徐萌 作品数:23 被引量:57 H指数:3 供职机构: 首都医科大学附属北京佑安医院感染中心 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 国家科技重大专项 艾滋病研究北京市重点实验室项目 更多>> 相关领域: 医药卫生 生物学 文化科学 更多>>
巢式RT-PCR法检测HIV-1阳性者中庚型肝炎病毒感染的研究 被引量:1 2011年 目的调查HIV流行地区庚型肝炎病毒(HGV)在HIV阳性人群中的感染率,并探讨其对HIV病程的影响。方法根据已知并公认的HGV序列,设计特异巢式引物,建立HGVRNA的巢式RT-PCR方法,对100例HIV-1阳性感染者进行检测,同时进行CD4+T细胞计数和HIV病毒载量的测定。结果 100例HIV-1阳性者中检测出HGVRNA阳性感染者22例(22%);合并感染HGV的HIV感染人群体内可见有较高CD4细胞数。结论 HIV阳性感染者有较高的HGV重叠感染率,可能与其具有共同的传播途径有关,合并感染HGV似乎能延缓HIV感染者的病程。 徐萌 绳波 刘志英 陈德喜 吴昊关键词:庚型肝炎病毒 聚合酶链式反应 供血 细胞miRNA在HIV-1感染中的作用 被引量:1 2015年 RNA干扰在控制病毒感染中具有重要作用,细胞miRNA在人类免疫缺陷病毒I型(human immunodeficiency virus type I,HIV-1)感染中也具有重要的调控作用。近年,通过对HIV-1和宿主细胞miRNA相互作用的研究发现,目前仅仅涉及到两者复杂关系的表象,仍有很多深层次的问题无法回答。 李岚 徐萌 绳波 吴昊 李威关键词:人类免疫缺陷病毒I型 MICRORNA RNA干扰 北京市部分男男同性恋人群中HIV-1分子流行病学研究 被引量:23 2009年 目的了解北京市部分男男同性恋(men who have sex with men,MSM)人群HIV-1的分子流行情况,监测该地区人群HIV毒株的最新流行情况。方法提取17例男男同性恋者HIV-1抗体阳性样本全血基因组DNA,直接进行巢式PCR扩增HIVenv基因C2-V5区及gag基因P17-P24区,对PCR产物进行核苷酸序列测定和分析,确定基因亚型。结果17例患者中,共存在CRF01-AE、B亚型和CRF07-BC3种亚型,其中CRF01-AE9例(52.94%),B亚型5例(29.41%),CRF07-BC3例(17.65%)。结论小样本量的流行病学调查显示,北京地区部分男男同性恋人群中主要存在CRF01-AE、B和CRF07-BC3种亚型;CRF01-AE已取代B亚型而成为北京市MSM人群中HIV主要流行亚型,CRF07-BC重组亚型在北京市MSM人群中增长迅速。 刘志英 李海英 张彤 黄晓婕 魏飞力 徐萌 焦艳梅 徐小宁 陈德喜 吴昊关键词:男男同性恋 人类免疫缺陷病毒1型 p53基因敲除小鼠生长发育和繁殖性能的调查 2013年 目的观察p53基因敲除小鼠与BALB/c小鼠在生长发育和繁殖性能方面的差异。方法 p53基因敲除小鼠和BALB/c小鼠各34只,雌雄各半,观察其2周龄至12周龄的体质量和体长,并随机选取30笼一雌一雄所产第2胎仔鼠进行幼仔个数的统计。结果在生长发育方面,3周龄时p53基因敲除小鼠与BALB/c小鼠体质量无明显差异,P=0.846>0.05;6周龄时p53基因敲除小鼠体质量明显低于BALB/c小鼠,P=0.000<0.05;体长在3周龄和6周龄时p53基因敲除小鼠体长明显低于BALB/c小鼠,P=0.000<0.05。在繁殖性能方面,p53基因敲除小鼠同样明显低于BALB/c小鼠,P=0.000<0.05。结论初步研究了p53基因敲除对小鼠的繁殖与发育的影响,与BALB/c小鼠比较均有显著差异。 徐萌 柴梦音 绳波 陈德喜关键词:生长发育 繁殖性能 北京市男男性行为人群庚型肝炎病毒感染率和流行亚型分析 2013年 庚型肝炎病毒(HGV,GBv-c)与丙型肝炎病毒同属黄病毒科,两者核苷酸有30%的同源性。GBV-C不引起感染人群肝病或其他疾病,感染数年后能自动清除。GBV-C与HIV具有相似的感染途径,大部分经血液、性接触或者母婴传播,所以在高危人群中存在很高的重叠感染。在HIV感染人群中GBV-C感染率明显高于正常人群,40%HIV感染者显示有活跃的GBV-C共同感染, 徐萌 绳波 寇卜心 宋凤丽 袁霖 吴昊 陈德喜 刘志英关键词:庚型肝炎病毒 男男性行为者 亚型分析 多引物小型集合HIV核酸检测技术的建立及在男男性接触者急性感染检测中应用 被引量:1 2010年 目的 建立结合多重反转录巢式PCR技术检测HIV RNA的小型集合NAT,用于MSM人群急性感染的筛查诊断.