目的:检测贲门腺癌(gastric cardia adenocarcinoma,GCA)组织中Wnt通路相关因子Sox17基因的甲基化状态及mRNA表达情况,探讨其与贲门腺癌发生的关系。方法:应用甲基化特异性PCR(methylation specific PCR,MSP)及RT-PCR的方法检测126例贲门腺癌及相应癌旁非肿瘤组织中Sox17基因的甲基化状态及mRNA表达情况。结果:在126例贲门腺癌组织中,Sox17基因的甲基率为86.5%(109/126),明显高于癌旁非肿瘤组织(P<0.001);癌组织中Sox17基因的甲基化率与贲门腺癌的TNM分期及淋巴结转移均无关;癌组织中该基因mRNA的阳性表达率为58.7%(74/126),明显低于癌旁非肿瘤组织(P<0.001)。其mRNA阳性表达率与该基因的甲基化状态呈明显负相关(P<0.01)。结论:Sox17基因在贲门腺癌中呈高甲基化状态。
目的通过对食管鳞状细胞癌(ESCC)组织中含凝血酶敏感素基序的去整合素金属蛋白酶18(ADAMTS18)m RNA及蛋白表达情况的检测,探讨ADAMTS18在ESCC发生、发展中所起的作用及临床意义,为ESCC的临床早期诊断及预后评估提供新的客观参考指标。方法采用半定量-逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)的方法及免疫组化S-P的方法(生物素-链霉卵白素过氧化酶系统)对72例ESCC组织及癌旁正常组织中ADAMTS18 m RNA及蛋白的表达进行检测。结果 1ADAMTS18 m RNA在ESCC组织中的相对表达量为(0.361±0.115),在癌旁正常组织中表达量为(0.879±0.265),ESCC组织中ADAMTS18 m RNA表达量显著低于癌旁正常组织(P<0.01);ADAMTS18 m RNA在高/中分化鳞癌组中的相对表达量为(0.496±0.153),在低分化鳞癌组中为(0.232±0.088),低分化鳞癌组ADAMTS18 m RNA表达量显著低于高/中分化鳞癌组(P<0.05)。2ADAMTS18蛋白在ESCC组织中的阳性表达率为34.7%(25/72),在癌旁组织中的阳性表达率为93.1%(67/72),ADAMTS18蛋白在ESCC组织中阳性表达率显著低于癌旁组织(P<0.01);ADAMTS18蛋白在高/中分化鳞癌组中的阳性表达率为45.4%(20/44),在低分化鳞癌组中为17.8%(5/28),低分化鳞癌组ADAMTS18蛋白阳性表达率显著低于高/中分化鳞癌组(P<0.05)。结论 ADAMTS18基因在ESCC中的异常表达与ESCC的发生、发展及组织分化程度关系密切,检测ESCC组织中ADAMTS18基因的表达情况,有助于ESCC早期诊断及预后评估。
[目的]检测食管鳞状细胞癌(ESCC)中DACT2基因表达及启动子区甲基化状态,探讨DACT2基因在食管鳞癌发生发展中的作用。[方法]分别应用逆转录—聚合酶链反应(RTPCR)以及甲基化特异性PCR(MSP)的方法检测DNA甲基转移酶抑制剂5-氮杂-2′-脱氧胞苷(5-aza-d C)处理前后的食管癌细胞系(TE1、TE13、T.Tn、Eca109)以及食管鳞癌组织及相应癌旁组织中DACT2 m RNA表达情况及启动子区甲基化状态。[结果]经5-aza-d C处理后4种食管癌细胞系中DACT2基因的表达均增高。4种未经5-aza-d C处理的食管癌细胞系中DACT2基因呈高甲基化状态。应用5-aza-d C处理后,DACT2基因在4种细胞系中均呈非甲基化状态。DACT2基因在食管鳞癌组织中的表达显著低于癌旁组织(0.66±0.53 vs 0.95±0.64,t=-2.43,P=0.018),并与淋巴结转移密切相关(t=-2.030,P=0.048)。食管鳞癌组织中DACT2基因的启动子区甲基化率显著高于癌旁组织(50.0%vs 21.1%,χ2=9.439,P=0.002),并与TNM分期、组织学分化程度和淋巴结转移密切相关(P均<0.05)。发生DACT2基因甲基化的食管鳞癌组织中DACT2基因的表达量显著低于未发生甲基化的食管鳞癌组织(0.46±0.32 vs 0.78±0.61,t=-2.341,P=0.023)。[结论 ]DACT2基因在食管鳞癌中的异常低表达与食管鳞癌的发生、发展密切相关,且其启动子区甲基化可能是导致其表达沉默的机制之一。
