齐嫄
- 作品数:4 被引量:3H指数:1
- 供职机构:苏州大学医学部医学生物技术研究所更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金江苏省“青蓝工程”资助基金博士科研启动基金更多>>
- 相关领域:医药卫生生物学更多>>
- 人膜型HVEM对T细胞体外增殖和细胞因子分泌的协同刺激作用被引量:1
- 2010年
- 建立人协同刺激分子HVEM的基因转染细胞株,探讨膜型HVEM体外对T细胞活化与增殖的协同刺激作用。从此前已插入人HVEM编码区全长基因的pMD18-T/HVEM中用PCR法扩增出目的片段,经EcoRⅠ和BamHⅠ双酶切后插入pIRES2-EGFP真核表达载体构建成pIRES2-EGFP/HVEM重组载体,以脂质体法转染鼠L929细胞。经G418长期加压筛选,以免疫荧光标记和流式细胞术分析HVEM分子在转染细胞膜上的表达情况,以MTT法和ELISA法测定获得HVEM转染细胞L929体外对T淋巴细胞增殖及细胞因子分泌的影响。结果:基因转染细胞株L929/HVEM的细胞膜上能稳定高表达人HVEM分子。体外细胞共培养试验表明,与未转染HVEM基因的L929/mock细胞相比,L929/HVEM能显著地促进抗人CD3单抗(mAb)刺激的T细胞增殖,以及促进T细胞IL-2、IFN-γ、IL-10和TNF-α的分泌。建立了稳定高表达人HVEM分子的基因转染细胞株,并发现膜型HVEM体外对T细胞增殖和相关细胞因子的分泌具有显著促进作用。
- 齐嫄王雪峰黄子逸朱耿超胡振华张学光
- 关键词:HVEM转染T细胞增殖
- 人HVEM基因转染细胞株的建立及其单克隆抗体的研制
- HVEM(Herpesvirus-entry mediator)是至今发现的唯一一个既能与肿瘤坏死因子超家族成员LIGHT结合,同时也与免疫球蛋白家族成员BTLA结合的共刺激分子,被称为是调节机体免疫应答的分子开关。HV...
- 齐嫄
- 关键词:基因转染单克隆抗体分子开关肿瘤坏死因子受体共刺激分子
- 文献传递
- 一株鼠抗人HVEM单克隆抗体的研制及初步鉴定
- 2014年
- 研制鼠抗人单纯疱疹病毒侵入介质(HVEM)的功能性单克隆抗体,并对其生物学特性进行初步分析。以高表达人HVEM分子的基因转染细胞L929/HVEM作为免疫原,常规免疫小鼠并进行融合,以L929/HVEM作为抗体筛选细胞,L929/mock为对照细胞,筛选出分泌特异性鼠抗人HVEM单克隆抗体的杂交瘤细胞株;采用western blot、间接免疫荧光法和MTT增殖实验对单抗进行生物学特性的分析。结果显示,成功获得一株特异性鼠抗人HVEM的杂交瘤细胞株,命名为2B11。该单抗能够识别肿瘤细胞表达的HVEM分子,且在体外能够显著抑制HVEM介导的T细胞增殖和细胞因子的分泌,从而为进一步研究HVEM介导的免疫学效应提供了物质基础。
- 宋华峰齐嫄黄子逸吴妹英胥萍王雪峰张学光
- 关键词:共刺激分子单克隆抗体T细胞
- 人LIGHT基因转染细胞株的建立及其对T细胞协同刺激作用的研究被引量:2
- 2010年
- 建立人协同刺激分子LIGHT的基因转染细胞株,探讨其体外对T细胞活化与增殖的协同刺激作用。采用RT-PCR法从活化的人外周血T细胞中克隆人LIGHT编码区全长基因,经EcoR I和BamH I双酶切后插入pIRES2-EGFP真核表达载体构建成pIRES2-EGFP-LIGHT重组子,脂质体法以重组质粒pIRES2-EGFP-LIGHT转染鼠L929细胞。经G418长期加压筛选,免疫荧光标记和流式细胞术分析LIGHT分子在基因转染的L929细胞膜上的表达,MTT法和酶联免疫吸附测定法(ELISA)探讨获得的基因转染细胞L929/LIGHT体外对T淋巴细胞增殖与活化的影响。结果:流式细胞术检测转基因L929/LIGHT细胞膜上能稳定高表达人LIGHT分子。体外细胞共培养试验表明,与未转染LIGHT基因的L929/mock细胞相比,L929/LIGHT能显著地促进抗人CD3单抗(mAb)刺激的T细胞增殖;同时L929/LIGHT亦能明显促进T细胞对IL-2、IFN-γ和IL-10的分泌。建立了稳定高表达人LIGHT分子的基因转染细胞株,LIGHT介导的信号在体外对T细胞增殖和相关细胞因子的分泌具有显著地促进作用。
- 黄子逸王雪峰齐嫄朱耿超胡振华张学光
- 关键词:T细胞