潘良文 作品数:59 被引量:376 H指数:12 供职机构: 上海出入境检验检疫局 更多>> 发文基金: 国家科技重大专项 国家质检总局科技计划项目 国家出入境检验检疫局科研项目 更多>> 相关领域: 轻工技术与工程 农业科学 生物学 医药卫生 更多>>
实时荧光PCR法鉴定食品中鲑亚科鱼成分 被引量:9 2013年 根据鲑亚科鱼类生长激素基因保守序列设计特异性引物和探针,建立了一种鉴定食品中鲑亚科鱼类成分的实时荧光聚合酶链式反应(PCR)方法。结果表明:建立的检测方法高度特异于鲑亚科鱼类检测,鲑科的另两个亚科——白鲑亚科和茴鱼亚科样品均无扩增曲线。采用5种常见鲑亚科鱼品种可稳定检测到的最低DNA量为100pg;分别将大西洋鲑鱼和北极红点鲑鱼肉混入玉米、鸡肉和鲫鱼样品中测定的相对灵敏度为0.01%(m/m)。检测方法的重复性测试结果表明,Ct值标准偏差和相对标准偏差均在可接受范围内。运用建立的实时荧光PCR检测方法对25份市售实际样品进行测试,有4份标识含有"三文鱼"的样品未检测出鲑亚科鱼类成分。 李进波 李想 谌鸿超 潘良文 李正 宋青关键词:生长激素基因 套式PCR直接检测印度腥黑穗病菌冬孢子 被引量:25 2002年 用印度腥黑穗病菌冬孢子制备模板DNA ,利用印腥特异性引物T3 /T6,T3 /T4和套式PCR(nestPCR)扩增技术直接检测印腥冬孢子 ,检测的灵敏度可达 1个冬孢子。检测时间缩短为 1天。这种简单、快速、灵敏、实用和准确的PCR检测技术适用于口岸印腥检疫的需要 ,解决了常规PCR检测中DNA制备需要萌发冬孢子和检测时间长的难题。 易建平 陶庭典 潘良文 沈禹飞 印丽萍 郑建中关键词:套式PCR 印度腥黑穗病菌 冬孢子 小麦病害 油菜内源特异参照基因寻找与检测研究 被引量:7 2002年 对油菜内源特异参照基因磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶(PEP3-PEPCase,PEP)基因、PCR 检测的引物和相应的靶序列引物进行同源性分析,建立了PEP基因的检测方法。 潘良文 沈禹飞 陈家华 胡永强 陶军关键词:油菜 PCR方法 转基因抗虫保铃棉(Bollgard~ひ)检测方法研究 2003年 运用常规 PCR方法和实时荧光 PCR方法对转基因抗虫保铃棉外源基因 Ca MV 35 S启动子、NOS终止子、标记基因NPT II和目的基因 Cry IA(c)进行了检测。建立了快速、准确的抗虫保铃棉籽转基因成分的 PCR检测方法。 张舒亚 潘良文 沈禹飞 陈家华 胡永强关键词:PCR 生物技术 安全性 采用GS1系统建立非转基因大米制品溯源体系 被引量:2 2015年 2011年欧盟出台2011/884/e U决议,针对中国出口的大米及米制品中转基因成分扩大范围进行检测,加强了对中国出口米制品的转基因管理。自该决议出台以来,中国米制品生产企业产品出口欧盟屡屡受阻。本研究以上海市C食品有限公司生产的非转基因年糕及白粿干为例,从水稻种植、收割、大米碾磨、年糕和白粿干加工、包装、仓储6个关键环节进行信息的收集,并按照GS1系统的格式分别对转基因年糕及白粿干的6个关键环节收集到的信息进行设计和编码,并按照产品的生产加工流程将6组设计的编码组合在一起,形成一套完整的GS1-128码。通过对GS1-128码进行扫描和解读,可以对该公司生产的非转基因年糕和白粿干产品进行溯源,为出口米制品的出口贸易提供溯源保障。 