胡阿勇
- 作品数:17 被引量:64H指数:3
- 供职机构:河南科技大学更多>>
- 发文基金:河南省自然科学基金洛阳市科技攻关计划项目博士科研启动基金更多>>
- 相关领域:农业科学医药卫生生物学更多>>
- 鼠伤寒沙门菌SL1344株cAMP受体蛋白基因缺失株的构建及其生物学特性被引量:8
- 2011年
- 通过自杀性质粒介导的细菌同源重组技术,构建鼠伤寒沙门菌SL1344株的crp基因缺失疫苗候选菌株,并对其生物学特性进行初步研究。首先构建含缺失321bp crp基因的重组自杀性质粒pREΔcrp,然后利用重组自杀性质粒介导的等位基因交换技术,两步法筛选SL1344的Δcrp缺失株,用PCR鉴定结果表明该缺失株构建成功。生物学特性研究发现,缺失株ΔcrpSL1344保留了亲本菌株SL1344的血清型1,4,5,12:i:1,2,且能够稳定遗传缺失321bp的crp基因;但是,与亲本株SL1344相比,其生化特性发生明显改变,生长速度明显减慢。缺失株ΔcrpSL1344口服感染1日龄雏鸡的LD50为7.40×109 CFU,毒力较亲本株SL1344降低32 456倍。以上研究结果表明,SL1344株crp基因缺失株构建成功,且遗传稳定,毒力明显降低,为进一步将其开发为鼠伤寒沙门菌弱毒疫苗候选菌株奠定基础。
- 廖成水程相朝赵战勤张春杰李银聚吴庭才郁川王晓利胡阿勇
- 关键词:鼠伤寒沙门菌CRP
- 河南省鸡源沙门菌新近流行株的分离鉴定及其耐药性分析被引量:14
- 2010年
- 旨在了解河南省鸡沙门菌临床分离株血清型分布及药物敏感情况。从河南省各地区养鸡场共采集了沙门菌可疑病料617份,按常规方法进行分离,经生化、PCR及血清型鉴定,共分离出98株鸡源沙门菌,其中血清型定型82株,主要为肠炎沙门菌(62.24%)、鸡白痢沙门菌(18.37%)。进一步Kindy-Bauer(KB)法检测分离菌株对22种药物敏感性表明,所有分离菌株对多粘菌素B、阿米卡星、庆大霉素、萘啶酸较为敏感,对阿齐霉素和氨苄西林耐药率在60.00%~70.00%之间,对红霉素和青霉素表现为极高的耐药性,耐药率高达100.00%。三重以上耐药菌株高达96.94%,七耐以上的菌株为56.12%,耐药最多的菌株可耐18种抗生素。由此可见,河南省禽类沙门菌的感染流行主要以肠炎沙门菌和鸡白痢沙门菌为主,多重耐药十分严重,严重影响了禽类沙门菌病的诊治与预防。
- 廖成水程相朝吴庭才张春杰李银聚王晓利胡阿勇
- 关键词:沙门菌药敏试验
- 鸡源致病性沙门氏菌新近分离株的耐药性与耐药基因被引量:41
- 2011年
- 为了了解河南省鸡源沙门氏菌新近分离株的药物敏感性和耐药基因的存在情况,为进一步研究细菌耐药的分子机制和新型抗菌药物的研制提供资料,利用K-B法检测了98株鸡源沙门氏菌对22种药物的敏感性,采用PCR方法检测了13种常见耐药基因在分离株中的分布情况。结果显示,所有菌株对红霉素、青霉素、阿齐霉素和氨苄西林的耐药率均在60%~100%之间。三重以上耐药的菌株高达96.94%,七重以上耐药的菌株为56.12%,耐药最多的菌株可耐受18种抗生素。从13种常见耐药基因中扩增到3种四环素类、2种氨基糖苷类、2种β-内酰胺类、1种氯霉素类和3种磺胺类耐药基因。研究表明,沙门氏菌极易产生耐药性,耐药基因广泛存在于耐药菌株中,但耐药表型与耐药基因之间无绝对相关性。
- 廖成水程相朝张春杰李银聚吴庭才李小康王晓利胡阿勇
- 关键词:沙门氏菌药敏试验耐药基因
- 鸡IL-5基因的克隆表达及其重组鸡痘病毒的构建
- 白介素-5(interleukin-5,IL-5)是由 Takatsu于1980年发现的一种具有免疫调节功能的生物活性介质,其能诱导 B细胞的增殖分化,促进成熟的 B细胞分泌 IgM和活化的粘膜 B细胞分泌合成 IgA,...
