童武
- 作品数:176 被引量:340H指数:8
- 供职机构:中国农业科学院上海兽医研究所更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金上海市自然科学基金上海市科技兴农重点攻关项目更多>>
- 相关领域:农业科学医药卫生生物学轻工技术与工程更多>>
- 猪BST-2全基因克隆、真核表达载体构建及组织表达谱分析被引量:1
- 2017年
- 为研究猪BST-2基因的生物学功能,用特异性的引物扩增猪BST-2基因,并利用生物信息学软件对猪BST-2基因及氨基酸进行分子特性分析,同时进行了猪BST-2蛋白的真核表达及组织表达谱分析。结果表明:猪BST-2基因全长851bp,其中5′-UTR为23bp,3′-UTR为294bp,CDS区为534bp,编码177个氨基酸,猪源BST-2蛋白氨基酸序列与大猩猩、仓鼠、家鼠、驴、猫、牛、猕猴、绵羊、人BST-2蛋白氨基酸序列同源性分别为46.1%,41.7%,39.5%,35.4%,42.0%,40.5%,44.4%,38.7%,46.8%。含有2个跨膜结构(27~49aa和154~176aa),2个潜在的糖基化位点,14个潜在的磷酸化位点,包含磷酸激酶ATM、CKⅡ、PKA、PKC的结合位点。构建真核质粒并转染发现猪BST-2蛋白能够在Vero细胞内正确表达。半定量PCR检测发现BST-2基因在所有组织中均有表达,尤其是在免疫组织及器官(淋巴结、胸腺、扁桃体、脾)、大肠、小肠中的表达量较高。本试验为今后进一步分析验证猪BST-2蛋白的抗病毒机制奠定了基础。
- 孔宁吴永光孟琼王忠泽童武郑浩李国新单同领周恩民童光志
- 关键词:组织表达谱
- 猪伪狂犬病基因缺失灭活疫苗(JS-2012-△gI/gE株)最小免疫剂量测定被引量:7
- 2017年
- 为了确定猪伪狂犬病基因缺失灭活疫苗(PRV JS-2012-△g I/g E株)的最小免疫剂量,本研究将25头14日龄仔猪(猪伪狂犬病毒、猪繁殖与呼吸综合征病毒、猪瘟病毒、猪圆环病毒2型病原抗体均为阴性)随机分成5组,每组5头。第1~4组分别接种猪伪狂犬病灭活疫苗(PRV JS-2012-△g I/g E株)0.5、1、2、3 m L/头,免疫28 d后各组参照第1次免疫的剂量分别加强免疫1次,第5组实验猪不做处理作为阴性对照。免疫后,每周采集各组猪血清检测抗体水平。待第2次免疫28 d后,5组实验猪均滴鼻接种PRV JS-2012株第5代强毒2 m L,含病毒105.0TCID50/头。结果表明:第1次免疫后14 d,第2~4组猪PRV g B抗体全部转为阳性,而第1组猪在第1次免疫后21 d全部转阳。攻毒后,第1组有1头猪发病,表现精神沉郁、厌食和轻微神经症状,其余4头猪有一过性的发热,无任何其他异常临床表现,保护率为80%;第2~4组,实验猪只有一过性的发热,无任何其他异常临床表现,保护率为100%;第5组猪在攻毒后48 h,体温迅速上升到41℃以上,并表现为明显的精神沉郁、厌食和神经症状,发病率为100%,死亡率为40%。由此确定猪伪狂犬病灭活疫苗(JS-2012-△g I/g E株)最小免疫剂量为1 m L/头。
- 童武李国新李国新刘飞郑浩田青刘飞梁超田青李林曹艳云单同领王涛
- 关键词:伪狂犬病毒灭活疫苗最小免疫剂量
- 猪源盖塔病毒的分子生物学研究进展被引量:6
- 2022年
- 盖塔病毒(GETV)属于披膜病毒科甲病毒属。GETV属于虫媒病毒,可以通过蚊虫感染低等脊椎动物。猪群感染GETV后可发生轻微症状,主要导致怀孕母猪繁殖障碍。目前,GETV在世界范围内流行较为广泛,近年来逐步在猪群中暴发,导致部分猪场经济损失严重。因此,加强对猪源GETV的病原、致病机制和疫苗的研究,对于该病的防控具有更重要的意义。本文对猪源GETV分子结构和病毒复制以及近年来研究进展进行了综述和展望。
- 朱世强王帅勇王娟姚云虞凌雪单同领周艳君童武郑浩童光志于海
- 关键词:盖塔病毒基因组结构蛋白病毒复制
- 猪源IRAV的克隆、表达及单克隆抗体的制备
- 2022年