王醒宇 杨捷琳 宋青 袭祝东 李想 丁卓平 潘良文转基因棉花及其加工产品溯源研究 2014年 该文根据UCC/EAN–128码的编码规则,针对转基因籽棉种植、加工、运输、仓储、销售等5个主要环节进行信息收集,对转基因棉花、棉籽油、棉籽粕进行了UCC/EAN–128码的设计与编码。根据《农业转基因生物标识管理办法》的规定,在转基因产品标签上进行标识。将UCC/EAN–128码和转基因产品标识相结合,可对转基因农产品进行溯源,从而为转基因产品管理提供技术支撑。 潘良文 王醒宇 袭祝东 朱清樾 丁卓平关键词:转基因棉花 16S rDNA在乳酸菌菌种鉴定及聚类分析上的应用 被引量:3 2013年 近年来,微生态制剂日益受到市场关注。市售微生态食品以益生菌酸奶或乳酸饮料为主,其中活的乳酸菌含量及菌株特性是决定微生态制剂质量的关键。目前常用的菌种鉴定技术包括生理生化方法或PCR方法,前者工作量大周期长,后者需要专业人员操作,且难以区分死活细菌。本文选取了11种市售的乳酸菌产品,采用MC、MRL、TPY等乳酸菌专用培养基进行乳酸菌计数及菌种分离,进一步用荧光定量PCR方法验证了产品中常规培养法难以分离的双歧杆菌,在此基础上,采用Riboprinter基因指纹图谱分析仪,对分离自11种酸奶样品的16株乳酸菌菌进行了核酸水平的鉴定,建立了16S rDNA聚类分析分子图谱,方便并简化对微生态产品的质量进行"物证相符"的考证,初步分析了目前市场上市售酸奶所用菌种的种属相关性。 杨柳 杨捷琳 谌鸿超 曹敏仪 潘良文关键词:乳酸菌 荧光定量PCR 进口转基因抗草甘膦油菜籽和大豆中CP4-EPSPS基因的检测比较研究 被引量:43 2001年 由于国际上对转基因产品的安全性存在较大争议 ,因此对没有加施标签予以声明的情况下大量进入中国市场的转基因产品进行检测就显得十分迫切且意义重大。本研究以进口转基因抗草甘膦油菜籽和大豆为材料 ,通过比较分析外源的CP4 EPSPS基因的核苷酸序列和表达的氨基酸序列 ,设计出两对不同的引物 ,采用PCR方法分别对转基因油菜籽和大豆中外源的CP4 潘良文 陈家华 沈禹飞 胡永强 陶军 韩伟关键词:抗草甘膦大豆 PCR 转基因作物 谷物中掺杂油菜籽的转基因成分检测 被引量:1 2006年 杂质是谷物及其加工产品中转基因成分污染的一个重要来源,本文对来源于进境谷物中的50份油菜籽样品进行了转基因成分(gox基因、pa t基因和bar基因)检测。通过常规定性PCR检测,在31份样品中检出转基因油菜籽,检出率为62%。本研究使用AB I 7700定量PCR仪对油菜籽样品DNA进行了实时荧光PCR定性检测分析,在32份样品中检出含有转基因油菜籽,检出率为64%。在今后要加强进出口谷物中杂质作物的转基因成分检测。 张舒亚 潘良文关键词:PCR检测 口岸重点监控的转基因棉花T304-40品系定量PCR检测方法 被引量:1 2016年 以我国口岸重点监控的转基因棉花T304-40品系为研究对象,根据其外源插入片段与基因组DNA3'端邻接区序列设计引物和探针,经筛选和优化后,建立了转基因棉花T304-40品系特异性实时荧光定量PCR检测方法。对方法的适用性测试结果表明,建立的实时荧光定量PCR检测方法高度特异于转基因棉花T304-40品系检测,反应效率达94.2%,绝对灵敏度为20拷贝基因组DNA,定量下限为25拷贝基因组DNA。以研制的检测方法建立标准曲线对盲样进行定量分析,结果表明4个盲样的测定值与设定值间的偏差均小于10%。因此,本研究建立的转基因棉花T304-40品系特异性实时荧光定量PCR方法特异性强、灵敏度高,可准确地对棉花及其制品中转基因棉花T304-40成分进行定性或定量检测分析。 刘月明 汪秀秀 刘博 李想 高琴 潘良文关键词:转基因棉花 实时PCR 荧光定量