黄子逸
- 作品数:25 被引量:10H指数:2
- 供职机构:苏州大学附属第一医院更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金江苏省“青蓝工程”资助基金博士科研启动基金更多>>
- 相关领域:医药卫生生物学更多>>
- 抗人LIGHT单克隆抗体及其应用
- 本发明属于遗传工程领域,涉及肿瘤坏死因子超家族成员的结合蛋白质或多肽,本发明公开了一种杂交瘤细胞株,所述杂交瘤细胞株为一种分泌小鼠抗人LIGHT分子单克隆抗体杂交瘤细胞株,所述杂交瘤细胞的保藏编号为CGMCC No.47...
- 张学光黄子逸王雪峰
- 文献传递
- 一种CD40联合PD-L1及细胞因子扩增PBMC的方法
- 本发明公开了一种CD40联合PD‑L1及细胞因子扩增PBMC的方法,步骤如下:1)取正常人外周血,与PBS混合稀释后进行Ficoll密度梯度离心;2)离心结束后,得到4层液体;用移液管吸取中间云雾层细胞,用10倍体积的P...
- 古彦铮张学光黄子逸刘翠平
- 文献传递
- 共刺激分子B7-H3对人非小细胞肺癌细胞系A549侵袭和存活影响的初步研究被引量:2
- 2019年
- 目的探讨B7-H3分子对人非小细胞肺癌细胞系(A549)增殖和侵袭的影响。方法流式细胞术检测A549上B7-H3分子蛋白的表达,慢病毒感染A549以干扰B7-H3表达(B7-H3-A549),并通过Westernblot和qPCR对其进行鉴定;CCK8法测定B7-H3-A549和B7-H3^+A549两组细胞的增殖差异;Annexin-PE/PI双染和PI单染后,流式检测细胞凋亡和周期的变化;Transwell法评估B7-H3^-A549和B7-H3^+A549细胞迁移和侵袭的变化;Westernblot检测细胞凋亡相关蛋白的表达。结果A549高表达B7-H3蛋白分子,感染慢病毒后得到B7-H3-A549稳定表达的细胞株及其对照细胞株B7^-H3^+A549。A549沉默B7-H3后生长速度显著降低。B7-H3-A549组早期凋亡细胞百分率高于B7-H3^+A549,两组晚期细胞凋亡率差异无统计学意义;B7-H3^-A549细胞在细胞周期G0/G1期受到阻滞。B7-H3^-A549细胞的迁移和侵袭能力低于B7-H3+A549细胞。B7-H3-A549细胞中Bad、Caspase-3表达上调,Bcl-2、P-AKT、MMP-9表达下调,总AKT没有明显变化。结论沉默B7-H3分子抑制了A549的增殖和侵袭,促使细胞阻滞于G0/G1期,诱导细胞发生凋亡。
- 张帅张东泽黄子逸张光波
- 关键词:A549细胞B7-H3凋亡
- 两种白细胞滤器获取单个核细胞作为实验研究的生物学功能的比较
- 2019年
- 目的:分析单采血小板去白细胞滤器(apheresis platelet leukoreduction system chambers, LRSCs)和全血去白细胞滤器(whole blood leukoreduction filters, LRFs)所收集的白细胞替代常规人全血白细胞进行实验的相关生物学功能和表型。方法:分别采用直接法和反冲洗获得LRSCs和LRFs白细胞,经人的淋巴细胞分离液进行密度梯度离心,分离出外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cells, PBMCs)。用CD3激发型抗体和细胞因子白细胞介素2(interleukin, IL-2)体外扩增培养10 d,观察细胞形态、细胞增殖、细胞凋亡,并用流式细胞术(flow cytometry, FCM)进行表型分析,对比两种滤器分离出的白细胞生物学差异。结果:(1)PBMCs镜下观察:LRSCs中细胞较纯,个体大小较均一;LRFs包含部分形态较小的血小板和形态较大的粒细胞。两者细胞活力无差异。(2)LRSCs所分离的PBMCs细胞亚群以淋巴细胞为主,单核细胞次之,含极少量的粒细胞;而LRFs淋巴细胞与粒细胞比例接近,单核细胞较少。初始状态淋巴细胞群体中各细胞亚群表型相似。(3)LRSCsPBMCs细胞,经CD3与IL-2体外刺激后,细胞活化集落大且较均一,而LRFs-PBMCs细胞集落多但分布较散。(4)体外培养第6天、第10天两组滤器间淋巴细胞各亚群表型差异无统计学意义。(5)两种滤器血PBMCs细胞凋亡率类似,且均为早期凋亡细胞比例高于晚期凋亡细胞。(6)经体外扩增培养10d,发现两种滤器血PBMCs细胞增殖速率相当,细胞活力等同。结论:两种滤器所得的白细胞均可用于相关的基础实验研究,且LRFs含有较多的粒细胞,这也为粒细胞的研究工作提供了便利,解决了临床用血与实验用血的需求。
- 汤龙海何红红黄子逸曹维娟邱香李维洁古彦铮王明元
- 关键词:外周血单个核细胞
- 免疫卡控点靶向治疗的PD-L1检测抗体试剂在胃肠道肿瘤的应用
- 胃肠道肿瘤是我国常见的严重危害健康的恶性疾病,亟待寻找和建立提高5年生存率的诊疗新方法。有研究显示PD-L1的表达水平与总体生存率在不同分期胃癌中呈现出显著的负相关性,且PD-L1在胃癌组织的表达显著高于癌旁组织及正常组...
