段翠密
- 作品数：121 被引量：375H指数：11
- 供职机构：军事医学科学院基础医学研究所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家高技术研究发展计划北京市自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学化学工程农业科学更多>>
- 骨髓间质干细胞复合生物陶瓷构建组织工程化人工软骨被引量：19
- 2003年
- 目的 探索以多孔β-磷酸三钙 (β- TCP)生物陶瓷材料为支架 ,经体外诱导的骨髓间质干细胞 (MSCs)为种子细胞 ,构建组织工程化软骨修复羊关节软骨缺损的可行性。方法 将 2 8只中国美利奴绵羊分为三组。实验组 (n=12 ) :分离培养羊自体第 7代 MSCs,经转化生长因子 - β诱导后接种到预制的 β- TCP多孔生物陶瓷材料上 ,细胞 -材料复合体经体外孵育后 ,无菌条件下植入预制的羊单侧肱骨近端关节面缺损处 ;单纯材料组 (n=12 ) :采用单纯β- TCP材料修复羊关节软骨缺损 ;空白对照组 (n=4 ) :制备的羊关节软骨缺损区未做任何修复。术后 12周和 2 4周分别取材 ,进行组织学、组织化学和免疫组织化学分析。结果 实验组术后 12周羊关节软骨缺损处肉眼可见透明软骨样组织形成 ,组织学检查发现 ,材料降解明显 ,未降解吸收的材料孔洞内广泛分布着新生软骨组织 ,软骨细胞外基质丰富 , 型胶原染色阳性 ;术后 2 4周 ,支架材料几乎完全降解 ,缺损区被新生软骨组织所取代。单纯材料组术后 12周 ,缺损区边缘有新生软骨组织向支架材料内长入 ,支架材料吸收明显 ;术后 2 4周 ,见从缺损区边缘长入到支架材料内的新生软骨组织逐渐增多 ,但材料的中心部位未发现新生软骨形成。空白对照组至术后 2 4周 。
- 郭希民王常勇薄斌方泽强段翠密赵强王永红张旭辉范明卢建熙
- 关键词：骨髓间质干细胞人工软骨生物陶瓷材料Β-磷酸三钙
- 结核分枝杆菌抗体双抗原夹心ELISA检测方法的建立及初步应用被引量：2
- 2015年
- 目的:建立2种结核分枝杆菌(Mtb)抗体的双抗原夹心ELISA检测方法,并初步评价其在Mtb血清学临床辅助诊断中的应用价值。方法:采用Mtb融合抗原38k D+ESAT6+CFP10作为包被抗原,分别以辣根过氧化物酶(HRP)和生物素(Bio)标记的38k D+ESAT6+CFP10作为标记抗原,建立2种Mtb双抗原夹心ELISA法,即HRP-ELISA法和Bio-ELISA法;采用所建立的2种方法对结核患者和健康对照血清进行检测。结果:经过一系列的反应条件优化,确定HRP-ELISA法和Bio-ELISA法的最佳抗原包被浓度分别为2、0.25μg/m L,最适加样量均为100μL血清原液,最佳标记抗原稀释率分别为1∶500、1∶2000,检测的灵敏度分别为43.66%、52.11%,特异性均为100%。结论:建立了2种Mtb双抗原夹心ELISA法,它们均适用于Mtb血清学的临床辅助诊断。
- 蒋纾芳郭兰芹宗克亮杨锡琴刘志强赵照修冰水段翠密陈堃张旭辉张嵘冯晓燕张贺秋
- 关键词：结核分枝杆菌
- 基于胚胎干细胞的心肌组织工程研究
- 本研究先后以胚胎干(ES)细胞、核移植来源的胚胎于(ntES )细胞作为种子细胞，以液态I型胶原为支架开展了心肌组织工程再造研究。具体研究包括以下二个部分:I、以ES细胞为种子细胞来源构建组织工程化心肌组织;么以ntES...
- 吕双红何文俊郭希民李颖李延民段翠密江红王常勇
- 关键词：心肌组织胚胎干细胞种子细胞
- 以OPF水凝胶为载体的组织工程化心肌及其制备方法
- 本发明属于组织工程与再生医学领域，公开了一种以低聚乙二醇延胡索酸酯水凝胶为支架材料的可注射性组织工程化心肌，含有OPF水凝胶和iPS细胞或iPS细胞来源的心肌细胞。具体是将OPF与交联剂加入到PBS溶液；然后加入过硫酸铵...
- 王常勇王海滨刘志强段翠密林秋霞
- 一种从棕色脂肪分离心脏干细胞及其成心肌分化的方法
- 本发明公开了一种属于从棕色脂肪分离心脏干细胞及其成心肌分化的方法。该方法包括：(1)消化液的制备：将胶原酶、dispaseII 与胰酶以质量比1∶1∶0.5-1的比例溶于无血清的培养基中；(2)使用加有玻璃珠和转子的消化...
