陈璐 作品数:28 被引量:39 H指数:3 供职机构: 安徽医科大学 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 上海市科委科技攻关项目 安徽省自然科学基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 生物学 哲学宗教 文化科学 更多>>
HIV-1 HXB2株ta(tB41-101N)融合基因原核表达质粒的构建及表达 被引量:1 2009年 目的构建HIV-1HXB2株ta(tB41-101N)融合基因原核表达质粒,表达并纯化Ta(tB41-101N)融合蛋白,为进一步研究其免疫原性奠定基础。方法在HIV-1HXB2株天然Tat蛋白N-端添加Tat41-101位氨基酸(aa),采用PCR法从HIV-1HXB2株tat基因中扩增分别编码Tat41-101aa和Tat1-101aa的tat41-101和tat1-101两个基因片段,重叠延伸PCR法扩增其融合基因ta(tB41-101N),并构建其原核表达质粒pET32a-ta(tB41-101N),经双酶切及测序验证后,转化大肠杆菌BL21(DE3),IPTG诱导表达。融合蛋白经Ni2+-NTA柱亲和层析纯化后,进行SDS-PAGE、Westernblot及ELISA鉴定。结果重叠延伸PCR扩增出约500bp的ta(tB41-101N)融合基因,酶切及测序结果表明重组表达质粒pET32a-ta(tB41-101N)构建正确。SDS-PAGE分析显示,表达的Ta(tB41-101N)融合蛋白相对分子质量约为36000,约占菌体总蛋白的7%,纯化后纯度约为60%;Westernblot和ELISA分析显示,Ta(tB41-101N)融合蛋白与小鼠抗Tat单抗及抗-HIV阳性血清(抗Tat抗体阳性)均呈特异性阳性反应。结论已成功构建了HIV-1HXB2株ta(tB41-101N)融合基因原核表达质粒,并表达了其融合蛋白,该蛋白较好地保留了天然Tat蛋白的免疫反应性,为Tat新型疫苗的研究奠定了基础。 廖文婷 陈璐 曹洁 陈秋莉 王锦红 唐萍 庞强 黄德胜 潘卫关键词:HIV-1 TAT蛋白 原核表达 重叠延伸PCR 一种解烟酒毒的中药提取物及其制备方法和应用 本发明涉及一种解烟酒毒的中药提取物,所述的中药提取物由原料药鸡骨草和荷叶制备得到,所述的中药提取物是由鸡骨草与荷叶按比例为27:9.5提取的,其主要成分为总黄酮。本发明还涉及所述中药提取物在制备治疗和预防烟酒毒药物或食物... 黄宝康 郑承剑 张乃丹 秦路平 张巧艳 韩婷 陈璐 张小刚文献传递 一种抗疲劳的中药组合提取物及其制备方法和应用 本发明涉及一种抗疲劳的中药组合提取物,所述的中药组合提取物由以下重量份的原料药制备而得:刺五加、黄芪和明党参的比例为5:5:1。本发明还提供该中药组合提取物的制备方法及应用。本发明的中药组合提取物的主要组成成分为木脂素类... 黄宝康 季晓 陈璐 张乃丹 王晓钰文献传递 大学生强迫症状与认知灵活性、应对方式的关系研究 被引量:2 2020年 目的:探讨大学生强迫症状、认知灵活性和应对方式的关系,为大学生心理健康教育提供参考性依据.方法:采用强迫量表修订版(OCI-R)、认知灵活性问卷(CFI)、简易应对方式问卷(SCSQ)、焦虑自评量表(SAS)和贝克抑郁自评量表(BDI)对687名大学生进行调查.结果:①高强迫症状组和低强迫症状组在认知灵活性总分[(64.06±10.13)分vs(69.42±10.23)分]、可选择性[(41.23±8.38)分vs(44.01±7.95)分]、可控性[(22.83±3.93)分vs(25.41±4.07)分]、积极应对[(22.28±7.17)分vs(23.92±5.79)分]、消极应对[(11±4.37)分vs(9.19±4.22)分]、SAS[(46.84±9.8)分vs(37.85±9.09)分]和BDI[(12.57±8.83)分vs(5.94±7.28)分]上差异有统计学意义(t=-5.192,P<0.001;t=-3.354,P=0.001;t=-6.375,P<0.001;t=-2.482,P=0.013;t=4.163,P<0.001;t=9.379,P<0.001;t=8.087,P<0.001);②认知灵活性总分、可选择性、可控性及积极应对与强迫症状总分均呈负相关(r=-0.199,r=-0.121,r=-0.263,r=-0.130,P<0.01);消极应对与强迫症状呈正相关(r=0.163,P<0.01);③认知灵活性的可控性维度、消极应对和积极应对对强迫症状有预测力(β=-0.208,0.096,-0.087).结论:认知灵活性水平越高、多采用积极应对方式、较少使用消极应对方式的大学生强迫症状越少. 