张毅
- 作品数：90 被引量：358H指数：10
- 供职机构：华南理工大学生物科学与工程学院更多>>
- 发文基金：广东省自然科学基金国家自然科学基金国务院侨办重点学科基金更多>>
- 相关领域：生物学化学工程轻工技术与工程农业科学更多>>
- 广州桑树矮缩病植原体secE基因序列分析与蛋白结构预测
- 2011年
- [目的]预测广州桑树矮缩病植原体secE蛋白的抗原性。[方法]应用PCR技术从典型矮缩症状的桑树植株总DNA中扩增到约400 bp的特异片段,将此片段克隆后与GeneBank中已报道的5种植原体的secE基因进行序列同源性分析,并对克隆基因所编码的蛋白进行理化性质、二级结构、跨膜区以及前导信号序列分析。[结果]该片段长411 bp,编码136个氨基酸的蛋白。桑树矮缩植原体与洋葱黄化植原体同源性最高,核苷酸和编码的氨基酸序列同源率分别为100%和99%。secE蛋白理化性质预测其理论等电点为9.33;二级结构主要为螺旋,其次为折叠和无规则卷曲,无转角;有3个明显的疏水区,易形成跨膜螺旋;有4个明显的抗原区域。[结论]该secE蛋白具有良好的抗原性。
- 胡小华张丽君罗焕亮张毅
- 关键词：植原体同源性蛋白结构
- 基于校园网考试系统设计的研究与实现
- 本文具体分析了系统的体系结构、软硬件开发环境、功能结构、工作流程、数学模型、数据库设计、用户界面设计、系统代码实现以及系统安全性设计。
基于网络的考试与传统的考试相比较，具有减少书面制卷、减少试题泄密的可能性、...
- 张毅
- 关键词：校园网考试系统数据库设计代码实现设计数据库
- 文献传递
- 黄花蒿培养细胞中青蒿素合成代谢的体外调节被引量：27
- 1999年
- 黄花蒿培养细胞通过两步培养积累青蒿素．第１步在含有０．２～０．４ｍｇ／Ｌ６－苄基氨基嘌呤（６－ＢＡ）和３～４ｍｇ／Ｌ吲哚乙酸（ＩＡＡ）的Ｎ６培养基中进行细胞的增殖培养，第２步将培养好的细胞转入含０．２～０．４ｍｇ／Ｌ６－ＢＡ和０．２～０．４ｍｇ／ＬＩＡＡ的改良Ｎ６培养基中进行青蒿素的合成．青蒿素的合成量为１９０μｇ／ｇ干细胞左右．当在第２步培养中加入青蒿素合成前体青蒿酸，青蒿素合成量比仅靠激素诱导提高了３倍多．青蒿素的合成途径是植物固醇合成途径的分支途径，当在青蒿素合成过程即第２步培养中加入固醇生物合成抑制剂双氯苯咪唑和氯化氯胆碱处理，可使代谢向合成青蒿素的方向移动，青蒿素合成量明显提高．经２００ｍｇ／Ｌ氯化氯胆碱处理２ｄ，黄花蒿细胞合成青蒿素量为３７２μｇ／ｇ干细胞；经２０ｍｇ／Ｌ双氯苯咪唑处理４ｄ，黄花蒿细胞合成青蒿素量为１５４０μｇ／ｇ干细胞，比靠激素诱导提高了８倍多，与诱导脱分化细胞的黄花蒿叶中所含的青蒿素（３０００μｇ／ｇ干细胞）处于同一个数量级．以上结果表明：在通过植物激素调节可以合成青蒿素的黄花蒿培养细胞中，缺乏青蒿素合成前体是青蒿素合成量低的重要原因．因此，在青蒿素合成的过程中通过体外调节，?
- 李弘剑张毅郭勇姚汝华
- 关键词：黄花蒿青蒿素植物细胞培养代谢调节
- 乙烯在金属负载型催化剂上氧化反应过程中自激振荡机理研究及数学模拟
- 张毅
- 聚氨酯光交联树脂固定双酶颗粒及在低聚果糖生产中应用
- 本发明公开了一种聚氨酯光交联树脂固定双酶颗粒及在低聚果糖生产中应用。本发明通过将聚氨酯光交联树脂预聚物水溶液和安息香乙醚混合，灭菌后再加入果糖基转移酶溶液和葡萄糖异构酶溶液；搅拌均匀，倒入玻璃模框摊平，紫外光照射固定，得...
