刘娟
- 作品数：11 被引量：34H指数：4
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- 人参总皂苷增强小鼠黑色素瘤B16细胞缝隙连接功能的实验研究被引量：5
- 2013年
- 目的探讨人参总皂苷（total ginsenosides，TGs）对小鼠黑色素瘤B16细胞缝隙连接（Gapiunction，GJ）功能的影响及其作用机制。方法MTT法测TGs对B16细胞生长的影响，荧光显微镜结合荧光示踪法分析GJ功能变化，以各试验组受体细胞均数与对照组的比值作为评价GJ功能的指标，流式细胞仪检测对照组和实验组的绿色荧光供体细胞（G4）与双阴性受体细胞（G3）比值（G4／G3）变化分析CJ功能改变，Westernblot分析连接蛋白（Connexin，Cx）表达。结果1～8μmol·L^-1 TGs处理B16细胞48h对其生长状态无明显影响；用1，2，4，8μmol·L^-1 TGs处理细胞48h后，荧光显微镜下观察，TGs能明显提高B16细胞荧光染料Calcein传递，对照组和实验组G4／G3比值分别是0．06±0．01，0．09±0．02，0．10±0．01，0．12±0．03和0．13±0．02，各实验组G4／G3值明显高于对照组（P〈0．01）；Westernblot分析结果显示，用1，2，4，8μmol·L^-1 TGs处理B16细胞48h对其连接蛋白Cx32表达有明显的增强作用，但对Cx43和Cx26表达无影响。结论体外较低浓度TGs能够有效促进B16细胞GJ功能，并具有一定的剂量一效应关系。1～8μmol·L^-1 TGs虽能显著促进B16细胞Cx32蛋白的表达，但在本试验浓度范围内并无明显的量效关系，且对Cx43和Cx26表达无明显影响。
- 王苏萍张广献谭宇蕙肖建勇吴映雅杜标炎丘鹏翔刘娟
- 关键词：人参总皂苷B16细胞连接蛋白流式细胞术
- 子午流注低频治疗对POR患者卵子质量及辅助生殖临床结局影响的研究
- 目的:1.通过回顾性分析本科室中行辅助生殖治疗的卵巢低反应(POR)患者在不同干预措施下的助孕结局,拟调查子午流注低频治疗与POR患者辅助生育结局的相关性。2.采用前瞻性随机病例对照研究,通过对POR患者在辅助生殖治疗前...
- 刘娟
- 关键词：卵巢低反应卵子质量辅助生殖治疗
- 宣肺化痰合补肾纳气法防治小儿喘息性支气管炎的临床研究
- 目的: 在发作期和缓解期，运用宣肺化痰及补肾纳气法分期分方治疗小儿喘息性支气管炎（喘支）患儿，评价具有宣肺化痰及补肾纳气作用的中药汤剂治疗小儿喘息性支气管炎风寒束肺证的可行性及有效性。为临床运用该法治疗小儿喘息性支气管...
- 刘娟
- 关键词：小儿患者喘息性支气管炎中药药理
- 文献传递
- 六味地黄入血成分增效黑色素瘤自杀基因治疗的体内实验
- 一、研究目的及意义： 恶性黑色素瘤多发于皮肤、内脏,临床治疗效果不佳。近年来,基因疗法尤其是自杀基因疗法取得了一定的进展。但在研究过程中也逐渐发现不少问题,如自杀基因前体药物活性较低、毒副作用大,载体转染效率不高等...
- 刘娟
- 关键词：黑色素瘤HSV-TK/GCV系统自杀基因
- 文献传递
- 原发性膜性肾病患者甲状腺功能异常对其病情缓解的影响
- 目的： 探讨原发性膜性肾病患者合并甲状腺功能异常的临床特征及中医证候特点，总结原发性膜性肾病患者合并甲状腺功能异常的危险因素，并重点分析原发性膜性肾病患者合并甲状腺功能异常后对其病情缓解的影响，为原发性膜性肾病患者合并...