方法 利用2008年10月至2009年3月期间从3名HIV窗口期感染者、30名HIV慢性感染者、97名健康人采集冻存的EDTA抗凝血浆建立小型集合NAT.将10份待测标本混合组成1个集合,离心富集病毒,提取RNA 针对HXB2的nt5783-nt6228和nt1235-nt2012区分别设计2对引物 采用多重RT-PCR、巢式PCR扩增2个目标区的核酸片段,对结果阳性的集合中标本进一步分别检测.确定小型集合NAT的灵敏度,并进行验证.应用建立的方法对1 005份与上述标本同一时期收集的MSM人群的HIV抗体阴性血浆进行检测.结果 (1)成功扩增出目标区的2条特异性片段,灵敏度为162拷贝/ml (2)对3份HIV窗口期感染者标本用小型集合NAT方法盲法验证的结果和预期一致 (3)用多重RT-PCR和巢式PCR对30份HIV抗体阳性标本检测,阳性率100%(30/30) (4)发现1 005份血浆标本中有1份为HIV RNA阳性,追踪随访发现HIV-1抗体转阳.结论 本研究中建立多引物小型集合RT-PCR、巢式PCR结合的小型集合NAT的敏感性好,可用于MSM人群HIVG感染窗口期筛查检测. 吴亚松 刘志英 焦艳梅 魏飞力 徐萌 张彤 黄晓婕 张福杰 陈德喜 徐小宁 吴昊关键词:HIV感染 HIV-1 核酸扩增技术 GPC3融合蛋白的表达及鉴定 2015年 目的构建人类磷脂酰肌醇蛋白聚糖3(glypican-3,GPC3)重组真核表达载体,并进行蛋白表达,为后续研究提供基础。方法以人类肝脏c DNA文库为模板扩增出GPC3基因序列,将扩增产物与p MD-18 simple T载体进行连接构建出T-GPC3克隆载体,用EcoRⅠ、Bam HⅠ对T-GPC3克隆载体和pc DNA4.1空载体进行双酶切,从T-GPC3克隆载体上获取GPC3基因片段,用T4连接酶将GPC3基因片段连接到pc DNA4.1酶切后的载体上,构建出pc DNA4.1-GPC3真核表达载体;将构建好的载体再次测序,并进行蛋白表达及WB的鉴定。结果扩增GPC3的PCR产物长度为1 740 bp,质粒测序结果经与NCBI网站比对后序列完全一致,说明pc DNA4.1载体中正确插入了目的片段。Western blotting分析发现有相对分子质量大小约为66 k D的蛋白条带,蛋白经鉴定后亦为GPC3蛋白。结论成功地构建了真核表达载体pc DNA-GPC3并获得了GPC3蛋白。 刘芳 徐萌 绳波 李莉关键词:磷脂酰肌醇蛋白聚糖3 基因表达 融合蛋白 真核表达 小型集合HIV RT-PCR方法的建立及其在MSM人群窗口期检测中的应用 目的建立的小型集合艾滋病病毒(HIV)RNA逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR),并将其应用于男男同性恋及其他高危人群窗口期的检测。方法将10份待测标本混合组成一个集合,高速离心富集病毒,提取病毒RNA;设计针对覆盖我国... 刘志英 陈德喜 焦艳梅 魏飞力 徐萌 张彤 黄晓婕 徐小宁 吴昊关键词:MSM 男男同性恋 窗口期 一例HIV-1急性感染者奠基病毒的gp160基因序列特征及其假病毒构建 2014年 目的观察急性感染期艾滋病病毒I型(HIV-1)gp160的全长基因序列及感染特征。方法从一例处于Feibig I期HIV-1感染者血浆中提取RNA,扩增gp160全长基因并测序,分析其生物学信息;将gp160全长基因与pcDNA3.1His/V5真核表达载体连接,构建Env-pcDNA3.1真核表达质粒,与骨架质粒pNL4-3.Luc.R-E-共转染293细胞,包装出假病毒。用包装的假病毒感染ghost细胞,测定感染细胞的荧光素酶活性(RLU),鉴定假病毒的感染活性。结果成功扩增出gp160全长基因,嗜性预测为CCR5,N-糖基化位点数与标准株HXB2相同,但gp120糖基化程度更高,氨基酸变异主要集中在V1-V5区。假病毒感染试验显示,RLU值达到7log。结论获得了处于急性感染期的HIV-1gp160基因序列和高感染活性的假病毒。 刘志英 李甜 寇卜心 徐萌 徐树莹 陆小凡 焦艳梅 张彤 陈德喜 吴昊关键词:艾滋病病毒I型 假病毒 人CD4 D1D2结构域多克隆抗体对HIV-1的广谱中和作用 目的人CD4 D1D2结构域多克隆抗体对HIV-1的广谱中和活性。方法分别构建人CD4 D1D2结构域和鼠CD4 D1与人CD4 D2结构域嵌合型质粒pAcGP67-hD1D2和pAcGP67-mD1hD2,分别与杆状病... 李岚 纪云霞 徐萌 吴昊关键词:多克隆抗体 HIV-1 结构域 文献传递