郭希民
- 作品数:135 被引量:488H指数:11
- 供职机构:军事医学科学院基础医学研究所更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金国家高技术研究发展计划高等学校骨干教师资助计划更多>>
- 相关领域:医药卫生生物学化学工程农业科学更多>>
- 采用Percoll非连续密度梯度离心法纯化大鼠乳鼠心室肌细胞被引量:10
- 2005年
- 目的 探索从心室肌组织中纯化心肌细胞的方法。方法 用胰蛋白酶消化大鼠乳鼠心室肌组织 ,获得细胞悬液经Percoll分离 ,通过光镜和免疫组织化学方法对获得的每层细胞进行分析 ,采用免疫组织化学和激光共聚焦方法鉴定心肌细胞。结果 Percoll分离后 ,细胞分为 6层 ,每层细胞培养 3d时 ,通过光镜和免疫组织化学观察发现心肌细胞富集在第 4、5两层。富集的心肌细胞第 3天形成细胞簇或细胞单层 ,收缩明显而有力。心肌细胞可维持良好的形态和活力达 2~ 3个月。结论 使用Percoll分离法可以从大鼠乳鼠心室肌组织中纯化心肌细胞。
- 鄂玲玲陈新王常勇赵云山郭希民段翠密董灵芝江红李晶
- 关键词:乳鼠心室肌细胞肌组织密度梯度离心法激光共聚焦
- 一种诱导胚胎干细胞分化为胰岛样细胞的方法
- 本发明涉及一种诱导胚胎干细胞分化为胰岛样细胞的方法,属于细胞生物学领域。本发明采用5种优化培养基诱导胚胎干细胞定向分化为能分泌胰岛素的细胞,诱导分化一定时间后可得到能分泌胰岛素的胰岛样细胞。本发明所述方法具有能够显著提高...
- 王常勇张妍郭希民段翠密王秀丽
- 文献传递
- 不同种类细胞外基质材料对胰岛细胞活力和功能的影响被引量:5
- 2004年
- 目的 比较在不同细胞外基质材料上培养胰岛细胞对胰岛细胞活力和功能的影响。方法 采用胶原酶Ⅴ型消化法 ,经Fi coll密度梯度离心法纯化获得的胰岛细胞 ,按 10 0 0胰岛当量单位 /ml密度分别在I型胶原、I型和Ⅳ型胶原、Matrigel3种不同细胞外基质材料包被的 2 4孔培养板上培养 ,以不包被组为对照。培养 7天时进行丫啶橙 碘化丙啶 (AO PI)染色。放免法检测培养第 2、4、6、8、10天时胰岛素基础分泌水平及培养 4天时胰岛素刺激分泌水平。结果 AO PI染色显示 :Matrigel包被组和I型与Ⅳ型胶原混合包被组胰岛细胞的活力优于I型胶原包被组和对照组 ,I型胶原包被组的胰岛细胞活力优于对照组 ,Matrigel包被组的胰岛细胞活力最好。糖敏感性和分泌特性检测表明 :Matrigel包被组胰岛细胞的糖敏感性和胰岛素分泌活性最好。Matrigel包被组和I型与Ⅳ型混合胶原包被组中培养的胰岛细胞胰岛素刺激分泌水平优于对照组 (P <0 0 5 ) ,而Ⅰ型胶原包被组和对照组比较差异无统计学意义(P >0 0 5 )。结论 将胰岛细胞在Matrigel和I型与Ⅳ型混合胶原上培养能够改善胰岛细胞的活力和功能。
- 张旭辉王常勇郭希民段翠密孙志杰
- 关键词:胰岛细胞外基质
- 外泌体在皮肤修复与再生中作用的研究进展被引量:4
- 2018年
- 外泌体是直径在30-100 nm左右的囊泡结构。作为一种活细胞分泌的亚细胞成分,外泌体广泛参与细胞之间的交流,并可以作为干细胞的旁分泌因子来发挥生物学效应。研究发现外泌体可以参与皮肤组织修复与再生的各个过程,通过促进皮肤细胞的增殖迁移,促进血管新生,调节免疫反应来促进创伤愈合与皮肤组织再生,为进一步实现无细胞治疗提供了新的实现途径。对于某些慢性创面,例如糖尿病性皮肤溃疡等也有较好的治疗效果。本文就外泌体在皮肤修复与再生中作用的研究进展做一综述。
- 时权徐娟郭希民刘洪臣
- 关键词:外泌体皮肤再生创面修复
- 基于间充质干细胞的组织工程软骨表型稳定性的研究进展被引量:1
- 2016年
