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蔡欣: 作品数：10 被引量：38H指数：4; 供职机构：宁夏医科大学检验学院更多>>; 发文基金：国家自然科学基金宁夏回族自治区自然科学基金国家级大学生创新创业训练计划更多>>; 相关领域：医药卫生更多>>

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ERO1α DNA甲基化在高同型半胱氨酸血症致肝脏脂代谢紊乱中作用的研究: 目的探讨HHcy与脂代谢相关基因ERO1α mRNA和蛋白表达的改变，以及ERO1αDNA甲基化在引起ApoE-//-鼠肝脏脂代谢紊乱形成过程中的作用，明确HHcy在ApoE-//-鼠脂代谢紊乱形成中对ERO1α表达及其...; 蔡欣; 关键词：DNA甲基化脂代谢紊乱高同型半胱氨酸血症; 文献传递

Hcy对动脉粥样硬化小鼠肝脏脂质代谢的影响被引量：11: 2014年; 目的探讨同型半胱氨酸(Hcy)促进ApoE基因敲除(ApoE-/-)鼠动脉粥样硬化(AS)形成同时是否对肝脏脂质代谢产生影响。方法取健康5周龄雄鼠(SPF级C57BL/6J)12只作为正常对照组,饲以普通饮食;另选5周龄雄性纯合子ApoE-/-鼠(SPF级近交系C57BL/6J)36只,分为模型对照组、高同型半胱氨酸血症(HHcy)组、叶酸和VB12干预的干预组,每组12只,饲养18周后,生化分析仪测定血清Hcy及血脂总胆固醇(CHOL)、三酰甘油(TG)、高密度脂蛋白(HDL)、低密度脂蛋白(LDL)水平,主动脉冰冻切片苏木素-伊红(HE)染色后观察并测量斑块面积;肝脏组织冰冻切片油红O染色观察肝脏细胞脂质变化,酶法测定肝脏脂质代谢改变。结果与正常对照组比较,HHcy组血清Hcy、LDL、TG、CHOL水平明显增高(P<0.01),分别升高约2.3、2.8、5.0、10.7倍,HDL下降约64%(P<0.01);干预组Hcy、LDL、CHOL水平较HHcy组分别下降43%、34%、21%,HDL水平增高36%(P<0.05),TG无明显变化;HE染色可见3组ApoE-/-鼠主动脉均有AS形成,其中HHcy组主动脉斑块面积28.2×104μm2,明显大于模型对照组的17.0×104μm2(P<0.05),干预组斑块面积17.1×104μm2,较HHcy组减轻(P<0.05)。肝脏油红O染色HHcy组脂质积累明显;干预组肝细胞内有少量脂质沉积;氧化酶法检测发现HHcy组肝脏组织中CHOL和TG分别是正常对照组的2.2、2.8倍(P<0.01);干预组肝脏CHOL、TG水平与HHcy组比较下降30%、33%(P<0.01)。结论 Hcy促进ApoE-/-鼠AS形成的同时加速肝脏脂代谢紊乱。; 卢冠军杨安宁蔡欣哈丽娜杨晓玲姜怡邓; 关键词：脂类代谢动脉粥样硬化

高同型半胱氨酸血症经内质网途径影响ApoE-/-鼠肝细胞凋亡被引量：4: 2014年; 目的观察高同型半胱氨酸血症(HHcy)对ApoE-/-鼠肝细胞凋亡的影响并探讨其可能机制。方法 36只ApoE-/-小鼠随机分为3组,每组12只:①ApoE-/-对照组(ApoE-/-group):普通饮食饲养;②蛋氨酸饮食组(methionine diet group):普通饮食+1.7%蛋氨酸饲养;③干预组(treatment group):普通饮食+1.7%蛋氨酸+0.006%叶酸及0.0004%VitB12饲养。另取12只正常C57 BL/6J小鼠给予普通饮食,作为正常对照组(normal control group)。饲养20周后,ELISA测定血清同型半胱氨酸(Hcy)浓度和肝组织Caspase-12含量;全自动生化分析仪测定血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)和天门冬氨酸氨基转移酶(AST)活性;DAPI染色法观察肝组织细胞核形态;电镜观察肝脏组织细胞超微结构。结果与正常对照组和ApoE-/-对照组相比,蛋氨酸饮食组Hcy浓度分别增高2.4倍(P<0.01)和2.5倍(P<0.01);ALT活性分别增高2.0倍(P<0.05)和1.2倍(P<0.05);各组AST活性无明显差异;肝组织切片DAPI染色及电镜结果显示,蛋氨酸饮食组小鼠肝细胞出现凋亡的形态学改变,蛋氨酸饮食组小鼠肝细胞线粒体肿胀、浓缩,内质网大量增生,可见细胞凋亡前体及凋亡小体;Caspase-12活性检测显示蛋氨酸饮食组较正常对照组增高(P<0.05)。与蛋氨酸饮食组比较,干预组小鼠血清Hcy浓度降低,Caspase-12活性下降,肝细胞病理变化减轻,血清ALT活性明显降低。结论 HHcy可能通过影响ApoE-/-鼠内质网功能改变,引起肝细胞凋亡。; 王磊田珏曹成建杨程蔡欣周龙霞杨晓玲姜怡邓; 关键词：高同型半胱氨酸血症内质网肝细胞

