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牛血清中牛病毒直接免疫荧光检测方法的建立及验证: 2014年; 目的建立牛血清中牛病毒直接免疫荧光检测方法,并进行验证。方法建立直接免疫荧光法检测牛血清中牛病毒,对细胞接种浓度和血清浓度、病毒接种量、荧光抗体浓度、染色温度及时间进行优化;对优化的方法进行重复性、特异性、灵敏度验证,并与细胞培养法的检测结果进行比较。结果优化的试验条件为：Vero和BT细胞的接种浓度分别为0.5×105和1.0×105个/ml,血清浓度为5%,病毒接种量为100~300 CCID50,荧光抗体1∶10稀释,4℃染色12 h以上,但不超过24 h。2名实验人员按建立的方对3批牛血清分别进行3次检测,均未检出6种牛病毒;每种病毒仅在相应抗体进行染色时出现荧光;该方法检测6种牛病毒的灵敏度较高。分别采用细胞培养法和直接免疫荧光法检测15批新生牛血清和5批胎牛血清,结果均未检出牛病毒。结论建立的牛血清中牛病毒直接免疫荧光检测方法重复性好,特异性强,灵敏度高,操作简便,与细胞培养法的检测结果无差异,可应用于牛血清中牛病毒的检测。; 袁良玉黄敏潘海龙吕冰凌王静谭昌耀朱文; 关键词：牛血清直接免疫荧光法

乙型脑炎减毒活疫苗原液的残余PHK细胞蛋白检测方法的验证: 2015年; 目的验证PHK细胞残余蛋白检测试剂盒检测乙型脑炎减毒活疫苗（乙脑疫苗）原液的残余PHK细胞蛋白的适用性.方法对PHK细胞残余蛋白检测试剂盒检测乙脑疫苗原液的残余PHK细胞蛋白的准确性、精密度、专属性、耐用性和线性进行验证.结果 PHK细胞残余蛋白检测试剂盒检测乙脑疫苗原液的残余PHK细胞蛋白的准确性良好,PHK细胞蛋白标准品的回收率为96.16％-111.44％.该试剂盒在PHK细胞蛋白质量浓度为6.25-200.00μg/L时呈现良好的线性,决定系数为0.997,最低检测限和最低定量限分别为6.70和22.33 μg/L.该试剂盒检测乙脑疫苗原液中的残余PHK细胞蛋白的专属性良好,而且操作人员、时间和试剂盒批号变化对检测结果无影响（相对标准偏差均≤15％）.结论 PHK细胞残余蛋白检测试剂盒适用于乙脑疫苗原液的残余PHK细胞蛋白检测.; 王静吴杰曲芙莲周扬南方陈智勇刘少祥; 关键词：酶联免疫吸附测定原液

乙型脑炎减毒活疫苗抗生素残留量检测方法的验证被引量：4: 2011年; 目的对本所采用的乙型脑炎减毒活疫苗抗生素残留量检测方法进行验证。方法以人用药品注册技术要求国际协调会(ICH Q2A)和《中国药典》二部附录XIX A等指导性文件为依据,选择准确性、重复性、中间精密性、耐用性、线性、检测限和定量限7个验证参数进行验证。结果该法检测高、中、低浓度的庆大霉素标准品的回收率为120.00%～123.33%;检测同一供试品的CV均﹤15%;不同试验人员检测相同供试品和不同批次试剂盒检测相同供试品的差异均无统计学意义(P>0.05);5种条件检测结果差异均无统计学意义(P>0.05),在(37±1)℃温度范围内耐用性良好;庆大霉素标准品在0～8.1 ng/ml范围时,R2=0.992 5≥0.98;该方法的检测限为1.35 ng/ml,定量限为4.50 ng/ml。结论本所用于乙脑减毒活疫苗庆大霉素残留量检测的方法是有效的。; 王静杨烨刘菊曲芙莲; 关键词：乙型脑炎减毒活疫苗庆大霉素类酶联免疫吸附测定