- 黄子逸古彦铮丁思思张光波陈卫昌张学光
- 关键词:胃肠道肿瘤
- 人HVEMIg融合蛋白的研制及其生物学特性的探讨
- 适度、有效免疫应答的启动、发生、发展取决于正性和负性共信号分子间的平衡.LIGHT在LIGHT/HVEM/BTLA(CD160)调控网络中参与了对T细胞的正性激活作用,表明其作为一个共信号分子在机体的免疫调节、器官移植的...
- 黄子逸王雪峰朱耿超张学光
- 一种CD40联合PD-L及细胞因子扩增PBMC的方法
- 本发明公开了一种CD40联合PD‑L及细胞因子扩增PBMC的方法,步骤如下:1)取正常人外周血,与PBS混合稀释后进行Ficoll密度梯度离心;2)离心结束后,得到4层液体;用移液管吸取中间云雾层细胞,用10倍体积的PB...
- 古彦铮张学光黄子逸刘翠平
- 人HVEM-Fc融合蛋白的制备及其生物学特性
- 2013年
- 为建立CHO/HVEM-Fc基因转染细胞株,使之能稳定分泌HVEM-Fc融合蛋白,采用常规PCR法分别从本单位已构建的重组载体pGEZ-Term/B7-H1-Fc和pIRES2-EGFP/HVEM上扩增人IgG1(Fc)恒定区和人HVEM胞外段编码基因,XhoⅠ和Bam HI双酶切人IgG1(Fc)恒定区及真核表达载体pIRES2-EGFP,将两种酶切的目的产物连接为pIRES2-EGFP/Fc,同时将获得的人HVEM胞外段基因片段经XhoⅠ和NheⅠ酶切后插入上述pIRES2-EGFP/Fc构建成pIRES2-EGFP/HVEM-Fc重组载体,通过脂质体转染仓鼠卵巢癌CHO细胞,培养基中添加G418长期筛选并将分泌目的蛋白的基因转染细胞株亚克隆化。流式细胞术检测HVEM-Fc融合蛋白的表达,收集含融合蛋白的基因转染细胞培养上清,Protein G亲和层析柱对其进行纯化,Western blot定性分析。MTT检测HVEM-Fc融合蛋白体外对抗人CD3单抗联合基因转染细胞L929/LIGHT刺激的T淋巴细胞增殖的影响。结果表明,基因转染细胞CHO/HVEM-Fc分泌的HVEM-Fc融合蛋白能与L929/LIGHT细胞有效结合,纯化后的蛋白经Western blot鉴定出现特异性清晰条带,并且HVEM-Fc融合蛋白对L929/LIGHT协同刺激的T细胞体外增殖具有抑制作用。
- 黄子逸朱耿超王雪峰张学光
- 关键词:融合蛋白共刺激分子T细胞
- 一株鼠抗人HVEM单克隆抗体的研制及初步鉴定
- 2014年
- 研制鼠抗人单纯疱疹病毒侵入介质(HVEM)的功能性单克隆抗体,并对其生物学特性进行初步分析。以高表达人HVEM分子的基因转染细胞L929/HVEM作为免疫原,常规免疫小鼠并进行融合,以L929/HVEM作为抗体筛选细胞,L929/mock为对照细胞,筛选出分泌特异性鼠抗人HVEM单克隆抗体的杂交瘤细胞株;采用western blot、间接免疫荧光法和MTT增殖实验对单抗进行生物学特性的分析。结果显示,成功获得一株特异性鼠抗人HVEM的杂交瘤细胞株,命名为2B11。该单抗能够识别肿瘤细胞表达的HVEM分子,且在体外能够显著抑制HVEM介导的T细胞增殖和细胞因子的分泌,从而为进一步研究HVEM介导的免疫学效应提供了物质基础。
- 宋华峰齐嫄黄子逸吴妹英胥萍王雪峰张学光
- 关键词:共刺激分子单克隆抗体T细胞
- 肿瘤微环境免疫分子(B7-H1、B7-H3、B7-H4和CD8)检测试剂的研制及PD-1人源抗体的构建
- 肿瘤微环境是肿瘤发生发展必不可少的土壤,肿瘤发展不同阶段逐步建立的免疫抑制微环境,不仅抵抗和抑制机体抗肿瘤免疫应答,而且有助于肿瘤细胞持续扩增,促使免疫细胞失能甚至转变成有利于肿瘤生长的免疫细胞,最终促进了肿瘤细胞生长和...
- 黄子逸
- 关键词:免疫分子检测试剂
- 文献传递