李国新
- 作品数：180 被引量：540H指数：12
- 供职机构：中国农业科学院上海兽医研究所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金上海市科技兴农重点攻关项目上海市自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学医药卫生生物学更多>>
- 生长抑素与伪狂犬病毒gD基因的质粒DNA可使猪增重并诱导出gD抗体
- 为了构建一种重组质粒既能促进猪的生长又能预防伪狂犬病,本研究以猪外周血单个核细胞基因组为模板扩增猪生长抑素(somatostatin,SS)基因部分片段,构建了融合表达SS与猪伪狂犬病毒(PRV)gD的真核表达质粒pIS...
- 李国新仇华吉韩成刚韩凌霞周艳君陈艳李继昌童光志
- 关键词：核酸疫苗伪狂犬病GD基因
- 文献传递
- 使用CRISPR/Cas9构建互换gB的PRV重组病毒
- <正>伪狂犬病毒(Pseudorabies virus,PRV)可导致猪群出现神经系统疾病以及呼吸困难、繁殖障碍、高烧、奇痒等临床症状,在许多国家造成养猪业巨大损失。2011年来,变异伪狂犬病毒在许多Bartha-K61...
- 于之清童武黄勤峰郑浩梁超王涛武吉强李国新童光志
- 文献传递
- 伪狂犬病毒的microRNAs靶基因预测及功能鉴定
- 2016年
- 为研究猪伪狂犬病毒(Pseudorabies virus,PRV)编码的微小RNA(micro RNA,mi RNA)的功能,本研究通过生物信息学预测结合双荧光素酶报告系统验证方法,对病毒mi RNA(virus mi RNA,vmi RNA)进行靶基因鉴定。结果表明,PRV编码的prv-mi R-LLT1、prv-mi R-LLT7和prv-mi R-LLT9对病毒转录极早期基因IE180有抑制作用,prv-mi R-LLT7对参与调控病毒复制的UL48基因有抑制作用。初步研究表明这些vmi RNA可能在病毒感染过程中具有基因调控作用,本研究结果为进一步研究PRV vmi RNA在病毒复制、免疫逃避及潜伏感染过程中的功能奠定了基础。
- 刘飞童武郑浩李国新梁超郑旭晨田青童光志
- 关键词：伪狂犬病毒微小RNA靶基因
- 中国部分地区猪流感病毒的遗传演化分析
- 猪的呼吸道上皮细胞具有禽流感病毒和人流感病毒受体,具有感染禽流感和人流感病毒的能力,被认为是新型流感病毒产生的“混合器”和古老流感病毒长期在猪体内存在的“贮存器”。近年来,为了更好防控猪流感,我们开展了中国部分地区的猪流...
- 于海周艳君李国新闫丽萍陈宗艳童光志
- 关键词：猪流感流行病学调查病毒分离分子进化
- 文献传递
- H9N2亚型禽流感病毒细胞灭活疫苗的免疫效果评价被引量：3
- 2012年
- 由于经济和技术因素的制约,尚未有成功的禽流感细胞疫苗产品上市。为此,本研究在细胞扩增而来的含有H9亚型禽流感病毒(AIV)HA和NA基因的SH441HANAPR8(NS mutant)重组病毒里加入终浓度为0.1%的甲醛进行灭活。结果显示,37℃条件下灭活24h的效果最佳。灭活好的H9AIV SH441HANAPR8(NS mutant)与佐剂MontanideISA70VG乳化制备成灭活苗,以0.05、0.1、0.2、0.3mL/只的剂量,分别胸部肌肉注射免疫3周龄的SPF鸡,并于免疫后21d静脉感染A/Chicken/Shanghai/441/2009(H9N2)AIV。结果显示,该疫苗的最小免疫剂量为0.2mL。此外,研究还发现,当HI抗体效价≥25时,疫苗对鸡只的攻毒保护率达到100%。
- 刘建龙滕巧泱范钊胡涛李雪松李国新葛铭李泽君
- 关键词：H9N2亚型禽流感病毒最小免疫剂量免疫
- 非洲猪瘟病毒p30蛋白的原核表达及其多克隆抗体制备被引量：9
- 2020年
