刘雅灵
- 作品数：8 被引量：25H指数：2
- 供职机构：中国医学科学院北京协和医学院医学生物学研究所更多>>
- 发文基金：云南省自然科学基金国家高技术研究发展计划卫生部卫生公益性行业科研专项更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学农业科学更多>>
- 低血清培养Vero细胞和流感病毒条件的优化被引量：11
- 2009年
- 目的优化低血清培养Vero细胞和流感病毒的条件,为开发Vero细胞流感疫苗奠定基础。方法分别在DMEM/F12和SLM-199培养基中,添加不同浓度的血清,培养Vero细胞,观察细胞连续传代的生长状态;接种流感病毒后,检测病毒培养液不同pH值、不同浓度TPCK-胰酶和病毒不同接种量对病毒血凝效价的影响。结果用SLM-199在1.0%血清浓度下培养的Vero细胞接种流感病毒血凝效价较高,病毒培养液pH值为7.2,TPCK-胰酶含量为1.0μg/ml,接种病毒MOI为1.0时,72h收获的病毒血凝效价最高。结论已筛选出低血清培养Vero细胞和流感病毒的适宜条件。
- 刘铮孙明波高菁霞马磊林小瑞燕景恩张勇吴忠香刘雅灵姚忠萍廖国阳李卫东
- 关键词：流感病毒VERO细胞
- 柯萨奇B组1型云南分离株MSH／KM9／2009全基因组序列分析被引量：2
- 2013年
- 对2009年分离自云南省昆明市脑膜脑炎儿童的1株柯萨奇B组1型病毒MSH-KM9-09,进行了全基因组的序列测定,并对其分子变异和进化特点进行了分析。采用逆转录-聚合酶链反应(Reverse transcription-polymerasechain reaction,RT-PCR),分段扩增覆盖病毒全长序列的8个重叠片段(未包括多聚腺苷酸尾),并进行序列测定和分析。CVB1MSH-KM9-09病毒株基因组全长7 384个核苷酸(nt),5'端和为3'端分别为741nt和94nt的非编码区,5'和3'非编码区间为一个6 549nt长的开放阅读框,编码一个含2 183个氨基酸的多聚蛋白,编码区内未见核苷酸的插入或缺失。与GenBank库中现有CVB1全基因组序列M16560、pmMC、Tucson B1和CVB1/Nm相比对,整个基因组的核苷酸同源性分别为80.9%、81.6%、80.5%和80%,氨基酸同源性分别为95.6%、95.8%、96.2%和95.6%。首次完成中国CVB1病毒全基因组核苷酸序列的测定,经核苷酸序列同源性比对和进化树分析,证实MSH/KM9/2009株属于CVB1基因型。
- 刘建生邵聪文潘玥朱艳菊邓新强廖宏玮刘雅灵马绍辉
- 关键词：同源性
- 2010年云南省1株ECHO-9病毒全基因序列的遗传特性分析被引量：1
- 2013年
- 为了解云南省手足口病患者标本中分离到的一株ECHO-9病毒基因组特征,对2010年云南省ECHO-9病毒分离株MSH-KM812-2010全基因组序列测序,并与GenBank中其它ECHO-9病毒株基因组序列比对和分析。MSH-KM812-2010基因组长为7 424bp,编码2 203个氨基酸,其结构基因区与其它ECHO-9病毒核苷酸和氨基酸的同源性高于其它型别肠道病毒;而在非结构区,与其它肠道病毒血清型的同源性高于ECHO-9病毒株。VP1系统进化分析显示ECHO-9病毒株可形成A、B和C三个进化分支,MSH-KM812-2010株以及其它中国分离株属于C簇。三个分支之间核苷酸序列的差异大于15.0%可将ECHO-9病毒分为三个基因型。通过重组检测软件3(RDP3)和基本局部比对搜索工具(BLAST)比对分析,发现在非结构区可能存在重组。本文首次对我国分离的ECHO-9病毒全基因组序列的测定和分析,对了解ECHO-9病毒遗传特性具有重要意义。
- 朱艳菊潘玥陈俊英刘雅灵施海晶廖宏玮孙强明马绍辉
- 关键词：全基因组
- 利用生物反应器无血清大规模培养轮状病毒的方法
- 本发明涉及病毒灭活疫苗制备技术领域，具体涉及一种利用生物反应器无血清大规模培养轮状病毒的方法。该利用生物反应器无血清大规模培养轮状病毒的方法包括以下步骤：生物反应器无血清培养Vero细胞、病毒接种和培养。通过每天补加胰酶...
