李安明
- 作品数:11 被引量:41H指数:3
- 供职机构:孝感学院生命科学技术学院更多>>
- 发文基金:湖北省自然科学基金更多>>
- 相关领域:生物学轻工技术与工程农业科学环境科学与工程更多>>
- 转SrPCS2烟草的获得及Cd抗性评价被引量:1
- 2012年
- 由已克隆得到的长喙田菁(Sesbania rostrata)植物螯合肽合成酶SrPCS2编码177个氨基酸,以pHAN-NIBAL及pART27为基础,构建了CaMV35S启动子驱动的SrPCS2基因植物表达载体pAM23,采用电击转化方法将pAM23导入根癌农杆菌EHA105,并用该菌株对烟草进行了转化,Northern-blot分析结果表明得到了转录该基因的烟草,但转录该基因的烟草没有提高对Cd的抗性。
- 李安明李德华邓青云汪宜宇
- 关键词:植物表达载体抗性
- 植物螯合肽合成酶的研究进展被引量:6
- 2011年
- 植物螯合肽(phytochelatins,PCs)在植物解除重金属的毒性方面具有重要作用,其结构为(γ-Glu-Cys)n-Gly(n=2~11),它不是基因的编码产物,而是在植物螯合肽合成酶(phytochelatin synthase,PCS)的催化下以谷胱甘肽(glutathione,GSH)为底物合成的。PCS能够被金属离子激活,高度保守的N-端是催化结构域,而其C-端则是多变的。本文就PCS的结构,功能与催化机制以及PCS的最新研究进行了介绍。
- 李安明李德华邓青云汪宜宇
- 关键词:植物螯合肽
- 长喙田菁植物螯合肽合成酶PCS2的原核表达及纯化
- 2011年
- 为了获得纯化的长喙田菁(Sesbania rostrata)植物螯合肽合成酶PCS2,以原核表达载体pMAL-c2x为基础,构建了含有SrPCS2开放阅读框序列的原核表达载体pAM57,将其转化表达菌株BL21(DE3),对融合蛋白的表达进行了优化,通过Western blotting鉴定融合蛋白,并用麦芽糖亲和柱对MBP-SrPCS2融合蛋白进行纯化.结果表明:在15℃下,经0.2mmol/L IPTG诱导16h可以表达出可溶性的MBP-SrPCS2融合蛋白,通过亲和层析得到了纯化的MBP-SrPCS2融合蛋白,为进一步研究SrPCS2的活性及PCS的催化机制奠定了基础.
- 李安明邓青云李德华
- 关键词:原核表达纯化
- 内生细菌在植物修复中的应用被引量:6
- 2011年
- 环境污染是严重威胁人类健康的全球性问题,植物修复就是利用植物吸收、富集以除去环境中的污染物尤其是重金属污染物或者将其转变成毒性较低的物质的过程,植物修复以其廉价、安全与环境友好的特点,为重金属环境污染的修复提供了新的途径。内生细菌是植物组织内的正常菌群,它们的存在不会使植物出现可见的伤害或者功能的改变,在植物修复中具有重要的作用,它们可以促进植物生长、加速有机污染物降解、提高植物对重金属的抗性以及增加植物对重金属的吸收、促进重金属在植物体内的转运过程。对内生细菌在植物修复中的应用进行了综述,并对其研究前景进行了展望。
- 李安明邓青云李德华汪宜宇
- 关键词:植物修复环境污染内生细菌有机污染物重金属
- 试管母种高效快速扩接试验
- 2002年
- 进行试管母种扩接时 ,首先经无菌操作加入适量的无菌水 ,再用灭菌后的接种铲将试管母种的菌丝体捣碎 ,制成“液体菌种”进行扩接。该法操作简便 ,接种速度快 ,不仅成品率高 ,而且菌龄齐。
- 况启生张福云苏越李安明
- 关键词:接种
- 长喙田菁植物螯合肽合成酶基因在烟草中的表达被引量:2
- 2011年