- 本研究利用PCR方法扩增非洲猪瘟病毒(ASFV)SY18株的结构蛋白CP204L基因,并将其克隆至原核表达载体pCold I,构建重组表达质粒pCold I-p30,并将其转化至E.coli BL21(DE3)感受态细胞,经异丙基硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达,SDS-PAGE显示,p30蛋白在大肠杆菌大量表达。获得的p30经纯化免疫小鼠,4次免疫后,采取其血清经过间接免疫荧光和Western blot检测结果表明,获得的多克隆抗体具有明显的特异性。该研究获得的针对p30的多克隆抗体为ASFV早期诊断试及p30蛋白结构功能研究奠定了基础。
- 黄剑徐晶晶程雪飞李国新高飞童光志
- 关键词：非洲猪瘟病毒P30基因原核表达多克隆抗体
- 乙型脑炎病毒E蛋白抗原优势区域的鉴定被引量：6
- 2009年
- 流行性乙型脑炎（Japanese Encephalitis，JE）是一种人与动物共患的虫媒病毒性疾病，严重危害着人畜的健康。E蛋白是乙型脑炎病毒（Japanese Encephalitis Virus，JEV）的主要结构蛋白，在病毒的吸附、融合、血凝、细胞趋向性、病毒毒力和诱导保护性免疫反应中起重要作用。为了确定该蛋白的抗原优势区域，本研究设计了3对引物，将E蛋白分成3个大段，分别是EF1（1～291aa）、EF2（292～402aa）和EF3（403-500aa），又将EF1分成4个相互重叠的小片段，分别是EF1-1（1～88aa）、EF1—2（68～155aa）、EF1—3（129～222aa）和EF1—4（202～291aa），将以上基因片段分别克隆到原核表达载体进行GST融合表达。SDS-PAGE电泳鉴定各融合蛋白均获得表达，各表达产物以包涵体的形式存在。通过Western blot分析表明融合蛋白GST-EF1、GST—EF2、GST—EF1—1、GST-EF1-2、GST—EF1—3和GST—EF1～4均能被阳性血清识别。通过ELISA鉴定，GST-EF2反应性最强，GST-EF1反应性比GST-EF2稍弱，而GST-EF3反应性最弱，GST-EF1-1、GST-EF1—2、GST-EF1—3和GST—EF1—4片段融合蛋白反应性与GST—EF1相似。由此本研究鉴定出1-402aa是E蛋白的抗原优势区域，在此区域内包括了12个Cys的保守区及域Ⅰ、域Ⅱ和域Ⅲ3个主要抗原域。E蛋白抗原优势区域的鉴定，为E蛋白抗原表位的鉴定以及针对于E蛋白诊断试剂的开发奠定了基础。
- 闫丽萍华荣虹亓文宝周艳君李国新于海姜一峰童光志
- 关键词：流行性乙型脑炎E蛋白
- 一种检测表达非洲猪瘟抗原蛋白的嵌合PRRSV的抗体及其应用
- 本发明提供一种有效区分嵌合非洲猪瘟病毒p1217蛋白的猪繁殖与呼吸综合征病毒的疫苗株和野生毒株的抗体及其应用，可以区分嵌合疫苗rPRRSV‑p1217、野生型的非洲猪瘟和PRRSV，所述纳米抗体具有较强的抗原特异性，仅与...
- 高飞童光志李国新童武李丽薇周艳君姜一峰郑浩虞凌雪刘长龙
- 一种猪瘟病毒E2蛋白的抗原表位、抗体的制备及应用
- 本发明公开了一种猪瘟病毒E2蛋白的抗原表位、抗体的制备及其应用，所述抗原表位序列如SEQ ID NO.1所示，定位在105‑109AA。所述抗原表位可以与CSFV反应，而不与PK‑15细胞发生反应。所述抗原表位在猪瘟病毒...
- 童光志李国新武吉强徐晶晶姜一峰高飞童武郑浩
- 文献传递
- 鸭坦布苏病毒E蛋白的原核表达被引量：9
- 2012年
- 本研究利用RT-PCR方法扩增鸭坦布苏病毒(Duck tembusu virus,DTMUV)奉贤株(FX2010)的结构蛋白E基因,并将其克隆至原核表达载体pET32a(+),构建重组表达质粒pET32a-E。将其转化受体菌E.coli BL21(DE3)感受态细胞,经IPTG诱导进行表达。SDS-PAGE和Western blot试验检测结果表明,E基因在大肠杆菌中得到了表达,并且可与抗DTMUV的多克隆抗体发生特异性反应。E基因的成功表达为DTMUV的诊断试剂盒、疫苗等的研制奠定基础。
- 姬希文李雪松边延峰李国新颜丕熙张七斤李泽君
- 关键词：E基因克隆