- 关节软骨属于透明软骨,由于其缺乏血管神经,自我修复能力差,目前临床上针对其损伤或病变的临床治疗方案并不能达到理想的修复效果。组织工程技术为关节软骨再生提供了新的方法,间充质干细胞(mesenchymal stem cell,MSC)作为重要的种子细胞之一,但目前仍存在由MSC分化而来的软骨组织表型不稳定,出现肥大、骨化的问题,制约了其应用。本文对基于MSC的组织工程软骨的组织表型稳定性研究进展进行综述。
- 时权郭希民徐娟
- 关键词:间充质干细胞软骨组织工程成软骨分化
- 生物反应器内再造组织工程化心肌的实验研究被引量:8
- 2003年
- 目的在体外模拟微重力条件下构建心肌细胞-胶原复合体,探索组织工程化心肌组织体外再造的可行性。方法采用顺序消化及差速贴壁法从1~2d龄新生大鼠的心肌组织中分离心肌细胞,并将其与多孔胶原复合形成复合体。复合体在旋转生物反应器(rotarycellculturesystem,RCCS)中进行培养,观测复合体内心肌细胞的生长状况、超微结构、细胞代谢率及细胞组分的变化,并将其与正常心肌和常规培养的复合体进行比较。结果在RCCS中培养的复合体内的细胞具有心肌细胞的特殊超微结构,免疫组化显示其中的α-横纹肌肌动蛋白染色呈强阳性,与静止培养的复合体细胞相比,细胞代谢更加旺盛。结论采用组织工程技术可以在RCCS中培育出组织工程化心肌组织。
- 刘霞王常勇郭希民欧阳五庆
- 关键词:心肌细胞胶原旋转生物反应器
- 一种促进组织血管化的基因-壳聚糖纳米粒复合体
- 本发明涉及一种促进组织血管化的基因-壳聚糖纳米粒复合体,属于组织工程领域。本发明用pcDNA<Sub>3.1</Sub>-hVEGF基因-壳聚糖纳米粒复合体负荷上I型胶原,接种心肌细胞,体外培养后移植到有损伤的心肌组织中...
- 王常勇齐子荣郭希民段翠密赵云山
- 文献传递
- 组织工程骨对羊节段性骨缺损的修复被引量:7
- 2005年
- 目的探讨自体骨髓间充质干细胞(MSCs)复合生物活性陶瓷材料β磷酸三钙(TCP)修复羊跖骨节段性缺损的能力。方法将24只成年中国美利奴绵羊随机分成3组,制备单侧跖骨21mm长节段性缺损,缺损分别采用相应方法修复材料+细胞组,缺损区植入βTCP+MSCs复合体(n=10);单纯材料组,缺损区植入单纯βTCP(n=10);空白组,缺损区不作处理(n=4)。术后1、3和6月处死动物并取材,做大体形态学、组织学、Ⅹ线检查。结果术后6月检查结果显示,在材料+细胞组,骨生成能力明显强于单纯材料组;而空白组仅在骨折断面处生成少量松质骨,骨缺损不能修复。结论生物活性陶瓷βTCP与MSCs结合能明显提高骨生成速度,在修复长骨干节段性缺损方面具有潜在的临床应用价值。
- 赵子义陈新郭希民王常勇徐莘香段翠密
- 关键词:节段性骨缺损组织工程骨节段性跖骨骨生成体形
- 大鼠牙髓干细胞的培养和鉴定被引量:18
- 2004年
- 目的 :分离培养大鼠牙髓干细胞并对其进行生物学鉴定。方法 :采用单细胞克隆的方法进行大鼠牙髓干细胞的分离培养 ,并将达到一定数量级的牙髓干细胞与HA -TCP支架材料进行复合 ,移植入裸鼠背部皮下 ,8周后取材进行组织学鉴定。取鉴定成功的细胞株复苏进行细胞生物学特性研究 ,同时进行成牙本质细胞诱导并进行DSP、DMP1免疫组织化学染色。结果 :单细胞来源的细胞克隆 (RDPSC2B2 )移植物组织切片可见牙本质牙髓复合体样结构。复苏细胞形态为梭形 ,细胞密集时形态多样 ,为卵圆形或多角形 ,细胞群体倍增时间为 5 8.3h ,克隆形成率为 1.33% ,免疫组化染色DSP、DMP1均为阴性 ,经矿化液诱导后部分细胞胞浆DSP及DMP1出现阳性染色。结论
- 郭红延吴补领郭希民王常勇
- 关键词:牙髓干细胞牙本质牙髓复合体
- 一种制作微囊化细胞的装置
- 本发明是一种制作微囊化细胞的装置,属于生物医学工程领域。该装置是由注射系统、高压脉冲发生器和辅助系统组成。通过调节电压、频率和占空比制作50~1000微米不同直径的微囊。制作的微囊可以用于细胞培养和细胞移植。
- 王常勇孙志杰郭希民段翠密
- 文献传递