- 胡阿勇
- 关键词:鸡痘病毒克隆表达多克隆抗体重组质粒
- 减毒沙门氏菌介导的apo-tPA融合基因在鸡体组织的分布与表达
- 利用减毒沙门氏菌作为携带外源基因的活载体是目前研究的热点。转基因鸡的研究由于缺乏有效的外源基因导入手段,进展一直不尽人意。鉴于转基因鸡生物反应器生产药用蛋白具有生产周期短、产量大、浓度高、成本低等优点,目前研究依然炙热并...
- 王晓利李银聚程相朝张春杰吴庭才廖成水胡阿勇
- 文献传递
- 河南省鸡源沙门氏菌新近流行株的分离鉴定及其耐药性分析
- 旨在了解河南省鸡沙门氏菌临床分离株血清型分布及药物敏感情况。从河南省各地区养鸡场共采集了沙门氏菌可疑病料617份,按常规方法进行分离,经生化、PCR及血清型鉴定,共分离出98株鸡源沙门氏菌,其中血清型定型82株,主要为肠...
- 廖成水程相朝吴庭才张春杰李银聚王晓利胡阿勇
- 关键词:沙门氏菌药敏试验
- 文献传递
- 减毒沙门氏菌介导的apo-tPA融合基因在鸡体组织的分布与表达
- 探讨以减毒沙门氏菌为载体,介导外源基因在动物体内的组织分布和表达的可行性。将编码人t-PA功能区的基因片段与鸡VLDLy组装前体apo-B100基因融合,定向克隆到荧光蛋白表达载体SV40启动子下游,构建apo-tPA-...
- 王晓利李银聚程相朝张春杰吴庭才廖成水胡阿勇
- 关键词:减毒沙门氏菌
- 文献传递
- 鸡白介素5基因的克隆分析
- 白细胞介素5(Interleukin-5,IL-5)是由Takatsu于1980年发现的一种具有免疫调节功能的生物活性介质,在机体免疫功能中起着十分重要的作用。它主要由活化的T细胞产生,可以调控嗜酸性粒细胞的产生、活化和...
- 胡阿勇张春杰李银聚程相朝吴庭才张旭廖成水王小丽
- 文献传递
- 减毒沙门菌介导的apo-tPA融合基因在鸡体组织的分布与表达被引量:2
- 2011年
- 探讨以减毒沙门菌为载体,介导外源基因在动物体内的组织分布和表达的可行性。将编码人t-PA功能区的基因片段与鸡VLDLy组装前体apo-B100基因融合,定向克隆到荧光蛋白表达载体SV40启动子下游,构建pApo-tPA-GFP表达质粒。应用电转化法将pApo-tPA-GFP表达质粒转化减毒沙门菌,阳性减毒沙门菌经翅下静脉注入鸡体内,分别于注射后第1、2、3、4、5周随机剖检试验用鸡,无菌取内脏器官,经组织细菌培养、RT-PCR检测各脏器中基因分布,涂片荧光镜检基因表达情况。结果显示,在肝脏、脾脏和十二指肠均分离到沙门菌,PCR鉴定均为减毒沙门菌载体;RT-PCR检测在肝脏、脾脏、十二指肠中有目的基因存在;荧光检测在肝脏、脾脏中有荧光蛋白。结果表明,减毒沙门氏菌能够作为载体将目的基因有效的转入到动物体内,这一方法有望为动物转基因提供便捷、有效的途径。
- 王晓利李银聚程相朝张春杰吴庭才廖成水胡阿勇
- 关键词:减毒沙门菌T-PA表达质粒
- 鸡白细胞介素5基因的克隆与原核表达被引量:1
- 2010年
- 根据GenBank中登录的鸡白细胞介素5(IL-5)基因序列,设计并合成1对特异性引物,首次从ConA激活的鸡脾淋巴细胞中扩增出了鸡IL-5基因cDNA。序列分析表明,该基因全长381bp,编码126个氨基酸,蛋白质分子质量约14.63ku,包括22个氨基酸长度的信号肽。与其他哺乳动物IL-5的氨基酸同源性低于25%,显示较强的种属特异性。但该蛋白的三维结构与人IL-5蛋白结构相似,主要由4个α螺旋构成。进而构建了此基因的原核表达载体pET-28a-IL-5,并在大肠杆菌Rosetta(DE3)中通过IPTG的诱导成功实现了表达,为进一步研究禽IL-5的结构和生物学功能奠定了良好的基础。
- 胡阿勇张春杰李银聚程相朝吴庭才张旭
- 关键词:克隆原核表达