何正平
- 作品数：3 被引量：12H指数：3
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- 缺氧不同时间对人胚肺成纤维细胞RHO/RHO激酶信号通路及CTGF表达的影响被引量：4
- 2010年
- 目的观察不同时点低氧条件下,对人胚肺成纤维细胞(MRC-5)RHO/RHO激酶信号通路、结缔组织生长因子(CTGF)表达及Ⅰ型胶原(ColⅠ)合成的影响并探讨其可能机制。方法以MRC-5为研究对象,在常氧和缺氧(37℃、5%CO2、2%O2、93%N2)条件下分别孵育MRC-5细胞0、1.5、3、6、12、24、48、60h,用Westernblot法检测低氧诱导因子-1α(HIF-1α)、RhoA、ROCK1、CTGF蛋白的表达;RT-PCR技术检测HIF-1α、ROCK1、CTGF及ColⅠmRNA的表达;ELISA法测定细胞上清ColⅠ的表达。结果①体外培养的MRC-5细胞在常氧条件下表达基础水平的RhoA、ROCK1、CTGF,在低氧条件下RhoA、ROCK1、CTGF的蛋白表达水平增强(P<0.01),具有时间依赖性,以60h表达最高,且在低氧条件下,不同时点MRC-5细胞的RhoA、ROCK1蛋白表达水平与CTGF蛋白表达水平呈正相关关系。②与常氧对照组比较,低氧作用1.5h后即出现ROCK1、CTGF、ColⅠmRNA的表达上调(P<0.01),并随着低氧作用时间延长而逐渐增强,以60h表达最高;③与常氧对照组比,在低氧条件下,不同时点MRC-5细胞分泌ColⅠ均增加,以24h最高。结论缺氧不同时间均可上调细胞CTGF在mRNA和蛋白水平的表达、增加ColⅠ的合成,其机制可能部分是通过激活RHO/RHO激酶信号通路及上调HIF-1α的表达促发CTGF的高表达进而引发肺成纤维细胞细胞外基质表达增加等一系列促纤维化反应。
- 高艳谢敏何正平张旭郑家群
- 关键词：低氧人胚肺成纤维细胞低氧诱导因子-1ΑRHOA
- 低氧与致纤维化细胞因子的关系被引量：3
- 2009年
- 何正平谢敏
- 关键词：低氧致纤维化细胞因子
- 姜黄素对低氧下肺成纤维细胞增殖及Ⅰ型胶原表达的抑制作用研究被引量：5
- 2010年
- 目的探讨姜黄素对人胚肺成纤维细胞MRC-5在低氧下增殖和胶原表达中的作用及其机制。方法以人胚肺成纤维细胞MRC-5进行培养,随机分为常氧组(12 h,24 h,36 h)、低氧组(12 h,24 h,36 h)、低氧(12 h,24 h,36 h)+姜黄素(5μmol/L,10μmol/L,20μmol/L)组、低氧(36 h)+p38丝裂原激活蛋白激酶(p38 MAPK)阻断剂SB203580(10μmol/L)组和低氧(36 h)+三磷酸肌醇激酶/蛋白激酶B(PI3K/AKT)阻断剂LY-294002(10μmol/L)组。分别采用MTT法检测细胞增殖情况,Western blot检测MRC-5细胞中磷酸化AKT(p-AKT)、磷酸化P38(p-p38)和Ⅰ型胶原α1前体(pro-col1α1)蛋白的表达情况。结果姜黄素能抑制低氧下肺成纤维细胞的增殖,并且以低氧(36 h)+姜黄素20μmol/L组最为明显,SB203580和LY-294002能抑制MRC-5细胞增殖(P<0.05)。低氧下pro-col1α1、p-AKT、p-p38蛋白表达较常氧下增强(P<0.05),但姜黄素只对低氧下pro-col1α1、p-p38蛋白的表达有抑制,且呈剂量依赖性(P<0.05),姜黄素对p-AKT表达无明显影响(P>0.05)。结论低氧促进MRC-5细胞增殖及胶原表达可能是通过PI3K/AKT及p38 MAPK途径,姜黄素对低氧下MRC-5细胞增殖及I型胶原表达的抑制则可能是通过p38 MAPK实现。
- 何正平谢敏
- 关键词：低氧人胚肺成纤维细胞姜黄素