- 以pHANNIBAL及pART27为基础,构建了CaMV35S启动子驱动的长喙田菁(Sesbania rostrata)植物螯合肽合成酶SrPCS1基因植物超量表达载体pAM22,采用电击转化方法将pAM22导入根癌农杆菌EHA105,并用该菌株对烟草进行了转化,通过抗生素筛选、PCR及Northern-blotting检测了目的基因的表达水平,并用ClustalW对SrPCS1进行了进化分析。结果表明:SrPCS1编码233个氨基酸与豆科植物PCSs的同源性较高;得到27株抗性植株,23株PCR阳性植株,Northern-blotting证明得到了超量表达该基因的烟草14株,但基因的表达水平不同。
- 李安明李德华邓青云汪宜宇
- 关键词:植物表达载体
- 长喙田菁植物螯合肽合成酶PCS1的原核表达及纯化
- 2011年
- 为了获得纯化的长喙田菁(Sesbania rostrata)植物螯合肽合成酶PCS1,本研究以原核表达载体pMAL-c2x为基础,构建了含有SrPCS1开放阅读框序列的原核表达载体pAM56,并将其转化大肠杆菌表达菌株BL21(DE3),对融合蛋白的表达进行了优化,通过Western blotting鉴定融合蛋白,且用麦芽糖亲和柱对MBP-SrPCS1融合蛋白进行了纯化。结果表明:在15℃下,经0.2 mmol/L IPTG诱导16 h表达出可溶性的MBP-SrPCS1融合蛋白,并通过亲和层析得到了纯化的MBP-SrPCS1融合蛋白,为进一步研究SrPCS1的活性及PCS的催化机制奠定了基础。
- 李安明邓青云李德华
- 关键词:原核表达纯化
- 孝感民间传统米酒菌株的分离、鉴定与筛选、培养被引量:25
- 2003年
- 孝感民间传统米酒菌种中除大量根霉外,其他微生物种类繁多,酶系丰富,生产的米酒清香醇厚,甜度适中。但美中不足的是菌种质量不易稳定。为此,我们将优质传统米酒菌种进行分离、鉴定,初步分离出36个种、属的微生物菌株,从中筛选出6个属中的13种优良菌株进行纯种培养。在此基础上,采用多菌种混合制曲,生产出酶系丰富、质量稳定的优质菌种。
- 况启生李安明戴余军盖益泉苏越张福云
- 关键词:孝感米酒混合制曲
- 长喙田菁SrPCS1的原核表达及多抗血清的制备
- 2011年
- 以原核表达载体pGEX-4T-1为基础,通过PCR、酶切与连接构建了含长喙田菁(Sesbania rostrata)植物螯合肽合成酶SrPCS1 cDNA开放阅读框序列的GST-SrPCS1原核表达载体pAM34,并将其转化表达菌株BL21(DE3),在28℃,用0.1 mmol/L IPTG诱导融合蛋白的表达,通过Western blotting鉴定融合蛋白,将SDS-PAGE分离得到的融合蛋白质免疫新西兰白兔,通过Western点杂交对免疫血清的效价进行检测。研究结果表明:通过大肠杆菌表达出GST-SrPCS1融合蛋白,免疫血清的效价为1∶2 000,制备的血清有较高的活性与特异性。
- 李安明邓青云李德华
- 关键词:原核表达融合蛋白抗血清
- 水——汽循环式高温灭菌锅被引量:1
- 2002年
- 水———汽循环式高温灭菌锅由底锅、锅体和冷凝器、集水器等构成。底锅分为干表面和湿表面二部分,加热时可产生过热的高温蒸汽进行灭菌,当蒸汽进入冷凝器底部时,则遇冷被冷凝成水,经回水管又流回底锅,水———汽在锅内闭路循环,直至冷凝器中水温达到90℃以上时为止,此时蒸汽则通过出气管外逸,吹动哨片发出响声报警。该锅的主要特点是升温快、温度高、灭菌效果好;结构简单,制作成本低;使用安全,节省能源。
- 况启生张福云苏越李安明况凡
- 关键词:灭菌效果