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人源轮状病毒的小型猪腹泻模型建立被引量：3: 2006年; 目的建立人源轮状病毒的小型猪腹泻模型，为人源轮状病毒感染的免疫保护机制、致病机制及疫苗的研制奠定基础。方法ELISA与RT-PCR相结合分离鉴定野生型人源轮状病毒；用野生型人源轮状病毒G1与G3血清型口服接种不同日龄的小型猪，观察粪便排泄等临床症状，ELISA及免疫荧光分别检测粪便与小肠上皮组织中的轮状病毒抗原，光镜及透射电镜观察小肠上皮组织的病理变化与病毒样颗粒。结果3～5日龄小型猪均出现了典型的临床腹泻症状；粪便中轮状病毒抗原排泄可平均持续5～7d；小肠组织可见明显的病理变化，同时用免疫荧光检测方法可在小肠组织中检测到特异性轮状病毒抗原；透射电镜进行观察，在小肠组织的超薄切片中可见到大量的轮状病毒颗粒。30～35日龄小型猪可出现明显腹泻临床症状，粪便中轮状病毒抗原排泄可持续4～7d；56～60日龄小型猪接种野生型人源轮状病毒G1血清型后，均未出现典型的腹泻症状，但可持续排毒2～3d。结论小型猪可作为人源轮状病毒的理想腹泻动物模型。; 李晋涛魏静牟芝蓉张蓓王靖雪唐艳何海洋费蕾吴玉章; 关键词：小型猪腹泻模型

小型猪外周血单个核细胞产生IFN-γ频率年龄依赖性初探被引量：1: 2006年; 目的通过检测不同日龄小型猪外周血单个核细胞产生IFN-γ的频率,初步探讨小型猪免疫细胞功能的发育时限。方法分别取3日龄、2月龄、6月龄、1周岁及2周岁小型猪的外周血,提取单个核细胞,进行胞内细胞因子IFN-γ染色,流式细胞仪检测不同日龄小型猪外周血单个核细胞产生IFN-γ的频率。结果3日龄、2月龄、6月龄1、周岁及2周岁小型猪的外周血单个核细胞产生IFN-γ的频率分别为2.73%、3.80%、10.00%、38.09%及41.03%。结论小型猪免疫细胞功能具有明显的发育时限。1周岁以上小型猪的免疫细胞功能发育基本成熟。; 魏静李晋涛张蓓王靖雪唐艳何海洋费蕾吴玉章; 关键词：小型猪单个核细胞 IFN-Γ

HBV源性MicroRNA前体分子预测被引量：2: 2007年; 目的:预测HBV基因编码的microRNA分子前体.方法:采用VMir软件,对HBV全基因进行扫描,通过对所得序列的评分及结构分析,得到HBV编码的microRNA的候选前体分子;通过Northern blot实验,对预测结果进行初步验证.结果:通过VMir的预测,得到3个HBV可能编码的microR-NA分子前体,即MD6,MD20,MR31;通过Northern blot实验,只有针对于MD17的探针杂交后出现特异性条带.结论:MD17可能为HBV基因组编码的microRNA前体分子.; 韩俊峰阮志华张蓓吴玉章; 关键词：乙型微RNAS

HBV整合引起HepG2细胞microRNA表达谱变化分析被引量：1: 2007年; 目的分析HBV整合后引起的肝细胞microRNA表达谱的变化情况。方法利用microRNA芯片,以稳定表达HBV的HepG2.2.15细胞为HBV感染模型,以HepG2细胞为对照,分析二者microRNA表达谱的异同,得到因HBV感染而产生变化的microRNA;并用定量PCR技术来验证结果的可靠性。结果通过microRNA芯片分析和定量PCR验证,HBV感染后可使hsa-miR-30a-5p、hsa-miR-24、hsa-let-7a、hsa-let-7c、hsa-let-7f和hsa-miR-23b6种microRNA下调,使hsa-miR-194、hsa-miR-200a和hsa-miR-3453种microRNA上调。结论HBV整合后,可引起肝脏细胞microRNA表达谱变化。; 韩俊峰阮志华张蓓吴玉章; 关键词：HBV MICRORNA