治疗用卡介苗毒性试验和脾激活试验的方法学验证: 2012年; 目的对治疗用卡介苗毒性试验和脾激活试验进行方法学验证。方法分别用治疗用卡介苗、皮内注射用卡介苗或生理氯化钠溶液处理小鼠，通过每天观察处理小鼠的体重变化和健康状况并打分来进行毒性试验，通过计算处理小鼠的脾指数来进行脾激活试验。使用NCSS软件对检测结果进行方差分析，考察试验方法的精密度和中间精密度。结果操作人员和时间变化对毒性试验和脾激活试验的检测结果没有影响。结论治疗用卡介苗毒性试验和脾激活试验均具有可重复性和精密性，可用于治疗用卡介苗的安全性和有效性检测。; 徐永革王玉英秦黎静王静刘菊; 关键词：卡介苗毒性试验

b型流感嗜血杆菌结合疫苗中蔗糖含量检测方法的建立及验证被引量：3: 2015年; 目的建立测定b型流感嗜血杆菌结合疫苗中蔗糖含量的旋光法,并对方法进行验证。方法建立旋光法,检测b型流感嗜血杆菌结合疫苗中的蔗糖含量,并对方法进行专属性、线性范围、重复性、准确性、耐用性和稳定性验证。结果b型流感嗜血杆菌结合疫苗中其他组分对蔗糖旋光度无干扰;蔗糖浓度在2-10 mg/ml范围内与旋光度具有良好的线性关系（r=0.999 998）;重复测定供试品溶液6次,相对标准偏差（RSD）为0.46%;低、中、高浓度的供试品平均回收率分别为99.18%、99.14%、98.95%;温度在10-30℃范围内对旋光度无明显影响;样品于20℃放置5 h内旋光度无明显变化。结论建立了旋光法检测b型流感嗜血杆菌结合疫苗中蔗糖含量的方法,该方法操作简单快速,在确定的限度范围内具有较好的专属性、重复性、准确性、耐用性和稳定性。; 杨烨廖丹谢姗姗李青耘王静; 关键词：B型流感嗜血杆菌结合疫苗蔗糖旋光法

测定过氧化氢酶活性的分光光度法的建立及验证被引量：17: 2015年; 目的建立测定23价肺炎球菌多糖疫苗的关键原辅材料—过氧化氢酶活性的方法,并进行验证。方法分别采用高锰酸钾滴定法和紫外分光光度法测定过氧化氢酶活性,并对紫外分光光度法进行重复性、日间精密度、不同人员间精密度、耐用性、线性验证。结果两批样品重复测定6次结果的RSD均〈5%;两批样品两名检测人员3日内的检测结果以及两批样品不同工作日间的检测结果差异均无统计学意义（P〉0-05）,样品日间和人员间检测结果的RSD均〈5%;在20-30℃温度范围内该方法耐用性良好,在p H 7.0-7.5范围内耐用性良好;该方法在样品浓度为0.2-1.6μl/ml之间的线性关系良好。结论分光光度法重复性、日间精密度、不同人员间精密度良好,且操作简便,结果可靠,适用于过氧化氢酶的质量控制。; 廖丹杨烨李青耘谢姗姗王静; 关键词：过氧化氢酶酶活性分光光度法

