李桂林
- 作品数：87 被引量：460H指数：12
- 供职机构：北京协和医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家高技术研究发展计划科技部基础研究重大项目前期研究专项更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 大鼠海马的表达蛋白质组学实验研究被引量：3
- 2006年
- 目的:用蛋白质组学方法初步分析大鼠海马蛋白质的表达。方法:提取大鼠海马蛋白质样品后,用双向凝胶电泳对其分离,经考马斯亮蓝染色后,产生大鼠海马蛋白质双向凝胶电泳图谱。从凝胶上切割分离的蛋白质,经胰蛋白酶胶内酶解,通过基质辅助激光解吸/电离飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)对酶解后的肽段进行分析,根据肽段质谱数据,经数据库(NCBI)检索,对蛋白质进行鉴定。结果:鉴定了37种具有明确功能的蛋白质,它们分别属于代谢酶、细胞骨架蛋白、热休克蛋白、抗氧化蛋白、信号传导蛋白、蛋白酶体相关蛋白、神经元特异蛋白及神经胶质蛋白。另外,鉴定了3种未知功能蛋白。结论:为建立大鼠海马蛋白质组数据库提供必要的资料,为在大鼠模型上研究神经疾病发病机理奠定基础。
- 张波王任直范明姚勇李桂林
- 关键词：海马蛋白质组学双向凝胶电泳质谱
- 颈动脉狭窄血管重建术后颅内过度灌注综合征的研究进展被引量：4
- 2008年
- 王斌李桂林王任直
- 关键词：脑过度灌注综合征血管重建术后颈动脉狭窄颈动脉内膜剥脱术颅内
- SHH-N基因腺相关病毒表达载体的构建及其对神经干细胞增殖相关基因的影响被引量：1
- 2011年
- 目的构建rAAV-SHH-N-EGFP载体并检测其对神经干细胞增殖相关基因影响。方法分离并培养大鼠脑室下区神经干细胞,提取RNA、反转录、PCR得到SHH-N的cDNA,克隆入pSNAV2.0-CMV-IRES-EGFP,包装得到腺相关病毒rAAV-SHH-N-EGFP,感染神经干细胞48 h后,采用实时定量PCR检测SHH信号通路下游相关基因的mRNA水平变化,并观察rAAV-SHH-N-EGFP载体在神经干细胞内的表达情况。结果 (1)克隆得到SHH-N基因,测序结果与NCBI报道序列一致。(2)成功构建pSNAV2.0-CMV-SHH-N-IRES-EGFP表达载体并鉴定,包装得到rAAV-SHH-N-EGFP。(3)实时定量PCR分析rAAV-SHH-N-EGFP感染神经干细胞48 h后,rAAV-SHH-N-EGFP处理组较感染rAAV-EGFP的对照组,Gli1和Nmyc的mRNA水平上调。(4)rAAV-SHH-N-EGFP可有效感染神经干细胞,在感染14 d后稳定表达SHH-N。结论成功构建rAAV-SHH-N-EGFP过表达载体并使其在神经干细胞内稳定表达。过表达SHH-N可使神经干细胞内SHH信号通路相关基因Gli1转录水平上调,并使细胞增殖相关基因Nmyc转录水平上调。
- 刘东升崔岩申仑杜延平李桂林王任直王岩张波
- 关键词：神经干细胞SHH信号通路
- 侵袭性泌乳素腺瘤标记物
- 2010年
- 泌乳素腺瘤是成人最常见的垂体腺瘤，其中泌乳素大腺瘤，尤其是男性患者常表现为侵袭性生长，可侵入蝶窦、海绵窦、鞍上区，甚至鼻咽部。由于可侵犯多个颅内重要结构，侵袭性泌乳素腺瘤手术切除率低，复发率高。目前，泌乳素腺瘤侵袭性行为的生物学机制尚未完全阐明，
- 关健李桂林王任直杨义
- 关键词：催乳素瘤
- Rathke囊肿的诊断与误诊分析被引量：5
- 2007年
- 目的:探讨Rathke囊肿的临床特点,提高临床医生对本病的认识,减少误诊。方法:回顾性分析71例Rathke囊肿的病历资料和误诊情况。结果:Rathke囊肿女性多发(男:女=1:1.54)。临床表现以头痛、视力视野障碍、内分泌障碍为主。MRI检查T1WI可为高、低、等信号,T2WI70%为高信号、30%为低、等信号,部分病例增强后囊壁强化。69例经蝶窦入路,2例开颅手术切除囊肿。术后随诊3个月～10年,复发1例,占1.4%。结论:Rathke囊肿术前诊断困难,结合内分泌、影像学检查有助于准确诊断。症状性Rathke囊肿首选经蝶窦手术治疗,疗效良好,复发率低。
- 冯铭王任直魏俊吉李桂林马文斌杨义窦万臣康军魏宇魁李照建张子衡幸兵姚勇
- 关键词：RATHKE囊肿
- 血管内皮生长因子基因转染胶质瘤细胞在治疗缺血性脑血管病中的意义被引量：3
- 2001年
- 王任直张雪峰李桂林张坚任祖渊
- 关键词：缺血性脑血管病血管内皮生长因子基因转染胶质瘤细胞
- 胶质瘤中RNA编辑酶ADAR2,ADAR3 mRNA表达及意义被引量：1
- 2006年
- 目的观察不同恶性程度的胶质瘤细胞中RNA编辑酶ADAR2(RED1),ADAR3(RED2)mRNA水平的表达。方法对原代培养的正常人脑胶质细胞和胶质瘤细胞SHG-44,U-251,BT-325,应用ADAR2,ADAR3全长序列合成引物及合成的特异引物,用逆转录PCR及图像分析法检测ADAR2,ADAR3 mRNA水平的表达。ADAR基因表达水平用基因/β-肌动蛋白(-βactin)灰度比值表示。结果ADAR2在正常人脑胶质细胞中表达极弱,在低恶性度的胶质瘤SHG-44细胞中呈弱表达,在高恶性度的胶质瘤U-251,BT-325细胞中明显表达。ADAR3在正常人脑胶质细胞及苯乙酸处理前后的胶质瘤细胞中,均未见表达。结论ADAR2 mRNA水平高表达,可能与高恶性度胶质瘤的发生有关。
- 田宇潘玉琢杜超高俊李桂林李桂英王任直
- 关键词：胶质瘤RNA编辑酶逆转录PCR
- 神经外科术后肺血栓栓塞症的诊治
- 目的增强对神经外科术后肺血栓栓塞症的认识,分析神经外科围手术期各种危险因素,提高神经外科术后肺血栓栓塞症的预防及诊疗水平。方法7例患者先期行肝素或低分子肝素抗凝治疗,后期行华发林抗凝,其中2例在抗凝治疗前行下腔静脉永久滤...