- 王常勇刘志强段翠密周瑾王海滨
- 应用旋转生物反应器批量制备拟胚体的研究被引量：3
- 2005年
- 以小鼠胚胎干细胞(ES-D3)为模型,应用新型细胞培养系统--STLV型旋转生物反应器(rotary cell culture system,RCCS)建立一种批量制备拟胚体(embryoid bodies,EBs)的新方法,研究不同细胞接种密度及培养时间对RCCS内EBs产生效率的影响.为了进一步研究该制备方法是否对EBs的分化潜能产生影响,对照传统方法制备的EBs,利用形态学及RT-PCR方法测定经旋转生物反应器制备的EBs在自发性或诱导条件下(1%DMSO)向心肌细胞的分化能力.结果表明:ES-D3在RCCS内能够高效形成EBs,与传统的直接悬浮法比较,其EBs的形成效率可达到后者的2倍.1×104个/ml为最佳细胞接种密度,培养时间也是在RCCS制备EBs过程中的重要因素之一,培养第4～5天为最佳收获EBs的时间.与悬滴法制备的EBs比较,该方法制备的EBs分化为心肌细胞的潜能未改变.由此,应用旋转生物反应器可以高效制备EBs,该方法制备的EBs可以用于发育生物学等基础及应用领域的相关研究.
- 王秀丽王常勇虞星炬赵云山李晶段翠密郭希民
- 关键词：胚胎干细胞旋转生物反应器拟胚体微重力
- 小鼠睾丸gdnf基因的克隆及其在支持细胞中的表达被引量：2
- 2007年
- 目的:从小鼠睾丸中克隆胶质细胞源神经营养因子基因gdnf,构建真核表达载体,并转染支持细胞,以便用作培养精原干细胞(SSCs)的滋养层。方法:以正常成年昆明鼠为材料,提取小鼠睾丸组织中总RNA后,以RT-PCR技术克隆小鼠睾丸gdnf基因,构建真核表达载体,并转染TM4细胞(睾丸支持细胞株),在转染后40h进行免疫荧光鉴定。结果:成功克隆小鼠睾丸gdnf基因的cDNA,测序正确,免疫荧光细胞染色显示转染后的支持细胞中有GDNF蛋白表达。结论:本研究为以转染了gdnf基因的支持细胞作饲养层培养SSCs奠定了基础。
- 段翠密李恩中张世庆王常勇李德雪
- 关键词：睾丸GDNF基因转染支持细胞
- 硒促进小鼠胚胎干细胞分化为胰岛细胞的实验研究被引量：5
- 2004年
- 目的 :探讨硒在体外诱导小鼠胚胎干细胞向胰岛细胞分化中的促进作用。方法 :将ES D3小鼠胚胎干细胞悬浮培养 7d形成拟胚体 ,然后进行贴壁培养 ,加入分化培养液 1诱导 6d ,然后用分化培养液 2诱导 6d ,最后用含不同浓度的亚硒酸钠的培养基诱导 2 0d。对诱导后获得的胰岛素产生细胞团 (IPCC)细胞进行双硫腙染色 ,对染色结果进行体视学分析。进行胰岛素刺激释放试验 ,用ELISA法测定胰岛素释放量。RT PCR法检测胰腺细胞相关基因的表达。结果 :亚硒酸钠浓度在 0 .0 3～ 810 μmol/L之间时 ,经过系列诱导后获得的IPCC其DTZ阳性率随着亚硒酸钠浓度的提高而显著升高。当亚硒酸钠浓度为 2 70 μmol/L时DTZ阳性率上升至最高点 ,随后开始缓慢下降 ;胰岛素分泌释放试验也证实 2 70 μmol/L亚硒酸钠诱导的细胞释放的胰岛素最多。RT PCR结果进一步表明诱导获得的IPCC具有类胰岛组织的功能。结论
- 张妍郭希民王常勇段翠密张立岭
- 关键词：胚胎干细胞胰岛细胞硒分化
- 一种微重力环境下提高免疫力的药物及其筛选方法
- 本发明公开了属于航天医学与组织工程领域的一种微重力环境下提高免疫力的药物及其筛选方法。本发明的药物由黄芪多糖、人参多糖、灵芝多糖、茯苓多糖和香菇多糖混合而成。通过如下筛选方法获得，首先制备淋巴细胞悬液，然后将淋巴细胞置于...
- 王常勇郝彤周瑾王滟濛王妍林秋霞杜芝燕段翠密
- 一种基于骨髓间充质干细胞的组织工程化软骨
- 本发明是一种基于骨髓间充质干细胞的组织工程化软骨，属于组织工程领域。以自体骨髓间充质干细胞作为种子细胞，多孔生物陶瓷作为支架材料，二者复合体体外培育时加入增殖剂和分化剂，体外培育一段时间后手术移植修复关节软骨缺损。本发明...
- 王常勇张玉富郭希民段翠密赵强