- 干扰素调节的抗病毒基因(IRAV)是近年来被发现的一种具有抗病毒活性的新型干扰素刺激基因,其对登革热病毒的增殖具有良好的抑制作用,但目前鲜有猪源IRAV基因的研究。本研究,从PK-15细胞中克隆了IRAV全长的cDNA。猪源IRAV cDNA全长为1241 bp,其中包含858 bp的开放阅读框,编码一个大小为285个氨基酸的多肽,定位于细胞质。将猪源IRAV蛋白在BL21(DE3)中诱导表达,经纯化后免疫雌性BALB/c小鼠,最终获得5株分泌猪源IRAV单克隆抗体(mAb)的杂交瘤细胞,分别命名为2B10、2G12、2H1、5A8和2C5。将获得的分泌性抗IRAV单克隆抗体经Western blot和间接免疫荧光试验分析后,确定该抗体可以与PK-15细胞中过表达的猪源IRAV发生特异性反应。本研究成功制备针对猪源IRAV的单克隆抗体,为后续深入研究猪源IRAV的功能奠定了基础。
- 王桦焦亚娟孔宁孙大格董苏洁陈晓勇翟焕杰童武童武于海郑浩童光志于海
- 关键词:系统发育分析单克隆抗体
- 抗猪PABPC1蛋白单克隆抗体的制备与鉴定被引量:1
- 2022年
- 细胞质聚腺苷酸结合蛋白1(PABPC1)是一种mRNA poly A结合蛋白,在维持mRNA稳定和蛋白翻译方面起着重要作用。本研究中将猪源PABPC1基因克隆并插入原核表达载体pCold-Ⅰ中,构建重组表达质粒pCold-pPABPC1。将其转化至大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞并经过IPTG诱导表达重组猪PABPC1蛋白。然后,用纯化的rpPABPC1蛋白免疫BALB/c小鼠以制备PABPC1的单克隆抗体。Western blot结果表明,PABPC1单克隆抗体与PK1细胞和HEK293T细胞中的PABPC1蛋白发生了特异性反应。猪PABPC1特异性单克隆抗体为进一步研究PABPC1的功能提供了有价值的工具。
- 焦亚娟王桦孔宁孙大格董苏洁陈晓勇翟焕杰童武童武于海郑浩童光志于海
- 关键词:克隆单克隆抗体
- 一株串联表达非洲猪瘟病毒P30、P54基因重组伪狂犬病毒基因工程疫苗及其应用
- 本发明提供一株串联表达非洲猪瘟病毒P30、P54基因重组伪狂犬病毒基因工程疫苗及其应用,本研究以PRV JS‑2012‑ΔgI/gE株为基础,利用同源重组的方法,将现今国内流行的非洲猪瘟病毒的主要抗原蛋白(P30、P54...
- 童武周艳君童光志包玮玲高飞郑浩李国新于海单同领姜一峰虞凌雪刘长龙李丽薇孔宁
- 猪伪狂犬病毒变异株全长基因组测序及遗传演化分析
- 为了进一步了解伪狂犬病毒(PRV)野毒株的遗传变异情况,同时进一步弄清传统基因缺失疫苗对仔猪感染现有野毒株和经典强毒株的保护力差异的分子机制,对PRV JS-2012株全基因组测序和功能区域进行遗传演化和变异分析,以及主...
- 张青占童武刘飞郑浩周艳君童光志
- 关键词:猪伪狂犬病毒
- 文献传递
- 表达GM-CSF重组PRRSV弱毒疫苗株及其制备方法和应用
- 本发明公开了一种猪繁殖与呼吸综合征病毒弱毒疫苗株,该疫苗株包含猪繁殖与呼吸综合征病毒弱毒疫苗株HuN4-F112的基因组核酸,在该HuN4-F112基因组的ORF1b和ORF2a之间插入有GM-CSF序列,该GM-CSF...
- 童光志虞凌雪周艳君姜一峰童武于海李国新高飞
- 欧洲类禽H1N1亚型猪流感病毒HA蛋白单克隆抗体的制备
- 引言猪流感(Swine Influenza,SI)是由正粘病毒科A型流感病毒属的猪流感病毒(Swine Influenza virus,SIV)引起的一种猪急性传染性呼吸道疾病。H1N1亚型SIV根据其基因片段的起源不同...
- 汪琪张鹏王帅勇姚云朱世强单同领虞凌雪童武周艳君李国新郑浩童光志于海
- 三株与HP-PRRSV疫苗株高度同源的高致病性猪繁殖和呼吸综合征病毒的分离鉴定
- 引言 2012年江苏省某未使用过HP-PRRSV疫苗的猪场保育猪群中出现疑似PRRS症状,导致大部分仔猪死亡。从发病猪血清中分离到三株猪繁殖和呼吸综合征病毒,命名为NT1、NT2和NT3,鉴定分析结果显示三株病毒可能来源...
- 姜一峰童武童光志夏天奇周艳君虞凌雪杨莘黄勤锋李丽薇高飞曲泽慧