- 刘娟
- 关键词：原发性膜性肾病甲状腺功能异常中医证候
- 文献传递
- 六味地黄丸入血成分增效自杀基因杀伤肝癌细胞的缝隙连接机制被引量：8
- 2014年
- 【目的】探讨六味地黄丸主要入血成分处理的淋巴上清对大鼠肝癌细胞CBRH7919缝隙连接功能的影响,以期阐明其增强自杀基因疗法杀伤肝癌细胞效应的作用机制。【方法】取大鼠脾淋巴细胞,加入六味地黄丸的5种主要入血成分,体外培养后取含药淋巴上清,采用流式细胞术结合荧光示踪法分析其对细胞缝隙连接通讯功能(GJIC)的影响;利用Western blot法检测含药淋巴上清对大鼠肝癌CBRH7919细胞Cx43蛋白表达的影响;利用GJ阻滞剂甘草次酸(GA)观察阻滞GJIC后,含药淋巴细胞上清联合tk/GCV系统对细胞杀伤作用的影响。【结果】流式细胞术结合荧光示踪法结果表明,占培养液15%(体积分数)的含药淋巴上清能促进大鼠肝癌CBRH7919细胞的GJIC功能;Western blot法结果显示,含药淋巴细胞上清能提高大鼠肝癌CBRH7919细胞Cx43蛋白的表达水平;GA阻断GJIC功能后,含药淋巴细胞上清联合tk/GCV系统对细胞杀伤作用降低。【结论】六味地黄丸入血成分处理的淋巴上清可通过缝隙连接机制发挥对自杀基因杀伤大鼠肝癌细胞的增效作用。
- 刘娟周瑶张广献谭宇蕙肖建勇吴映雅曾玲杜标炎
- 关键词：肝癌六味地黄丸入血成分自杀基因肝癌细胞
- 过表达及定点突变缝隙连接蛋白Cx43小鼠黑色素瘤细胞模型的构建被引量：3
- 2014年
- 目的构建小鼠黑色素瘤细胞(B16)过表达野生型及点突变型缝隙连接蛋白43(Connexin43,Cx43)细胞模型,为以缝隙连接(Gap Junction,GJ)为靶点的中药复方、中药单药及药物单体的研究提供可靠阳性对照和阴性对照。方法构建野生型Cx43、突变型Cx43G21R、突变型Cx43G138R重组荧光蛋白融合慢病毒表达质粒,用定点突变技术获得Cx43G21R和Cx43G138R突变体,对上述3种质粒进行双酶切和测序鉴定,并分别包装病毒感染B16细胞,使B16细胞过表达野生型Cx43、突变型Cx43G21R、突变型Cx43G138R。Western blot检测Cx43蛋白表达水平变化,荧光示踪法观察缝隙连接通讯(Gap Junction Intercellular Communication,GJIC)功能变化。结果①酶切及测序证明,成功构建pLVCx43-mCherry、pLVCx43-mCherryG21R、pLVCx43-mCherryG138R重组荧光蛋白融合慢病毒表达质粒。②成功感染B16细胞并筛选稳定过表达Cx43、Cx43G21R、Cx43G138R细胞株,Western blot检测显示上述细胞株Cx43蛋白表达均高于对照组。③过表达野生型Cx43后B16细胞GJIC功能较对照组增强;过表达突变型Cx43后B16细胞GJIC功能较对照组减弱。结论过表达野生型Cx43可增强B16细胞GJIC功能,过表达突变型Cx43可抑制B16细胞GJIC功能。
- 李玢张广献刘娟赵青谭宇蕙吴映雅易华杜标炎
- 关键词：黑色素瘤细胞小鼠缝隙连接蛋白43定点突变缝隙连接通讯
- 重组HSV1-tkGFP/GCV荧光蛋白示踪系统的构建及对小鼠黑色素瘤的抑制作用被引量：2
- 2014年
- 目的建立具有绿色荧光蛋白(GFP)示踪功能的单纯疱疹病毒1型胸苷激酶基因/更昔洛韦自杀基因系统(HSV1-tkGFP/GCV),并检测该系统对小鼠黑色素瘤的抑制作用。方法将阳性重组质粒pLXSN-tkGFP和pLXSN-DsRed2分别转染B16细胞,加G418进行筛选。用GCV(5,50,500μmol·L-1)杀伤实验验证tk基因的表达。四甲基偶氮唑盐(MTT)法和荧光示踪法验证该系统存在旁杀伤效应。将B16-tkGFP和B16-RFP细胞按1∶1混合,接种于C57BL/6J小鼠进行肿瘤模型复制,随机分为模型组和GCV(50 mg·kg-1·d-1)组,腹腔注射给药,每3 d检测1次肿瘤大小(n=14)。结果成功获得能发出绿色荧光的B16-tkGFP细胞和能发出红色荧光的B16-RFP细胞,且tk基因在B16-tkGFP细胞中表达正常。该系统存在一定的旁杀伤效应。与模型组比较,GCV组小鼠肿瘤生长受到明显抑制(P<0.01)。结论重组HSV1-tkGFP/GCV系统对小鼠黑色素瘤有明显抑制作用,并可实现直观检测其旁杀伤效应,为后续中药联合自杀基因疗法的研究奠定基础。
- 曾玲吴映雅谭宇蕙丘鹏翔张广献刘娟陈志从杜标炎
- 关键词：单纯疱疹病毒胸苷激酶基因自杀基因系统黑色素瘤
- 冠脉搭桥术后康复期辨证施护规范化方案研究
- 张广清林小丽邱瑞娟邱定荣李晓庆王侠曾影红刘娟陈静薇陈日宇林乙慧王晓蕾吴巧媚李夏萍游琪
- 《冠脉搭桥术后康复期辨证施护规范化方案研究》由2005年广东省中医药局科研课题《冠脉搭桥术后康复期辨证施护规范化方案研究》总结完成。该研究针对冠脉搭桥术后辨证以气虚证、痰浊证为主，肠胃气滞多见的证候特点，形成包括食疗、八...
- 关键词：
- 关键词：冠脉搭桥术中医护理
- 针刺内关、水沟穴治疗脑卒中运动性失语的疗效观察
- 目的：通过观察针刺内关、水沟穴对脑卒中运动性失语患者语言功能的影响，并与传统治疗方法作对比，评价针刺内关、水沟穴对脑卒中运动性失语的临床疗效，探寻另一种有效的针灸治疗方法。 方法：将60例入选病人按照随机数字表随机分为...
- 刘娟
- 关键词：运动性失语针刺内关疗效分析
- 文献传递
