王瑾瑜 作品数:13 被引量:30 H指数:4 供职机构: 清华大学 更多>> 发文基金: 北京市自然科学基金 北京市教育委员会共建项目 长江学者和创新团队发展计划 更多>> 相关领域: 农业科学 生物学 理学 电子电信 更多>>
荧光漂白后恢复实验图像处理方法及装置 本发明提供一种荧光漂白后恢复实验图像处理方法及装置,其中方法包括:接收输入的待分析样本图像,所述待分析样本图像中包括至少一个漂白结构;根据用户输入确定所述待分析样本图像的类型;在所述待分析样本图像为位移样本的情况下,对所... 曹慧珍 王文娟 王瑾瑜颐和园古桑树的组织培养与快速繁殖 被引量:4 2011年 以北京颐和园古桑树为外植体进行组织培养,取桑树当年新生嫩茎切段为外植体进行,其中不定芽启动培养基为MS+6-BA0.5mg/L+NAA0.1mg/L+PVP0.2g/L;将无菌苗接到最适分化培养基MS+6-BA0.8mg/L+NAA0.1mg/L+PVP0.2g/L上,组培苗分化率高;不定根最适诱导培养基为:1/2MS+NAA0.5mg/L+PVP0.2g/L,生根率达100%。组培苗移栽成活率达95%。 郑广顺 王瑾瑜 戴全胜 车晓航 李睿 陈玉珍 卢存福关键词:茎段 盐胁迫下沙冬青细胞端粒酶活性的变化与DNA稳定性的关系 被引量:9 2014年 沙冬青(Ammopiptanthus mongolicus)是亚洲中部荒漠地区的常绿阔叶灌木,是古老的第三纪孑遗植物,具有极强的抗逆能力。旨在探究盐胁迫下沙冬青细胞端粒酶活性变化与染色体DNA稳定性的关系。结果表明,在100 mmol/L NaCl的低浓度盐胁迫处理下,随着处理时间的增加,端粒酶活性没有增加,未出现明显的DNA降解现象;当在500 mmol/L高浓度盐胁迫时,处理的初期端粒酶活性迅速的增加,但随着处理时间的延长,端粒酶活性下降,此时DNA未明显降解;当移除NaCl胁迫,端粒酶活性增加1.4倍,DNA保持稳定。因此推测,在盐胁迫下,沙冬青细胞端粒酶活性的维持对避免细胞遭受不可逆损伤,保持染色体DNA稳定性具有一定的作用。 张徐俞 王瑾瑜 郑广顺 张俊琦 卢存福关键词:沙冬青 盐胁迫 端粒酶 DNA损伤 盐胁迫下胡杨和合作杨悬浮细胞端粒酶与抵御氧化损伤的关系 被引量:6 2017年 胡杨是我国西北干旱盐碱荒漠和戈壁地带唯一能形成森林的高大乔木树种,具有较高抗盐性。旨在探究盐胁迫下细胞端粒酶活性变化与氧化损伤的关系,以抗盐的胡杨和盐敏感的合作杨悬浮细胞为材料,检测了Na Cl盐胁迫条件下胡杨和合作杨细胞生长、超氧阴离子自由基与丙二醛含量以及端粒酶活性的变化。结果表明,在正常生长条件下,胡杨和合作杨细胞符合S型生长曲线,且合作杨细胞的生长量高于胡杨细胞;在盐胁迫<100 mmol/L时胡杨在培养7 d内细胞活力高于对照(0 mmol/L),即使盐浓度达到300 mmol/L时15 d胡杨细胞依然保持一定的细胞活力,而较低盐处理对合作杨细胞活力影响即较大,当盐浓度达到300 mmol/L时合作杨在第5 d细胞活力已接近零;与合作杨相比,低浓度盐胁迫(100 mmol/L)使胡杨细胞内超氧阴离子自由基含量增加,端粒酶活性较高,而合作杨丙二醛含量显著增加;低浓度(<20 mmol/L)H2O2诱导了胡杨细胞端粒酶活性,合作杨的变化则不显著,但高浓度(>200 mmol/L)Na Cl和高浓度(50 mmol/L)H_2O_2可能造成了胡杨和合作杨氧化损伤,端粒酶活性降低。抗盐性强的胡杨细胞端粒酶对抵御细胞内氧化损伤具有一定作用。 吴晓飞 王瑾瑜 张徐俞 孙玉萍 陈玉珍 卢存福关键词:合作杨 盐胁迫 端粒酶 基于全内反射显微镜的荧光漂白后恢复实验方法建立 2022年 发展了基于全内反射显微镜的荧光漂白后恢复(TIR/FRAP)的成像方法,该方法通过全内反射显微镜(TIRFM)和激光扫描共聚焦显微镜(LSCM)的联合使用,将全内反射荧光成像和荧光漂白后恢复技术相结合,可广泛用于研究质膜附近分子动力学特征。LSCM对任意感兴趣区域(ROI)执行光漂白,TIRFM特异性采集漂白前后细胞质膜附近的荧光信号,通过NIS-Elements软件程序实现显微镜模式间的自动快速切换。