王光辉 作品数:4 被引量:2 H指数:1 供职机构: 第三军医大学新桥医院 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 更多>>
肿瘤干细胞的分离方法 本发明公开了一种肿瘤干细胞的分离方法,根据细胞的线粒体膜电位分离肿瘤干细胞与分化肿瘤细胞,具有高线粒体膜电位的细胞亚群中富含肿瘤干细胞,具有低线粒体膜电位的细胞亚群中富含分化肿瘤细胞。 余时沧 钱桂生 叶小群 王光辉 黄桂君反义肽核酸阻抑线粒体基因表达诱导肺癌SPC细胞凋亡的实验研究 被引量:2 2009年 目的:探讨以反义肽核酸(Anti-sense peptide nucleic acid,asPNA)封闭肺癌SPC-A1细胞线粒体DNA(Mitochondrial DNA,mtDNA)转录启动子后,对其生物学特性的影响。方法:合成针对mtDNA重链转录启动子区的asPNA,构建asPNA-三苯磷复合物并鉴定,以该复合物转染人肺腺癌SPC-A1细胞系,激光共聚焦显微镜确定该复合物的亚细胞定位,RT-PCR检测转染48 h后对mtDNA编码基因转录的影响,流式细胞术评估细胞周期分布及凋亡/坏死情况,自发光荧光仪检测细胞内ATP浓度,以未转染asPNA-三苯磷复合物的肺腺癌SPC-A1细胞为对照。结果:成功获得asPNA-三苯磷复合物,激光共聚焦显微镜显示该复合物顺利进入SPC-A1细胞线粒体;同未转染组相比,转染组SPC-A1细胞mtDNA编码基因的转录水平有所下降,而细胞内ATP浓度明显降低(P<0.01);同时,细胞周期分析显示,转染组出现明显的亚二倍体峰,而AnnexinⅤ-PI双标结果进一步证实,转染组肺癌细胞凋亡率明显增加。结论:asPNA在电子移位亲脂性阳离子-三苯磷的运载下,能够进入SPC-A1细胞线粒体并阻抑其mtDNA编码基因的转录,进而影响肺癌细胞的能量合成并诱导其凋亡。 王光辉 黄桂君 余时沧 张志远 钱桂生关键词:肺癌 反义肽核酸 转录 肿瘤干细胞的分离方法 本发明公开了一种肿瘤干细胞的分离方法,根据细胞的线粒体膜电位分离肿瘤干细胞与分化肿瘤细胞,具有高线粒体膜电位的细胞亚群中富含肿瘤干细胞,具有低线粒体膜电位的细胞亚群中富含分化肿瘤细胞。 余时沧 钱桂生 叶小群 王光辉 黄桂君文献传递 肺癌细胞和正常人气道上皮细胞线粒体膜电位的比较 2009年 目的:探讨正常气道上皮细胞和肺癌细胞线粒体膜电位的差别。方法:利用rhodam ine 123标记,采用流式细胞仪和激光共聚焦显微镜的方法分别检测正常气道上皮细胞HBE细胞和肺癌细胞SPC、A549、H446细胞的线粒体膜电位。结果:HBE细胞的线粒体膜电位明显低于SPC细胞和H446细胞,但和A549细胞无明显差别。结论:正常气道上皮细胞线粒体膜电位水平低于大部分肺癌细胞的线粒体膜电位,但和少数肺癌细胞并无明显差别。 王光辉 黄桂君 叶小群 余时沧 钱桂生关键词:肺癌 线粒体膜电位 流式细胞仪