制备mRNA疫苗，具有高度灵活性，可经酶促体外转录反应生产，无细胞扩增依赖性，可快速、大量生产，可避免感染及插...; 王川金盈圻曾广贵王布为李勇浩王洁雯

嗜肺军团菌重组蛋白momp-Linker-pip的重组质粒构建及鉴定: 2022年; 目的利用自带Linker的引物,重组嗜肺军团菌pip和momp基因,构建其重组质粒pET-MLP,以获得其原核细胞表达产物并进行鉴定。方法首先制备足量的pET-pip、pET-momp以及空质粒pET-32a(+);通过PCR扩增pip、momp基因,将其定向克隆至pET-32a(+)并进行纯化筛选和鉴定;最后利用含有Linker的引物,将重组质粒pET-pip和pET-momp基因进行连接,完成pET-MLP的构建、筛选和鉴定。结果利用PCR、限制性核酸酶切电泳进行结果鉴定,于NCBI中将重组质粒的核酸序列与LP1型军团菌的相应序列对比,结果表明其同源性达到98%。结论实验成功构建、表达了重组质粒pET-MLP,为下一步以重组蛋白MLP作为诊断抗原进行嗜肺军团菌血清学检测奠定了基础。; 李亚蒙王涛张彩霞宿振国; 关键词：嗜肺军团菌重组蛋白

基于生物信息学方法的沙眼衣原体主要外膜蛋白免疫优势表位预测及分析被引量：1: 2022年; 目的预测和分析沙眼衣原体主要外膜蛋白(MOMP)的免疫优势表位。方法以UniProt蛋白质数据库中检索CtMOMP的氨基酸序列为基础,针对MOMP的理化性质、二级结构、亲水性参数、表面可及性参数、极性参数、抗原性和柔韧性参数,预测其B细胞表位;用SYFPEITHI、IEDB及NetCTI 1.2 server预测MOMP的细胞毒性T淋巴细胞(CTL)表位;用RANKPEP及SYFPEITHI预测MOMP的辅助T细胞(Th)表位,筛选分值共同较高的多肽片段作为候选表位。应用GalaxyWEB对MOMP进行三维结构建模分析。结果MOMP由393个氨基酸残基组成,以无规则卷曲及α螺旋为主;推测MOMP的B细胞表位位于N端42~52 aa、161~179 aa、259~265 aa和349~358 aa区段;其CTL表位主要集中于近C端,且以HLA-A*02:01、HLA-A*03限制性表位为主;Th表位各表型候选表位肽数目均较多。结论沙眼衣原体MOMP含有潜在的B细胞和T细胞抗原表位,其免疫优势表位主要位于N端42~65 aa、155~185 aa区段和C端342~359 aa区段。; 李明洋徐远久鲁小龙张雷苏惠婷朱珊丽张友秀; 关键词：沙眼衣原体主要外膜蛋白抗原表位生物信息学

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