相比目前通用的基于全内反射的光漂白方法,这种方法具备灵活可变漂白区域的优势,可以满足大多数的基于全内反射的光漂白后恢复实验需求。同时,这种技术方法也为开发TIRFM或LSCM与其他设备的联用方法奠定了实践基础。 曹慧珍 王瑾瑜 王文娟关键词:自动切换 感兴趣区域 四种树木端粒酶活性与树龄及叶位的相关性 被引量:4 2014年 为探究端粒酶活性与树龄以及叶位是否存在一定的关系,应用TRAP法对不同年龄的油松、银杏、楸树、国槐叶片及油松和银杏同一棵树不同叶位的叶片进行端粒酶活性的测定。结果表明,油松端粒酶活性同树龄无明确的相关性,而楸树、国槐的端粒酶活性随着树龄增加而表现为增加的趋势。端粒酶活性与叶位相关,越靠近顶端的叶片端粒酶活性较高,而靠近下端的叶片端粒酶活性较低。 张徐俞 王瑾瑜 郑广顺 张俊琦 卢存福关键词:树龄 端粒 端粒酶 叶位 用改进的TRAP法测定树木端粒酶活性 被引量:11 2012年 TRAP法是一种常用的测定端粒酶活性的方法,但并不太适合测定木本植物的端粒酶活性.因此以油松针叶为实验材料,对TRAP法进行改进.参照前人的研究通过对比实验证明,在端粒酶提取过程中将PEG8000加入上清液,可获得高效的端粒酶.在此基础上,对PCR先导引选择TS、模板浓度选择100 ng,最终获得油松针叶高质量的端粒酶PCR产物.应用SYBR Green I替代银染液对电泳凝胶进行染色,获得条带清晰、重复性好的电泳结果.通过对油松针叶、银杏叶片、胡杨愈伤组织、沙冬青悬浮细胞等4种木本植物实验材料进行测定,证明该改进的技术体系可能是适合于木本植物端粒酶活性测定的稳定的、灵敏度高的可行方法. 王瑾瑜 张徐俞 王雅群 卢存福 陈玉珍关键词:端粒酶活性 TRAP SYBR 新创企业的知识管理 王瑾瑜关键词:知识 知识管理 激光扫描共聚焦显微镜活细胞成像方法优化 被引量:4 2022年 激光扫描共聚焦显微镜可用于固定样品和活细胞样品的成像,近年来得到了广泛的应用。本文介绍了激光扫描共聚焦显微镜的基本原理及其在活细胞成像中的应用,并以FV10-ASW Viewer4.2软件为例,从扫描速度、分辨率、降噪、光电倍增调节、多参数协同优化、成像质量评估、图像后期处理等多个角度总结了激光扫描共聚焦活细胞成像系统的方法优化和推荐参数设置。本文的工作可以为活细胞实验提供一定参考。 张彦丽 刘冰钰 陈亚兰 王瑾瑜 王瑾瑜关键词:激光扫描共聚焦显微镜 活细胞成像 参数优化 沙冬青端粒酶逆转录酶基因(AmTERT)克隆及表达分析 被引量:5 2018年 利用分段克隆法从沙冬青中得到一条全长为3 459 bp的端粒酶逆转录酶基因(telomerase reverse transcriptase of Ammopiptanthus mongolicus,AmTERT),并对AmTERT进行了系统的生物信息学分析。结果表明,AmTERT编码1 153个氨基酸,蛋白相对分子质量为132.52 k Da,等电点为9.49,属于稳定性较差的亲水性蛋白。未发现跨膜结构存在,定位预测结果显示其在细胞质膜及线粒体上有定位,同时发现其有单分型(NLS-monopartite)和双分型(NLS-bipartite)细胞核定位信号,而在原生质体中的瞬时表达实验结果表明AmTERT定位在细胞核中。该氨基酸序列共有147个潜在磷酸化位点,氨基酸比对结果显示,AmTERT与大豆TERT相似性高达75%。另外,AmTERT蛋白具有端粒酶逆转录酶的保守功能结构域(TRBD及RT),并存在潜在的Akt激酶磷酸化位点,暗示其可能通过磷酸化作用发挥调节自身或其他基因功能的作用。荧光定量PCR结果显示,AmTERT在根中表达量较茎和叶组织都高,盐、干旱、热及低温胁迫均能导致沙冬青幼苗根和叶中AmTERT的表达量升高,说明植物细胞端粒酶可能和动物细胞一样具有应激保护功能。综上,研究结果表明,沙冬青端粒酶可能存在非端粒功能。 孙丽春 杨颖 于婷乔 孙玉萍 高海波 王瑾瑜 门璟煜 卢存福 陈玉珍关键词:沙冬青 端粒酶 非生物胁迫