郝春慧
- 作品数：6 被引量：5H指数：1
- 供职机构：华中科技大学同济医学院环境与健康教育部重点实验室更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金湖北省科技攻关计划更多>>
- 相关领域：医药卫生理学更多>>
- 内毒素的多粘菌素B与抗体联用夹心ELISA检测法
- 2012年
- 目的建立细菌内毒素的多粘菌素B(PMB)与抗内毒素兔多克隆抗体联合夹心ELISA(sELISA)检测法。方法将PMB包被于酶标板作固相,封闭后逐次加入不同浓度的大肠杆菌内毒素,优化抗内毒素兔多抗和酶标抗体的浓度,建立sELISA方法。结果在0.1～100μg/ml范围内,内毒素浓度与OD值呈正相关关系,回归方程为y=0.094lnx+0.227,R2=0.914,最低检测限为100 ng/ml。结论该方法适用于内毒素检测。
- 周卓晟罗中捷郝春慧郭寅生刘红艳黄正
- 关键词：内毒素多粘菌素B多克隆抗体
- 环境胁迫因子对大肠杆菌的影响被引量：3
- 2010年
- 罗中捷周卓晟郝春慧刘红艳黄正
- 关键词：大肠杆菌
- 微生态水样中活的非可培养态大肠杆菌O157：H7的检测
- 2012年
- 目的监测大肠杆菌O157：H7在微生态汉江水中活的非可培养态；探讨荧光染色、异养平板计数和ELISA检测活的非可培养态大肠杆菌O157：H7的可行性。方法将大肠杆菌O157：H7投加到模拟微生态汉江水样中，通过改变温度和营养条件，分别采用吖啶橙染色、活菌直接计数-5-氰基-2，3-二-（P-苄基-四唑氯化物）染色、活菌直接计数·萘啶酮酸染色、异养平板计数和ELISA法实时监测大肠杆菌O157：H7的存活情况。结果在4℃、寡营养条件下，大肠杆菌O157：H7在汉江水中存活58d后进入活的非可培养态，此时采用活菌直接计数-5-氰基-2，3-二-（P-苄基-四唑氯化物）染色法测得活菌数为1．2×10^5CFU／ml，活菌直接计数-萘啶酮酸染色法测得活菌数为9．0×10^4CFU／ml，异养乎板计数法测得可培养菌数为0，ELISA法测得微生态汉江水中大肠杆菌O157：H7总菌数在58d内基本稳定于10^6CFU／ml的初始菌数水平。结论在4℃、寡营养条件下，大肠杆菌O157：H7在微生态汉江水中可进入活的非可培养态；ELISA结合荧光染色、异养平板计数，能定量检出活的非可培养态大肠杆菌O157：H7。
- 罗中捷周卓晟郝春慧郭寅生刘红艳郑华英黄正
- 关键词：大肠杆菌O157生态学酶联免疫吸附测定微生态
- 内毒素多克隆抗体制备及其在ELISA中应用
- 2012年
- 目的制备抗大肠杆菌精制内毒素的兔多克隆抗体并建立检测内毒素的间接竞争性酶联免疫吸附试验(ELISA)方法。方法大肠杆菌精制内毒素作为免疫原,采用逐渐加强免疫剂量的方法免疫家兔,制备抗体,将抗体用于ELISA检测精制内毒素;并与复合型内毒素进行反应。结果随着免疫次数增加,抗血清效价逐渐提高,最后一次免疫后血清效价达到1∶6 400;在包被抗原浓度100μg/mL和兔多抗稀释比1:500最佳使用条件下建立间接竞争性ELISA,内毒素浓度与吸光度(A)值成反比例关系,线性回归方程为:y=-0.1 ln(x)+0.765,检测最低内毒素浓度为50 ng/mL;兔血清与复合型内毒素反应效价为1∶16 000。结论成功制备出抗精制内毒素兔多克隆抗体,且能与复合型内毒素反应。
- 周卓晟罗中捷郝春慧郭寅生刘红艳黄正
- 关键词：内毒素多克隆抗体
- EDTA提高Microtox检测有机化合物毒性灵敏度的研究被引量：1
- 2011年
- [目的]改善明亮发光杆菌细胞通透性、提高Microtox对有机污染物生物毒性检测的灵敏度。[方法]以乙二胺四乙酸二钠(EDTA-Na2)处理明亮发光杆菌,用疏水荧光探针N-苯基-1-萘胺(NPN)检测明亮发光杆菌通透性的改变,应用发光细菌急性毒性检测技术(Microtox)检测有机化合物在通透性改变前后的50%发光抑制浓度(EC50)。[结果]加入EDTA后菌体对NPN的吸收系数明显增加,40mM的ED-TA可使明亮发光杆菌对NPN的吸收系数增加47.7%。未经EDTA处理时,1,10-二氮杂菲、1,4-对位苯醌、双酚A、4-异丙基苯酚经Microtox检测的EC50值分别为181.2、0.071、37.6、0.79mg/L,处理后分别降为115.1、0.054、26.24、0.603mg/L。[结论]EDTA可以提高明亮发光杆菌对有机化合物的通透性,使Microtox检测生物毒性的灵敏度提高。
- 郝春慧石长华郭寅生刘红艳黄正
- 关键词：发光细菌通透性MICROTOXEC50
- ELISA与免疫传感器在大肠杆菌内毒素检测中的应用被引量：1
- 2011年
- 目的:研究两种基于免疫反应和电化学的简便、灵敏、特异检测内毒素的新方法。方法:应用ELISA建立PMB-ET-ELISA法和免疫传感器法对大肠杆菌内毒素进行分析,并对两种方法检测范围和最低检测限进行分析和比较。结果:ELISA方法检测精制内毒素范围为1μg/ml～1 mg/ml,检测大肠杆菌O157:H7范围为105 CFU/ml～109 CFU/ml,相当于内毒素190μg/ml～2918μg/ml。免疫生物传感器法检测精制内毒素范围为1μg/ml～1 mg/ml;检测大肠杆菌O157:H7范围为106 CFU/ml～109 CFU/ml,相当于内毒素288μg/ml～1416μg/ml。结论:建立的ELISA和免疫传感器两种检测内毒素新方法有效、稳定、可用。
- 郭寅生郝春慧刘红艳黄正
- 关键词：ELISA免疫传感器大肠杆菌内毒素