动脉粥样硬化患者基质金属蛋白酶组织抑制剂1基因DNA高甲基化的研究被引量：7: 2013年; 目的:探讨动脉粥样硬化(AS)患者基质金属蛋白酶组织抑制剂1(TIMP-1)基因DNA启动子区甲基化修饰的改变。方法:选择经颈部多普勒超声确诊AS患者40例以及正常者作为对照组40例,采用ELISA法测定血浆TIMP-1蛋白水平,荧光定量PCR检测外周血TIMP-1的mRNA表达,巢氏降落式甲基化特异性PCR(ntMSP)测定外周血TIMP-1基因DNA启动子区的甲基化程度。结果:AS组血浆TIMP-1含量明显降低,外周血TIMP-1的mRNA表达也显著低于对照组(P<0.05),TIMP-1基因启动子区DNA甲基化程度显著高于对照组(P<0.05)。结论:AS患者TIMP-1含量降低,其机制可能与TIMP-1基因启动子区高甲基化有关。; 杨程田珏蔡欣王磊曹成建杨晓玲陈久凯蒲雅洁姜怡邓; 关键词：DNA甲基化动脉粥样硬化

ABCA1、ACAT1 DNA甲基化在Hcy致THP-1单核源性泡沫细胞胆固醇流出中作用研究被引量：9: 2014年; 目的探讨ABCA1、ACAT1 DNA甲基化在同型半胱氨酸(Hcy)致THP-1单核源性泡沫细胞胆固醇流出中的作用。方法复制泡沫细胞模型,用50、100、200、500μmol·L-1Hcy和100μmol·L-1Hcy+叶酸+维生素B12(100+F+V)干预,并设对照组(0μmol·L-1Hcy)。油红O染色观察泡沫细胞形成,巢式降落式甲基化特异性PCR(nMS-PCR)检测ABCA1、ACAT1 DNA甲基化水平,并分析两者比值变化;ELISA-like法检测DNA甲基转移酶(DNMTs)活性;化学比色法分析细胞内胆固醇含量。结果成功复制了泡沫细胞模型;给予不同浓度Hcy刺激后,ABCA1 DNA甲基化改变呈上升趋势,ACAT1 DNA甲基化改变呈下降趋势,给予100+F+V干预后可逆转上述变化,其中ABCA1 DNA甲基化改变更明显;同时,不同浓度Hcy可使泡沫细胞内DNMTs活性和胆固醇含量增加。结论 ABCA1和ACAT1 DNA甲基化的改变参与了Hcy致THP-1单核源性泡沫细胞胆固醇流出,DNMTs可能起关键调控作用。; 杨安宁王磊周龙霞赵丽王艳华蔡欣曹成建杨程陈久凯马文斌姜怡邓; 关键词：酰基辅酶A DNA甲基化胆固醇流出

同型半胱氨酸对肝细胞增殖及CyclinD1、ALT和AST表达的影响被引量：4: 2014年; 目的探讨同型半胱氨酸(Hcy)对肝细胞增殖及细胞周期素D1(CyclinD1)、丙氨酸氨基转移酶(ALT)和天门冬氨酸氨基转移酶(AST)表达的影响。方法将HL-7702细胞体外常规培养,分别用0、50、100、200、500μmol/L Hcy刺激细胞,分别于刺激后6、12、24h采用MTT法检测肝细胞的增殖情况;采用荧光定量PCR(RT-qPCR)检测CyclinD1mRNA的表达;采用微板法检测各组细胞培养液中ALT和AST的变化。结果不同浓度Hcy刺激肝细胞不同时间后,细胞的增殖受到抑制,其中100、200、500μmol/L Hcy组与对照组比较差异有统计学意义(P<0.01),24h作用最明显;不同浓度Hcy刺激肝细胞24h后,CyclinD1mRNA的表达显著下降(P<0.01),细胞培养液中ALT和AST水平显著升高(P<0.01)。结论 Hcy可以抑制肝细胞增殖,并引起CyclinD1的mRNA表达下降,ALT和AST释放增多。; 蔡欣杨晓玲杨程曹成建王磊田珏张焱姜怡邓; 关键词：肝细胞细胞增殖同型半胱氨酸细胞周期素D1 丙氨酸转氨酶天冬氨酸氨基转移酶

