姜英辉 作品数:110 被引量:177 H指数:8 供职机构: 山东出入境检验检疫局 更多>> 发文基金: 国家质检总局科技计划项目 山东出入境检验检疫局科研项目 山东科技发展计划项目 更多>> 相关领域: 轻工技术与工程 农业科学 医药卫生 生物学 更多>>
四种基因定量方法对实时荧光PCR与微滴式数字PCR检测霍乱弧菌基因表达量的分析 被引量:6 2017年 基因表达量测定对基因功能解析和探索生命机理具有重大意义,目前实时荧光PCR和微滴式数字PCR技术是进行基因表达量测定的有效方法。本文以低温处理的霍乱弧菌sfs、vcc、Rec A、hly及16S r RNA基因为研究对象,分别用实时荧光PCR和微滴式数字PCR技术对低温处理前后霍乱弧菌的上述基因表达量进行测定,实时荧光PCR实验数据分别采用??CT和ge Norm法进行分析,微滴式数字PCR实验数据分别采用相对定量和绝对定量法进行分析,获得处理组基因表达量相对于对照组的变化倍数;使用多维尺度法来分析四种基因定量方法的数据。结果表明,在本实验条件下,四种基因定量方法的分析结果存在差异;16S r RNA基因表达量发生了变化,不适合作为内参基因;微滴式数字PCR能更直观的给出基因表达量变化的结果,并且基因表达差异相对定量分析的准确度更高。 唐静 贾俊涛 赵丽青 王静 张健 姜英辉 徐彪 王昌军 马云关键词:基因表达 实时荧光定量PCR 白色念珠菌环介导等温扩增快速检测方法 本发明涉及一种白色念珠菌环介导等温扩增快速检测方法。其中的试剂包括环介导等温扩增反应液、Bst DNA聚合酶和显色剂;其中的反应液含有反应缓冲液、dNTP、硫酸镁、上游内引物5-CACATTTTGGATAAGGTTCAC... 雷质文 贺楠 姜英辉 刘云国 房保海 李正义 唐静 马维兴 张健 祝素珍 贾俊涛 赵丽青文献传递 检测苹果锈果类病毒的NASBA引物、试剂盒和方法 本发明公开了一种检测苹果锈果类病毒的NASBA引物、试剂盒和方法,上游引物、下游引物的序列分别为 SEQ ID NO:1~2;NASBA扩增试剂盒,包括如下组分:(1)NASBA扩增反应液A;(2)NASBA扩增反应液B... 吴兴海 张成标 魏晓棠 宋涛 姜英辉 邵秀玲 历艳 尼秀媚文献传递 大肠埃希氏菌O157:H7的切刻内切酶核酸恒温扩增快速检测试剂盒 本发明涉及一种大肠埃希氏菌O157:H7的切刻内切酶核酸恒温扩增快速检测的引物及探针,其中正向引物序列为SEQ ID NO:1,反向引物序列为SEQ ID NO:2;P1探针的序列为SEQ ID NO:3;P2探针的序列... 张晓梅 邵秀玲 姜英辉 雷质文 王建广文献传递 基于Taqman探针的水产品中麦氏弧菌的荧光定量PCR快速检测方法 本发明公开了一种基于Taqman探针的麦氏弧菌(Vibrio metschnikovii)的荧光定量PCR快速检测方法,采用麦氏弧菌特异性引物和TaqMan探针,即可对水产品中麦氏弧菌进行检测与监控 。其中上游引物Vme... 贾俊涛 吴振兴 李正义 祝素珍 姜英辉 马云 张健文献传递 细菌活的非可培养状态的分子生物学检测技术研究进展 被引量:9 2011年 许多细菌在不良环境下能进入活的非可培养状态(viable but nonculturable state,VBNC)。细菌培养技术常常造成VBNC状态的细菌漏检,应用分子生物学检测技术可以提高VBNC细胞的阳性检出率。