马宁
- 作品数:12 被引量:18H指数:3
- 供职机构:南方医科大学基础医学院更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金海外及港澳学者合作研究基金广东省自然科学基金更多>>
- 相关领域:医药卫生生物学更多>>
- 洋葱内表皮细胞中DNA和RNA染色方法的改进被引量:5
- 2015年
- 目的改进洋葱内表皮细胞中DNA和RNA的染色方法。方法使用固定液固定后,以不同浓度的甲基绿派洛宁混合染色液对洋葱内表皮细胞进行染色处理,与传统方法对比,观察染色效果。结果用甲醇冰醋酸固定液固定后,洋葱内表皮细胞不会发生质壁分离,更容易染色;甲基绿与派洛宁的浓度比为3∶2和1∶1时能在细胞中更加分明地将细胞核染成蓝绿色,将细胞质和核仁染成红色。结论用甲醇冰醋酸固定液固定,甲基绿与派洛宁的浓度比为3∶2至1∶1时能得到较好的实验效果。
- 陈小辉胡乐柯志勇杨翠兰马宁
- 关键词:DNARNA实验教学
- 医学发育生物学公开课教学模式改革初探被引量:3
- 2015年
- 医学发育生物学是一门综合性很强的新兴前沿学科,已成为医学类学生需要掌握的重要医学基础课之一。以公开课的形式在基础医学专业试点开设医学发育生物课程,不但激发了学生的学习热情,开阔了视野,促进理论知识与临床实践相结合,为临床工作打下坚实基础;而且还增进高校教师之间的学习和交流,有助于提升自身教学和科学研究水平。
- 马宁王宏陈小辉张译月张文清
- 关键词:教学模式改革基础医学专业公开课
- cd99l2基因调控斑马鱼白细胞组织间的迁移机制被引量:1
- 2022年
- 白细胞在个体发育、组织再生、先天及适应性免疫过程中都发挥了重要作用,而白细胞迁移至感染或创伤区域是其发挥免疫应答功能的必要条件。CD99L2作为黏附分子在白细胞外渗过程中发挥了重要作用,但其是否参与白细胞组织间的迁移尚不明确。本研究通过TALEN技术敲除斑马鱼(Daniorerio)cd99l2基因,发现cd99l2基因缺失后并不影响斑马鱼正常发育。尾鳍损伤后,cd99l2基因突变体在创伤组织处募集的中性粒细胞与巨噬细胞数目显著减少,进一步研究发现mfap4在cd99l2基因突变体中表达显著降低,这可能是影响巨噬细胞向损伤组织处迁移的原因之一。通过标记血管内皮细胞与中性粒细胞及巨噬细胞的转基因斑马鱼品系,发现受精后60h野生型或突变体斑马鱼中性粒细胞和巨噬细胞通过组织间迁移至创伤组织处,表明cd99l2基因参与了白细胞在组织间的迁移。利用RNA-seq分析发现,cd99l2基因突变体中RNA转录、蛋白质折叠及p450通路等被富集。黏附分子调控转录过程及信号传递在以往研究中已被多次证实。据此,本研究推测Cd99l2作为黏附分子参与了白细胞迁移过程中的级联信号通路。综上所述,本研究通过对斑马鱼的研究,发现了cd99l2基因在白细胞迁移过程中新的作用,有望对炎症免疫异常相关疾病提供理论基础。
- 卢荆澳黄春燕林芷茵唐政马宁黄志斌
- 科研平台在医学发育生物学实验教学中的应用被引量:1
- 2019年
- 实验教学是医学基础课程教学过程中的重要组成部分,也是锻炼学生动手能力的好机会,对医学院校的本科生尤为重要。文章针对医学发育生物学课程实验教学开展实验教学改革以及总结整个教学过程的心得体会,希望对其他课程实验教学改革提供可借鉴的经验。
- 马宁
- 关键词:实验教学
- 靛玉红抗斑马鱼胚胎血管生成活性机制研究被引量:5
- 2012年
- 目的:研究靛玉红抗血管生成作用及相关机制。方法:以tgfli1:eGFP(+/-)斑马鱼为模型,实验分空白对照组、二甲基亚砜组、靛玉红组(15μM、30μM、90μM)、阳性SU5416对照组,在12hpf时加药,于48hpf时在荧光显微镜下观察其体节间血管生成情况,并进行定量分析。运用整体原位杂交的方法和RT-PCR技术检测flk1基因的表达情况。结果:与空白对照组相比,靛玉红各浓度组体节间血管长度有显著性差异(P<0.01),并呈剂量依赖性抑制;与空白对照组相比,靛玉红对斑马鱼胚胎flk1mRNA表达有明显抑制作用,并随浓度的增高而增加。结论:靛玉红(15μM~90μM)具有抑制斑马鱼胚胎体节间血管生成的作用,其机制可能是通过阻断VEGF/VEGFR2信号通路的某个环节来发挥作用。
- 郑浩江许文学刘晓伟杨健马宁陈小辉邢学锋
- 关键词:靛玉红血管生成血管内皮生长因子受体斑马鱼
- 一种转基因斑马鱼在制备特异标记原始红系造血过程的动物模型中的应用
- 本发明公开了一种转基因斑马鱼在制备特异标记原始红系造血过程的动物模型中的应用。本发明发现斑马鱼cd99l2基因具有与斑马鱼原始红系造血相一致的时空表达谱,仅在斑马鱼原始造血阶段的红细胞中高表达。本发明通过构建Tg(cd9...
