李铁臣
- 作品数：62 被引量：173H指数：7
- 供职机构：皖南医学院更多>>
- 发文基金：安徽省高校省级自然科学研究项目安徽高校省级自然科学研究基金芜湖市科技计划重点项目更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学文化科学自动化与计算机技术更多>>
- 胃癌中p16蛋白表达和p16基因启动子甲基化的研究被引量：2
- 2007年
- 目的:探讨胃癌中p16基因的失活机制。方法:采用免疫组织化学SP方法检测40例胃癌组织和43例正常胃黏膜组织中p16蛋白的表达情况,采用甲基化特异性PCR(MSP)方法研究40例胃癌组织和35例正常胃黏膜组织p16基因启动子的甲基化状况。结果:23例胃癌组织的p16基因启动子发生了甲基化,甲基化发生率为58%,正常胃黏膜组织中未发现甲基化,两组间比较差异有显著性(P<0.01)。31例胃癌组织中的p16蛋白表达阴性,正常胃黏膜组织中6例表达阴性,两组间差异有显著性(P<0.01)。胃癌组织中,MSP方法和免疫组织化学方法结果间差异无显著性(P>0.05)。结论:胃癌的发生与p16基因失活关系密切,启动子甲基化可能抑制了蛋白的表达,这种途径可能是胃癌中p16基因失活的重要机制。
- 李铁臣蒋大平卢林明赵国海
- 关键词：胃肿瘤P16基因甲基化
- 妊娠期肝内胆汁淤积症中ABCB4基因外显子12突变的研究被引量：2
- 2007年
- 目的探讨ABCB4基因外显子12的突变与妊娠期肝内胆汁淤积症(ICP)发病的关系。方法从31名ICP患者外周血标本中提取出基因组DNA,聚合酶链反应(PCR)扩增ABCB4基因外显子12,PCR产物经DNA序列测定检测突变情况。结果31名ICP患者均扩增出ABCB4基因外显子12的靶基因片断,未见外显子12的缺失,随机挑选20例标本测定外显子12的DNA序列,未发现突变。结论ABCB4基因外显子12的突变与中国皖南地区的ICP发生无关或关联很小,皖南地区ICP患者中可能存在其他的ABCB4基因突变热点。ABCB4基因的突变与中国人ICP发病的相关性仍应进行更大样本量的研究和更多外显子的筛查。
- 宫磊朱延玲胡卫华孔丽娜李铁臣
- 关键词：妊娠期肝内胆汁淤积症聚合酶链反应DNA测序
- 不同RT-PCR方法学的探讨被引量：2
- 2008年
- 目的:探讨微量RNA标本的RT-PCR方法。方法:采集13例新生大鼠脊髓标本,提取RNA,分别稀释至1μg/μl、1ng/μl和1 pg/μl,分别以两步法RT-PCR、Promega公司和Qiagen公司一步法RT-PCR试剂盒,扩增β-actin基因,经1.5%琼脂糖凝胶电泳,溴化乙锭染色,紫外透射仪下观察分析。结果:浓度为1μg/μl和1ng/μl的标本,三种方法均出现了目标带,而浓度为1 pg/μl的标本,两步法RT- PCR、Promega公司和Qiagen公司一步法RT-PCR试剂盒的阳性率分别为85%、77%和100%。结论:一步法敏感性高于两步法,微量RNA标本以采用Qiagen公司的一步法试剂盒进行RT-PCR实验为好。
- 李铁臣曹宏伟张艳江潇汪萌芽
- 关键词：一步法RT-PCR
- 样本保存液和超低温冰箱保存对RT-PCR实验结果的影响被引量：1
- 2013年
- 目的:通过对两种新鲜组织保存方法的比较,探讨一种简便、有效的用于抽提RNA的保存新鲜组织的方法。方法:采集人新鲜子宫内膜组织标本38例,其中26例组织用样本保存液(RNAstore Reagent)常温保存,12例组织冻存于-80℃冰箱,1周后提取总RNA。β-Actin基因mRNA的表达水平通过两种方法检测。一种经1.0%琼脂糖凝胶电泳,溴化乙锭染色,紫外透射仪下观察分析,另一种是使用ABI PRISM 7500 PCR仪进行荧光定量PCR检测。比较两组间β-Actin基因的光密度值和平均CT值的差异。结果:两种方法保存的新鲜组织标本均出现305 bp的目标带。OD值分别为2 368.24±678.01和2 493.35±696.181,平均CT值分别为13.64±3.31和14.08±1.57,两组之间无显著性差异(P>0.05)。结论:在没有超低温冰箱的情况下,样本保存液(RNAstore Reagent)可以用来保存新鲜组织样本。
- 王静庞晓楠林爱琴李铁臣
- 关键词：子宫内膜组织RNA提取RT-PCR
- 子宫内膜异位症与nm23-H1基因之间关系的研究被引量：4