乙型肝炎患者HBcAg18-27表位特异性细胞毒性T细胞的研究被引量：20: 2007年; 目的对乙肝患者尤其是慢性乙肝患者外周血HBcAg18-27表位特异性细胞毒性T细胞(CTL)的分布频率及功能状态进行研究。方法应用多色流式分析结合HLA-A*0201限制性表位肽/五聚体复合物技术对乙肝患者外周血HBcAg18-27表位特异性CTL进行精确定量,应用胞内细胞因子染色技术结合流式细胞分析技术研究HBcAg18-27表位特异性CTL穿孔素,颗粒酶B,干扰素-γ的分泌水平。结果在急性与慢性乙型肝炎患者外周血中均可测到HBcAg18-27表位特异性CTL,两者的分布频率存在显著性差异。慢性乙肝患者外周血中HBcAg18-27表位特异性CTL分泌穿孔素,颗粒酶B,干扰素的水平明显降低。结论HBcAg18-27表位特异性CTL在乙型肝炎病毒清除中起到重要作用,慢性乙肝患者外周血HBcAg18-27表位特异性CTL存在功能缺陷。; 张蓓付晓岚王靖雪韩俊峰吴玉章; 关键词：乙型肝炎 T淋巴细胞细胞毒性

慢性乙型肝炎患者外周血中CD4^+CD25^+调节性T细胞的变化和意义被引量：17: 2007年; 目的观察慢性乙型肝炎感染者外周血CD4+CD25+调节性T细胞(Treg)的频率,特征性表型及与临床指标的相关性。方法采集44例慢性乙型肝炎,29例健康人外周血,多色流式分析Treg的频率,CD4+CD25+Foxp3+调节性T细胞的频率。所有病例均经酶联免疫吸附实验(ELISA)检测HBsAg、HBsAb、HBeAg、HBeAb和HBcAb,实时荧光定量RT-PCR检测血清HBV DNA载量及肝功能的检测。结果慢性乙型肝炎组Treg的频率(5.02%±2.07%)显著高于正常对照组(3.35%±1.51%,P<0.05);Foxp3在Treg上特异性表达,慢性乙型肝炎组CD4+CD25+Foxp3+调节性T细胞的频率(2.05%±1.03%)显著高于正常对照组(1.30%±0.68%,P<0.05);慢性乙型肝炎组Treg的频率与病毒载量呈正相关。结论Treg在慢性乙型肝炎感染者中明显增高,并与病毒载量相关,提示Treg在慢性乙型肝炎中担负着重要的免疫调节作用,可能是造成乙肝病毒感染慢性化的重要因素。; 张蓓付晓岚王靖雪韩俊峰吴玉章; 关键词：乙型肝炎 CD4^+CD25^+调节性T细胞免疫调节

CD4<'+>CD25<'high>调节性T细胞在慢性持续性乙肝病毒感染中的作用临床研究: 尽管预防性乙肝病毒(hepatitis B virus，HBV)疫苗已经在全球广泛应用，但慢性持续性乙肝病毒的感染率仍居高不下，目前全世界慢性HBV感染者已经超过3.7亿人，乙肝相关的肝硬化和肝癌的死亡率也逐年增加，严重...; 张蓓; 关键词：乙肝病毒病毒感染调节性T细胞颗粒酶; 文献传递

CD4+CD25+调节性T细胞在慢性乙型肝炎中的免疫调节作用: 目的:观察慢性乙型肝炎感染者外周血CD4+CD25+调节性T细胞(Treg)的频率,表型特征及对病毒特异性CTL的免疫调节作用。方法:采集53例慢性乙型肝炎,26例健康人外周血,多色流式分析Treg的频率,CD4+CD2...; 张蓓付晓岚吴玉章; 文献传递

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张蓓