- 魏俊吉王任直任祖渊苏长保马文斌杨义李桂林冯铭赵浩
- 重组腺相关病毒载体在大鼠海马内转导特征及其细胞亲嗜性被引量：5
- 2006年
- 目的 探讨3种不同血清型重组腺相关病毒（rAAV1、rAAV2和rAAV5）载体在大鼠海马内转导效率及细胞亲嗜性的差异，从而选择更加适于中枢神经系统（CNS）转基因治疗的载体。方法 雄性健康成年SD大鼠18只，随机分为3组，每组6只，分别接受立体定向注射剂量和滴度相匹配的rAAV1、rAAV2、rAAV5载体，以增强型绿色荧光蛋白（EGFP）为报告基因，于注射后8周取脑行序列冰冻切片，以荧光显微镜观察EGFP在脑内的表达情况，并以Image-Pro Plus图像处理系统自动测量表达的面积和阳性细胞数量；为确定rAAV载体在CNS中的细胞亲嗜性，以神经元核性蛋白（NeuN）和胶质纤维酸性蛋白（GFAP）免疫荧光双重标记法观察EGFP在不同类型神经细胞的表达情况。结果 各组EGFP表达呈现不同分布特征，rAAV1介导EGFP在海马CA1～CA3区绝大多数锥体细胞及齿状回的颗粒细胞中表达，rAAV2主要局限于齿状回门区的多形细胞层，rAAV5仅在CA1和CA2区锥体细胞层的少量细胞中表达。最大嘴尾侧转导距离、最大转导面积和EGFP阳性细胞计数rAAV1均显著大于rAAV2和rAAV5（P〈0．01），rAAV2和rAAV5比较，差异均无显著性（P〉0．05）。免疫荧光标记显示rAAV1既可以转导神经元，又可以转导胶质细胞；而rAAV2和rAAV5则仅可转导神经元。结论 rAAV1不仅可以比rAAV2和rAAV5转导更大的范围和细胞数量，而且具有更广的组织亲嗜性，是一种高效的转基因载体。
- 栗世方李照建李桂林窦万臣张振兴魏俊吉孔燕国徐珑高俊王任直
- 关键词：重组腺相关病毒血清型海马基因转导
- 二型谷氨酸羧肽酶口服基因疫苗的制备及其降低大鼠麻醉药用量的初步研究被引量：1
- 2004年
- 目的 研制携带二型谷氨酸羧肽酶 (GCPⅡ )的口服疫苗 ,探讨该疫苗对大鼠麻醉药用量的影响。方法 采用聚合酶链反应、酶切连接和蓝白筛选的方法 ,构建GCPⅡ的表达载体 ;用磷酸钙共沉淀的方法转染HEK2 93细胞 ,G4 18筛选阳性细胞克隆 ;逆转录聚合酶链反应和免疫荧光细胞染色的方法鉴定阳性细胞株 ;氯化钙法制备携带GCPⅡ表达载体的减毒鼠伤寒沙门氏菌口服疫苗(SL GCPⅡ ) ;采用原代培养的巨噬细胞吞噬SL GCPⅡ的方法 ,观察疫苗的体外表达情况 ;将 5 0只雄性SD大鼠随机分为A、B 2组 ,每组 2 5只 ,2组鼠的体重分别为 ( 174 g±13g)和 ( 172 g± 11g) ,差异无显著意义 (P =0 0 72 )。A组胃内灌注 6 0 0 μL、OD2 60 0 6SL GCPⅡ ,两周内 4次给药 ;B组为对照组 ,给予SL32 6 1,剂量和方法与A组相同。采用免疫荧光的方法检测大鼠循环中GCPⅡ抗体滴度 ,观察麻醉药戊巴比妥钠的用量。结果 扩增GCPⅡ基因并构建了含有GCPⅡ基因的表达载体———pCDNA3 1 GCPⅡ ;建立了细胞株HEK 2 93 GCPⅡ ;体外实验证明培养的巨噬细胞吞噬SL GCPⅡ后 ,能够有效表达GCPⅡ基因。体内实验发现口服疫苗能够激活 2 2 / 2 5只SD大鼠产生GCPⅡ抗体 ,实验组麻醉药戊巴比妥钠的用量 ( 36 9mg/kg± 1 6mg/kg)显著低于对照组 ( 4 0
- 田士强王任直李桂林王欣张波姚勇窦万臣孔燕国张振兴栗世方
- 关键词：麻醉药戊巴比妥