更正"ERO1α介导同型半胱氨酸诱导的肝细胞内质网应激"[世界华人消化杂志2014;22(34):5228-5234]: 2019年; 1更正《世界华人消化杂志》2014年12月第22卷第34期第5228-5234页《ERO1α介导同型半胱氨酸诱导的肝细胞内质网应激》一文做出如下更正:第5231页图3中的B图应为图1.; 周龙霞杨安宁陈久凯赵丽王艳华刘现梅蔡欣张鸣号姜怡邓曹军; 关键词：同型半胱氨酸内质网应激肝细胞华人介导

DNMT3B mRNA 3’非编码区报告基因载体的构建与功能验证: ＜正＞目的构建用于鉴定microRNA靶基因的报告基因系统并进行功能验证,为研究动脉粥样硬化的发生发展机制奠定良好基础。方法在pGL3-control载体的荧光素酶基因下游克隆位点插入DNA甲基转移酶3B（DNA met...; 曹成建杨晓玲王磊蔡欣田珏马胜超曹军姜怡邓; 文献传递

ERO1α介导同型半胱氨酸诱导的肝细胞内质网应激被引量：3: 2014年; 目的:探讨内质网氧化还原酶-1α(endoplasmic reticulum oxidoreductin 1α,ERO1α)在同型半胱氨酸(homocysteine,Hcy)诱导的肝细胞内质网应激(endoplasmic reticulum stress,ERS)中的作用及机制.方法:培养人肝细胞,用Hcy(100μmol/L)干预,同时设对照组,使用酶联免疫法(ELISA)检测ERS相关蛋白葡萄糖调节蛋白78(glucoseregulated protein 78,GRP78)、X盒结合蛋白-1(X-box binding protein-1,XBP-1)、内质网类似激酶(protein kinase RNA-like endoplasmic r e t i c u l u m k i n a s e,P E R K)及激活转录因子6(activating transcription factor 6,ATF6)的水平;用不同浓度Hcy(0、50、100、200、500μmol/L)和100μmol/L Hcy+叶酸+维生素B12(VB12)干预,运用实时定量PCR和Western blot检测ERO1αm RNA和蛋白水平;构建ERO1α基因重组质粒和RNA干扰片段并感染肝细胞,检测ERO1αm RNA和蛋白表达变化;采用ELISA法检测其对ERS相关蛋白的调控作用.结果:与对照组比较,Hcy组GRP78、ATF6、P E R K、X B P-1水平升高(P<0.01,P<0.01,P<0.05,P<0.01);不同浓度Hcy干预后,肝细胞内ERO1αm RNA及蛋白水平呈下降趋势,且随着Hcy浓度的增加而减少(P<0.01),呈剂量依赖关系;将ERO1α重组质粒转染肝细胞后,ERO1αm RNA及蛋白表达明显增加(P<0.01);将三个不同的ERO1αsi RNA片段转染肝细胞后,ERO1αm RNA及蛋白表达降低(P<0.01),其中si RNA2作用最明显(P<0.01);与Hcy组相比,Hcy+p ERO1α组GRP78、XBP-1、PERK及ATF6均明显降低(P<0.01),而Hcy+si RNA2组均明显升高(P<0.01).结论:Hcy可能通过下调ERO1α引起肝细胞GRP78-XBP-1/PERK/ATF6表达增加促进ERS发生.; 周龙霞杨安宁陈久凯赵丽王艳华刘现梅蔡欣张鸣号姜怡邓曹军; 关键词：同型半胱氨酸内质网应激肝细胞

DNMT3B mRNA3′非编码区报告基因载体的构建与功能验证: 2014年; 目的构建用于鉴定microRNA(miRNA)靶基因的报告基因系统并进行功能验证,为研究动脉粥样硬化的发生发展机制奠定良好基础。方法在pGL3-control载体的荧光素酶基因下游克隆位点插入DNA甲基转移酶3B(DNMT3B)3′非编码区序列,经酶切、测序验证是否插入及正确性。生物信息学分析DNMT3B与miRNA-125b的靶向关系,并用miRNA-125b过表达载体与所构建载体共转染人血管平滑肌细胞,双荧光素酶报告基因系统检测荧光素酶活性。结果成功构建了DNMT3B3′非编码区报告基因载体,经酶切和测序鉴定正确;共转染细胞24h后,双荧光素酶报告基因系统检测荧光素酶活性,结果显示与空载体对照组相比,构建载体组荧光素酶活性下降了54.8%(P<0.01)。结论成功构建了DNMT3BmRNA 3′非编码区报告基因载体,且提示miRNA-125b靶向调控了DNMT3B。; 曹成建杨晓玲王磊杨程蔡欣徐华王洁姜怡邓; 关键词：DNA甲基转移酶3B 微RNAS 表遗传学

蔡欣

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