- 马宁卢荆澳黄春燕林芷茵彭昱轩唐政林宇
- 文献传递
- 一种斑马鱼原始造血髓系细胞突变体的研究
- 2011年
- 目的斑马鱼原始造血髓系细胞突变体1276的表型鉴定及性状分析。方法利用化学诱变剂N-乙基-N-亚硝基脲诱变野生型AB斑马鱼雄鱼的精原细胞,突变基因组保留传代,采用中性红染液对F3代的胚胎进行细胞化学染色,筛选原始造血髓系细胞突变体。并通过细胞化学染色及检测不同谱系血细胞标记基因在不同发育阶段的mRNA及蛋白的表达水平,对其中之一突变体1276进行表型鉴定及性状分析。结果成功筛选1296个F2家族,2140个突变基因组,发现中性红染色信号异常突变体12个。突变体1276在原始造血阶段,中性红染色全身信号缺失,小胶质细胞标记基因apoe表达缺失,巨噬细胞标记基因l-plastin,头部表达减少,背主动脉壁腹侧区域表达正常,粒细胞、红细胞均未见异常;在定向造血阶段,巨噬细胞仍存在异常,但粒细胞、红细胞、淋巴细胞以及造血干细胞均未见明显异常。结论突变体1276在原始造血阶段,巨噬细胞存在功能障碍,以及不同程度发育及迁徙异常;在定向造血阶段这一性状并未得到代偿。
- 颜广刘伟戴朝霞王鹍刘靖赵灵凤黄志斌陈小辉马宁孟萍许孟畅温子龙张文清
- 关键词:中性红小胶质细胞
- 一种新的造血和血管发育缺陷斑马鱼172突变体的基因鉴定与功能的初步研究
- 研究背景:
造血过程是各种血细胞的发育、成熟的过程,是一个多阶段、多步骤、受到多个因子调控涉及多个造血解剖位置的复杂而又有序的动态过程,并贯穿于生命体的一生。尽管各种血细胞组分的生理功能不同,但是它们有着同一祖先-...
- 马宁
- 关键词:造血干细胞基因鉴定血管发育化学诱变剂
- 斑马鱼红系造血缺陷突变体的正向遗传学筛选被引量:2
- 2010年
- 目的化学遗传学方法大规模筛选并初步鉴定所获得具有不同红系造血缺陷表型的斑马鱼突变体。方法乙基亚硝基脲(ENU)诱导雄性斑马鱼突变(founder),将其与野生型AB雌性斑马鱼交配产生F1代,源自不同来源的founder的F1代杂交产生F2家族。在F2代同家族内自交所产生的F3代胚胎中,用以βe1为探针,实施整体原位杂交实验,进行红系造血缺陷突变体筛选,并针对所筛选到的突变体在不同造血过程缺陷表型进行分类研究。结果和结论筛选得到4个βe1基因表达缺失突变体,其中2个为红系特异性造血缺陷突变体,另外2个突变体同时存在红系和淋系造血缺陷。
- 霍中军温宗华刘靖王鹍黄志斌戴朝霞马宁颜广陈英华陈小辉刘伟马品芸罗伟豪赵颖樊淑赵嘉佳黄红辉温子龙张文清
- 关键词:斑马鱼红系造血
- 斑马鱼髓系造血细胞缺陷突变体的大规模遗传筛选
- 2010年
- 目的通过大规模化学遗传学方法筛选斑马鱼髓系造血缺陷突变体。方法利用化学诱变剂乙基亚硝基脲(ENU)将雄鱼精原母细胞诱变,通过与AB野生型雌性斑马鱼交配产生F1代,源自不同founder(F0)的F1代同胞之间交配产生F2家族,F3代来F2家族同胞内交配,并分别以中性红和苏丹黑B染色筛选巨噬细胞和粒细胞缺陷突变体。结果我们筛选了350个F2家族,共1424对鱼。初步筛选到6个斑马鱼髓系造血系统的突变体,其中3个突变体为中性红染色异常,另3个突变体为苏丹黑染色异常,表明以上突变体可能存在巨噬细胞或粒细胞的发育障碍。结论 ENU化学诱变和中性红及苏丹黑B染色筛选斑马鱼髓系造血缺陷突变体是简单、价廉、有效的化学遗传学方法。通过保留突变体对后代进行进一步的研究分析,有望鉴定和克隆影响斑马鱼髓系造血新的基因或已知基因的新的调控途径。
- 戴朝霞颜广陈英华刘伟霍中军温宗华刘靖王鹍黄志斌马宁陈小辉马品芸罗伟豪赵颖樊淑黄红辉温子龙张文清
- 关键词:斑马鱼中性红