针对VBNC细胞的分子生物学检测技术,基于细菌特异性DNA分子、mRNA分子是目前常用的检测方法,而利用报告基因(如绿色荧光蛋白基因)检测VBNC细胞是一种有效的方法。最近利用叠氮溴乙锭(ethidium monoazide bromide,EMA)或者叠氮溴化丙锭(propidium monoazide,PMA)联合PCR技术选择性抑制细菌死细胞扩增,该方法结合了EMA(PMA)选择渗透性和PCR特异性,作为一种区分细胞死活的方法,可以有效检测细菌VBNC细胞。 李正义 贾俊涛 祝素珍 姜英辉 房保海 雷质文关键词:细菌 分子生物学 发酵乳酸杆菌的荧光定量PCR快速检测方法 一种快速检测发酵乳酸杆菌的荧光定量PCR方法。首先提取待测样品分离琼脂平板上可疑菌落的基因组DNA并稀释备用;再利用发酵乳酸杆菌基因组保守性DNA序列设计特异性引物;然后使用该引物对待测样品分离琼脂平板上可疑菌落的基因组... 刘云国 李正义 贾俊涛 雷质文 姜英辉 赵丽青 房保海单核细胞增生李斯特氏菌的依赖于核酸序列恒温扩增检测方法的建立 采用自行建立和优化的依赖于核酸序列恒温扩增(Nucleic Acid Sequence-based Amplification,NASBA)检测体系,对单核细胞增生李斯特氏菌(Listeria monocytogenes... 姜英辉 张健 赵丽青 祝素珍 王建广 雷质文 梁成珠关键词:单核细胞增生李斯特氏菌 一株分离自美国龙虾的麦氏弧菌的鉴定及其低温状态下细胞脂肪酸的变化 被引量:5 2013年 【目的】对从美国龙虾(Homarus americanus)中分离的菌株F5-1进行种属鉴定并分析其低温状态下脂肪酸组成变化。【方法】通过VITEK 2 Compact全自动微生物鉴定仪分析菌株的生理生化特征和进行药敏试验;16S rRNA基因序列同源性分析确定该菌株的系统发育学地位;通过气相色谱和质谱联用法(GC-MS)分析菌株的全细胞脂肪酸。【结果】菌株F5-1为革兰氏阴性菌,对弧菌抑制剂O/129敏感,对青霉素有耐药性;生理生化特征与麦氏弧菌(Vibrio metschnikovii)的相似性为96%,16S rRNA序列与麦氏弧菌(GenBankNo.HQ658055)的相似性为99%;菌株的主要脂肪酸组成为C12∶0、C14∶0、C16∶0和C16∶1(n-7),不饱和脂肪酸(棕榈油酸)相对含量达34%,低温培养状态下,不饱和脂肪酸(棕榈油酸)相对含量增加至40%。【结论】将美国龙虾中分离的菌株F5-1鉴定为麦氏弧菌,该菌对多种药物敏感,菌细胞脂肪酸组成与来源于俄罗斯海参威某饮用水水库中分离的麦氏弧菌有较大差异。 李正义 贾俊涛 曹际娟 陈吉祥 徐琴 姜英辉关键词:麦氏弧菌 脂肪酸 气相色谱-质谱联用法 浅析生物有机肥中功能微生物对食品质量安全的影响 被引量:2 2017年 随着经济的快速发展和人们生活水平的不断提高,食品安全问题越来越受到人们的关注。在现代农业生产中,化学肥料的使用,为保证粮食稳产、高产等做出了重要的贡献,但粮食品质下降、生态污染、食品安全等一系列问题也随之显现。发展有机农业,生产安全、健康的绿色食品成为我国乃至世界农业发展的趋势。作为一种新型肥料,生物有机肥在粮食作物、经济作物、林业生产和园林绿化等领域均受到人们的重视。本文主要介绍了生物有机肥的功能微生物,论述了生物有机肥检测方面的问题和对食品质量安全等的影响,希望生物有机肥在减少化肥污染、改善生态环境、确保食品质量安全等方面发挥更好的作用。 唐静 马云 赵丽青 李明哲 李正义 贾俊涛 姜英辉 王昌军关键词:生物有机肥 食品质量安全