- 2005年
- 目的 研究nm2 3 H1基因在子宫内膜异位症发生中的作用。方法 采用免疫组化方法研究 2 5例子宫内膜异位症患者的病理组织和 2 2例正常子宫内膜组织中的nm2 3 H1蛋白的表达情况 ;用RT PCR方法研究 2 5例子宫内膜异位症患者的病理组织中nm2 3 H1基因的mRNA的表达情况。结果 子宫内膜异位症组中的nm2 3 H1蛋白表达水平明显低于对照组 (P <0 .0 1) ,子宫内膜异位症组中 ,nm2 3 H1蛋白表达与mRNA表达的结果无显著性差异 (P >0 .0 5 )。结论 nm2 3 H1基因在子宫内膜异位症的发生发展中起一定的作用。
- 孙青孔丽娜罗永红卢林明李铁臣
- 关键词：子宫内膜异位症NM23-H1基因NM23-H1蛋白免疫组化方法子宫内膜组织
- 习惯性流产与染色体随体联合被引量：1
- 1989年
- 引起习惯性流产的病因很多,近年来的研究表明,近端着丝粒染色体的随体联合与习惯性流产可能有关。一、习惯性流产与胚胎的染色体异常导致习惯性流产的病因除黄体功能不全、先天性子宫或宫颈发育异常等外。
- 李铁臣徐毓其
- 关键词：流产染色体病因
- ING4基因在肿瘤发生作用中的研究进展被引量：1
- 2007年
- ING4基因是近年来新发现的一种肿瘤抑制因子，可能通过抑制肿瘤血管增生、调节细胞周期、增强p53的活性、恢复细胞间的接触抑制等途径抑制肿瘤的生长。ING4基因在正常组织中表达丰富，而在肿瘤组织中表达下降，多种肿瘤细胞系中均发现其存在突变，但其在肿瘤发生、发展过程中的确切作用尚不清楚。
- 朱延玲李铁臣
- 关键词：ING4基因突变肿瘤发生
- 白血病患者外周血Flt3基因表达被引量：3
- 2006年
- 目的检测白血病患者外周血Flt3在不同类型白血病中的表达及分布情况,阐明Flt3的表达与疾病发生和发展的关系,与骨髓标本Flt3的表达作对照,确定检测外周血Flt3对白血病基因诊治的临床意义。方法采用RT-PCR方法分析34例白血病患者外周血及部分骨髓标本Flt3的表达。结果19例急性髓系白血病患者中16例阳性(84.2%),其中6例强阳性,1例化疗后完全缓解的M3患者Flt3表达阳性;6例急性淋巴细胞白血病中3例阳性(50%);5例慢性淋巴细胞白血病中2例(1例慢性期,1例急变期)阳性;2例骨髓异常综合征中1例阳性;2例急性混合细胞白血病均阳性。7例骨髓与外周血配对标本中阳性率差别无统计学意义。10例正常人表达均阴性。结论外周血可以替代骨髓作为检测Flt3表达;急非淋患者Flt3表达强弱与外周血白细胞数相关(P<0.05);Flt3表达可作为白血病基因诊断及微小残留病灶的检测标志。
- 赵敏赵丽李铁臣汪兴洪
- 关键词：FLT3基因表达白血病外周血
- 妊娠期肝内胆汁淤积症中MDR3基因表达的研究被引量：7
- 2008年
- 目的:探讨MDR3基因mRNA的表达与妊娠期肝内胆汁淤积症(ICP)发病的关系。方法:从36例ICP患者和38例正常孕妇外周血标本中抽提总RNA,反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)技术扩增MDR3基因和β-Actin基因,采用凝胶分析软件对RT-PCR产物进行半定量分析,比较两组间差异。结果:MDR3基因mRNA的表达在ICP患者和正常孕妇组间差异无统计学意义(P>0.05)。结论:MDR3基因mRNA的表达异常可能与中国皖南地区ICP发生无关或关联很小,中国人ICP的发生可能存在其他的发病机制。
- 宫磊孙青孔丽娜李铁臣
- 关键词：妊娠期肝内胆汁淤积症
- 乳腺癌组织中Maspin蛋白表达与maspin基因启动子甲基化关系的研究被引量：1
- 2009年
- 背景与目的:探讨乳腺癌与maspin基因失活之间的关系。材料与方法:采用免疫组织化学方法检测30例乳腺癌患者癌组织、癌近旁组织和癌远旁组织中Maspin蛋白的表达情况,用亚硫酸氢钠测序法检测乳腺癌组织maspin启动子CpG岛的甲基化情况。结果:乳腺癌组织中的Maspin蛋白表达明显低于癌近旁组织(P<0.05)和癌远旁组织(P<0.01),乳腺癌组织maspin基因启动子CpG岛甲基化率为98.72%。结论:乳腺癌的发生与maspin基因失活关系密切,启动子异常甲基化可能是maspin基因在乳腺癌中失活的重要途径。
- 方芳李铁臣吴佩
- 关键词：乳腺癌MASPIN基因甲基化