- 张毅林晓珊蒋波陈子健
- 文献传递
- 豌豆来源的毒性抗虫白蛋白cDNA在毕赤酵母中异源表达及抗虫毒性分析被引量：2
- 2004年
- 一种来源于豌豆的白蛋白 (PA)对多种昆虫具有明显的毒性作用 .为了进一步研究其抗虫机理 ,采用基因工程的方法富集蛋白质 .将该白蛋白基因克隆到毕赤酵母分泌型表达载体pPICZαA .并导入毕赤酵母菌GS115中表达 .通过PCR和Northern印迹法分析基因的整合及转录 ,对工程菌进行发酵 ,采用两步培养 :第一步富集菌体 ,第二步甲醇诱导工程菌表达重组蛋白 ,并分泌到培养基中 .经过超滤和HPLC分离 ,重组抗虫白蛋白得率约 10mg L .重组蛋白对象鼻虫敏感株表现出很强的毒力 ,半致死剂量LC50 为 4 7,与直接纯化于豌豆种子的白蛋白毒力一致 ,而对象鼻虫抗性株无明显毒力 .
- 李弘剑张毅周天鸿
- 关键词：异源表达毕赤酵母象鼻虫
- 有机溶剂耐受性酵母细胞的脂肪酸组成分析被引量：4
- 2009年
- 本文以出发菌株酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)、筛选所得乙醇耐受菌株Y-c-8和丙酮耐受菌株B-g-5为研究对象,分析测定了三种不同菌株的脂肪酸组成,从而证实有机溶剂会引起酵母细胞脂肪酸成分发生改变,主要是合成更多长链不饱和脂肪酸以适应不良环境。本研究为有机溶剂对微生物细胞的毒性机制提供了理论支持,为有机介质中微生物全细胞催化的工业化应用提供了理论支持。
- 侯雪丹吴培张毅许喜林
- 关键词：酿酒酵母有机溶剂耐受性脂肪酸组成
- β-1，4-半乳糖苷转移酶及其糖基化
- 张毅张俊辉郭勇李弘剑
- 关键词：糖基化
- 蜡样芽孢杆菌聚乙烯醇脱氢酶的表达及酶学特性
- 2023年
- 【背景】聚乙烯醇脱氢酶(polyvinyl alcohol dehydrogenase,PVADH)能够使聚乙烯醇(polyvinyl alcohol,PVA)氧化脱氢,在PVA的生物降解过程中起到重要作用。【目的】从PVA降解菌株蜡样芽孢杆菌DG01中获取pvadh基因,实现PVADH在毕赤酵母中的异源表达并探究其对不同型号PVA的降解特异性,为PVADH在PVA实际降解中的应用提供指导。【方法】通过反转录扩增技术获得长度为1965 bp的pvadh基因片段,构建pPIC9K-cpvadh重组表达质粒并在毕赤酵母GS115中实现异源表达,甲醇诱导表达蛋白,进行分离纯化后对其酶学性质及降解特异性进行研究。【结果】最佳发酵条件下PVADH粗酶液酶活达到54.55 U/mL。经分离纯化后表达蛋白PVADH的比酶活为173.42 U/mg,分子量为67.1 kDa,等电点为6.06,该酶最适作用温度为41℃,最适作用pH值为7.5,在27−32℃、pH 7.0−8.0条件下酶的半衰期超过4 h,1 mmol/L的Ca^(2+)对酶活力有激活作用。PVADH分别作用于PVA1788、PVA1799及PVA2488,Km值分别为1.17、1.49、1.21 mg/mL。【结论】毕赤酵母表达的PVADH产酶及纯化方便,酶学性质稳定,对醇解度小的PVA具有更好的降解能力。
- 张晓东王鑫钰张毅
- 关键词：聚乙烯醇异源表达
- 体外胁迫促进青蒿素在黄花蒿培养细胞中合成的研究被引量：12
- 2001年
- 在黄花蒿细胞悬浮培养合成青蒿素的过程中添加微生物刺激剂和微生物胞外酶刺激剂 ,测定刺激剂对青蒿素合成的影响。采用的微生物刺激剂为霉菌AS34,30 9和AS3 ,346、酵母Kluyberomycesfragilis及细菌AS1,398的提取物 ,微生物胞外酶刺激剂为果胶酶、纤维素酶及半纤维素酶。其中酵母Kluyberomycesfragilis提取物和果胶酶对青蒿素生物合成具有明显的刺激作用。用酵母Kluyberomycesfragilis提取物 (2 0 % )处理黄花蒿培养细胞 3天 ,青蒿素合成量达到每克黄花蒿干细胞 32 0 μg ,比未刺激细胞的青蒿素合成量提高 38% ;将果胶酶(0 2 % )添加到青蒿素合成培养基中处理黄花蒿培养细胞 2天以上 ,青蒿素合成量达到每克黄花蒿干细胞740 μg ,比未刺激细胞的青蒿素合成量提高 3 0 8倍。
- 李弘剑张毅郭勇姚汝华
- 关键词：青蒿素刺激剂植物细胞培养