睢鹏娇 朱春燕 许飞飞 王雪杰 陈璐 余凤琼 蔡翥关键词:大学生 强迫症状 一种解烟酒毒的中药提取物及其制备方法和应用 本发明涉及一种解烟酒毒的中药提取物,所述的中药提取物由原料药鸡骨草和荷叶制备得到,所述的中药提取物是由鸡骨草与荷叶按比例为27:9.5提取的,其主要成分为总黄酮。本发明还涉及所述中药提取物在制备治疗和预防烟酒毒药物或食物... 黄宝康 郑承剑 张乃丹 秦路平 张巧艳 韩婷 陈璐 张小刚文献传递 HIV-1 HXB2株Tat蛋白在大肠杆菌中的分段表达及免疫原性分析 被引量:1 2008年 目的研究对人类免疫缺陷病毒Ⅰ型HXB2株调控蛋白Tat原核表达产生影响的区域和Tat蛋白重要的抗原表位。方法用PCR方法获得Tat(1-48aa)、Tat(22-72aa)和Tat(38-101aa)DNA片段,构建其原核表达质粒pET32a-Tat(1-48aa)、pET32a-Tat(22-72aa)和pET32a-Tat(38-101aa),并转入E.coliBL21(DE3)中进行诱导表达及纯化,SDS-PAGE鉴定表达及纯化产物。采用间接ELISA方法用兔抗pET32a-Tat抗血清对三种肽段进行免疫原性分析。结果成功构建了pET32a-Tat(1-48aa)、pET32a-Tat(22-72aa)和pET32a-Tat(38-101aa)质粒,分别表达出相对分子质量(Mr)为23×103、23×103和25×103的融合肽段,其浓度分别为4.26、3.35和5.11mg/ml。间接ELISA结果表明三种融合肽段与兔抗pET32a-Tat抗血清均呈特异性结合反应,其抗体滴度分别为1:128000、1:32000、1:64000,而抗血清与pET32a蛋白仅有较弱结合。结论半胱氨酸富集区(22-37位氨基酸)对Tat蛋白的原核表达有较显著影响;Tat蛋白的N端区、碱性区和C端区是其重要的抗原表位,其中N端区的免疫原性最强。 陈璐 潘卫 曹洁 卢海妹 何俊 蒋少华 唐萍 李存枚 廖文婷 邓松华纳米八号膏对烧伤创面愈合的影响和初步机制的研究 一、背景八号膏是安医大一附院研制的一种中药复方烧伤膏,在治疗烧伤创面时疗效显著,是临床治疗烧烫伤的一种常用药。但是八号膏存在其制作方法较为复杂,而且中药材粉末颗粒较大,纱布上的药膏涂抹不均的情况。纳米技术能将物质纳米化成... 陈璐关键词:烧伤 伤口愈合 网络药理学 超低温保存尸体睑板及结膜移植初步探讨 1998年 超低温保存尸体睑板及结膜移植初步探讨吴邦安陶黎明陈璐李盈龙安徽医科大学附院眼科(230022)我们于1996.2~12采用超低温冷藏尸体眼睑,先后做6例睑板带结膜移植修复睑缺损患者,取得初步疗效。报告如下:临床病例与方法本组6例患者,外伤引起上睑大... 吴邦安 陶黎明 陈璐 李盈龙关键词:结膜移植 人类免疫缺陷病毒1型HXB2株Tat突变体的构建、原核表达及免疫原性分析 2009年 目的构建HIV一1HXB2株Tat基因半胱氨酸富集区3’末端移位突变体,经原核表达和纯化,分析该突变体蛋白(Tat—cct)的免疫原性。方法用PCR方法将HIV一1HXB2株Tat基因的半胱氨酸富集区(64~111位核苷酸)移位至Tat基因的3’末端,获得其突变体DNA序列,并构建其原核表达质粒pET32a—Tat—oct,转人大肠埃希菌E.coliBL21(DE3)中进行诱导表达及纯化。以Tat—cct融合表达蛋白免疫BALB/c小鼠,ELISA方法对该抗血清进行免疫原性检测分析。结果pET32aTat—cct重组质粒可在E.coliBI。21(DE3)中诱导表达,纯化后其融合蛋白相对分子质量约为31000。Tat—cct重组蛋白免疫小鼠诱导产生的抗体滴度为1:1600,该抗体与Tat—cot蛋白和Tat蛋白(1~101位氨基酸)均呈特异性结合反应。结论Tat突变体重组蛋白Tat—cct能在大肠埃希菌中有效表达,并较好保留其免疫原性,为HIV一1Tat疫苗的基础研究提供了有价值的实验结论。 李存枚 邓松华 曹洁 王锦红 陈璐 黄德圣 潘卫关键词:HIV-1 基因产物 TAT 重组蛋白质类 免疫 自闭谱系障碍物理干预的研究进展 被引量:2 2020年 自闭谱系障碍(autistic spectrum disorder,ASD)的治疗一直是世界性难题。近期研究表明物理干预可能是ASD有效的治疗方法之一。ASD的物理干预主要包括经颅磁刺激(transcranial magnetic Stimulation,TMS)和经颅直流电刺激(transcranial direct current stimulation,tDCS)。本文主要总结了近些年(2015年及以后)ASD物理干预的相关研究,介绍了物理干预ASD的原理及作用机制,并重点探讨不同刺激部位对ASD患者的临床疗效。 杨婷婷 李丹丹 陈璐 朱春燕关键词:经颅磁刺激