检测乙型脑炎减毒活疫苗中分枝杆菌污染的环介导恒温扩增法的建立: 2013年; 目的建立检测乙型脑炎减毒活疫苗中分枝杆菌污染的环介导恒温扩增(loop-mediated isothermal amplification,LAMP)法。方法选择皮内注射BCG疫苗、人结核分枝杆菌标准株和临床株、牛分枝杆菌标准株和临床株、草分枝杆菌标准株和临床株、偶然分枝杆菌、瘰疬分枝杆菌、堪萨斯分枝杆菌、龟脓分枝杆菌、戈登分枝杆菌、土地分枝杆菌、鸟分枝杆菌、施氏分枝杆菌、亚洲分枝杆菌共16株,对建立的LAMP法的灵敏度、精密度、适用性及特异性进行验证,分析其在乙型脑炎单一病毒收获液质量控制中的可行性。结果该方法对偶然、堪萨斯和鸟分枝杆菌的检测灵敏度为103CFU/ml,对其他分枝杆菌的检测灵敏度可达102CFU/ml,灵敏度良好;用建立的方法对同一批样品的6次检测结果均一致,2名试验人员分别每日检测每批样品,连续检测3 d,检测结果均一致,表明该方法精密度良好;乙型脑炎单一病毒收获液中的成分对实验结果无干扰作用,表明该方法适用性良好;分别加入百日咳杆菌、金黄色葡萄球菌和大肠埃希菌C3000 3种非分枝杆菌的乙型脑炎单一病毒收获液的检测结果均为阴性,表明该方法可区分分枝杆菌属细菌和非分枝杆菌属细菌,特异性良好。结论建立了检测乙型脑炎减毒活疫苗中分枝杆菌污染的LAMP法,该方法可用于检测乙型脑炎单一病毒收获液是否被分枝杆菌污染。; 王静吕冰凌孟丽邓雪莲姚亚夫; 关键词：乙型脑炎减毒活疫苗分枝杆菌

乙型脑炎减毒活疫苗对不同基因型乙型脑炎病毒的免疫效果: 2017年; 目的研究乙型脑炎减毒活疫苗免疫人体后对不同基因型乙型脑炎病毒的免疫反应。方法将乙型脑炎减毒活疫苗(SA14-14-2)免疫8~12月龄健康儿童,采集免疫前及免疫后28 d静脉血,分离血清,采用蚀斑减少中和试验(plaque reduction neutralization test,PRNT)分别检测血清中对不同基因型乙型脑炎病毒毒株的中和抗体,计算血清中和抗体阳转率。结果乙型脑炎减毒活疫苗免疫后对基因Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ型乙型脑炎病毒毒株均产生了显著水平的中和抗体,血清中和抗体阳转率分别为94%、92%和94%。结论乙型脑炎减毒活疫苗免疫人体后,对不同基因型的乙型脑炎病毒均产生良好的免疫应答。; 张磊罗静王静周本立; 关键词：乙型脑炎减毒活疫苗乙型脑炎病毒基因型免疫效果

用于卡介菌多糖核酸制剂效力实验的小鼠模型的建立: 2012年; 目的建立用于卡介菌多糖核酸制剂效力实验的小鼠模型。方法选用猪血清、牛血清白蛋白、卵白蛋白作为致敏原，腹腔注射BALB／c小鼠以建立I型变态反应动物模型，并通过在卡介菌多糖核酸制剂效力实验中应用建立的小鼠模型来验证其可行性。采用t检验对测定结果进行统计学分析。结果猪血清、牛血清白蛋白和卵白蛋白均可作为致敏原致敏BALB／c小鼠，但牛血清白蛋白和卵白蛋白的致敏效果优于猪血清。卡介菌多糖核酸制剂效力实验显示，牛血清白蛋白实验组与对照组间的小鼠发病分值差异具有统计学意义（t=3．22，P=0．0045），表明牛血清白蛋白致敏小鼠建立的动物模型可更好地反映卡介菌多糖核酸制剂的效力。结论牛血清白蛋白致敏小鼠建立的动物模型可用于卡介菌多糖核酸制剂效力实验。; 徐永革秦黎静王玉英唐溯潘海龙王静刘菊; 关键词：白蛋白类抗变态反应药卡介菌多糖核酸

分枝杆菌检测在生物制品质量控制中的应用被引量：1: 2013年; 根据世界卫生组织和美国食品药品管理局对生物制品中分枝杆菌检测的最新要求，乙型脑炎减毒活疫苗质量控制中首次增加了分枝杆菌检测项目。此文概述了分枝杆菌的特性和分类、不同种类分枝杆菌的致病性以及分枝杆菌检测的常用技术，并介绍了在乙型脑炎减毒活疫苗质量控制中检测分枝杆菌的不同方法。核酸扩增法检测分枝杆菌是我国首次用于生物制品质量控制。; 王静孟丽姚亚夫; 关键词：分枝杆菌生物制品

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王静

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