- 周健陈洪波赵红玲陈瑜刘雅灵衡燮寸怡娜刘伯川范琪琪鲍晓林雍国胜张泽珩施锦丽
- 一种脑膜炎奈瑟氏菌培养基
- 本发明提供一种脑膜炎奈瑟氏菌培养基，其特征在于由下列组份组成：氯化钠3.0～8.0g/L，氯化钾0.05～0.2g/L，磷酸氢二钠1.0～6.0g/L，L－谷氨酸5～20g/L，L－精氨酸0.01～0.1g/L，L－色氨...
- 李映波戴宗祥黄秋香毕湖冰张丽旌姬秋彦刘雅灵李剑锋徐维明
- 文献传递
- 一种脑膜炎奈瑟氏菌培养基
- 本发明提供一种脑膜炎奈瑟氏菌培养基，其特征在于由下列组份组成：氯化钠3.0～8.0g/L，氯化钾0.05～0.2g/L，磷酸氢二钠1.0～6.0g/L，L-谷氨酸5～20g/L，L-精氨酸0.01～0.1g/L，L-色氨...
- 李映波戴宗祥黄秋香毕湖冰张丽旌姬秋彦刘雅灵李剑锋徐维明
- 文献传递
- 埃可病毒9型分离株MSH-KM812 VP1基因的遗传特征
- 2013年
- 目的分析2010年昆明市引起手足口病(Hand,foot and mouth disease,HFMD)的病原埃可病毒9型(Echovirus 9,E9)分离株MSH-KM812 VP1基因的遗传特征。方法分别采用RD细胞和Hep-2细胞对3份HFMD患儿粪便标本进行病毒分离,应用RT-PCR法分2段扩增病毒VP1基因,并进行序列测定。应用NCBI BLAST软件对所测定的节段序列进行比对;Omiga软件对所测定的节段序列的核苷酸及推导的氨基酸序列进行编辑、比对和拼接;应用Mega 5.05软件进行序列分析,并与15个E9参考株的VP1基因序列进行比较,构建基因系统进化树。结果从3份HFMD患儿粪便标本中分离到1株E9,命名为MSH-KM812,其VP1区的核苷酸长度为888 bp。MSH-KM812株与其他15个E9参考株的核苷酸和氨基酸序列同源性分别为78.6%～98.0%和87.5%～99.3%,与中国分离株的核苷酸和氨基酸序列同源性分别为92.7%～98.0%和97.0%～99.3%,其中与中国江苏分离株M10MF37 China2010核苷酸和氨基酸序列同源性最高,分别为98.0%和99.3%,而与德国分离株Hill的核苷酸和氨基酸序列同源性最低,分别为78.6%和87.5%。基因进化树分析显示,MSH-KM812分离株与中国江苏分离株M10MF37 China 2010和中国山东分离株05189-SD-CHN-2005-E9属于同一个进化分枝。结论 MSH-KM812分离株为E9,与中国其他分离株同属一个进化分枝。
- 潘玥戴素萍朱艳菊李丽邓新强廖宏玮刘雅灵马绍辉
- 关键词：VP1基因
- 以重配技术制备H1N1流感病毒Vero细胞适应株被引量：12
- 2009年
- 目的以重配技术制备H1N1流感病毒Vero细胞适应株,为以Vero细胞为基质生产流感疫苗奠定基础。方法以流感病毒Vero细胞适应株A/Yunnan/1/2005Va(H3N2)为母本株,与WHO推荐的2007～2008年度北半球流感疫苗生产用毒株A/Caledonia/20/99(H1N1)共同感染SPF鸡胚和Vero细胞,用抗A/Yunnan/1/2005Va(H3N2)抗体筛选重配病毒,在Vero细胞连续传12代,采用血凝抑制试验和RT-PCR鉴定病毒型别。将重配病毒经Vero细胞大量培养,重配前的病毒经鸡胚大量培养,分别经甲醛灭活,制备灭活疫苗,免疫ICR小鼠,检测其免疫原性。结果获得了1株Vero细胞适应的高产H1N1流感病毒株,连续传9代后,病毒血凝滴度维持在512,免疫原性与重配前的毒株相比,差异无统计学意义。结论通过流感病毒Vero细胞适应株与流行株的重配和抗体筛选,可以获得H1N1流感病毒Vero细胞适应株。
- 张英伟李卫东马娜姚忠萍燕景恩张勇刘雅灵杨佳吴忠香廖国阳杨净思李长贵
- 关键词：流感病毒H1N1亚型VERO细胞
