杨晓玲 作品数:98 被引量:272 H指数:9 供职机构: 宁夏医科大学基础医学院 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 宁夏回族自治区自然科学基金 宁夏回族自治区教育厅基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 文化科学 农业科学 生物学 更多>>
miR-125b甲基化在同型半胱氨酸促进血管平滑肌细胞增殖中的作用 被引量:8 2015年 目的探讨同型半胱氨酸(homocysteine,Hcy)促进血管平滑肌细胞增殖中miR-125b甲基化的作用。方法原代培养人脐静脉平滑肌细胞(VSMCs),并分为空白对照组(0μmol·L-1Hcy),不同浓度Hcy干预组(50、100、200及500μmol·L-1Hcy),以荧光定量PCR(qRT-PCR)法检测miR-125b的表达变化;利用miR-125b前体和抑制剂转染VSMCs后MTT法检测细胞增殖活性;生物信息学分析miR-125b启动子区Cp G岛分布情况,巢式降落式甲基特异性PCR(nt-MSP)法检测miR-125b甲基化状态的变化;并利用DNA甲基化酶抑制剂5-氮杂胞苷(AZC)干预细胞后再次检测miR-125b的表达。结果与对照组相比,100,200及500μmol·L-1Hcy可使miR-125b的表达水平降低,差异有显著性(P<0.01);miR-125b前体可以抑制VSMCs增殖,而miR-125b抑制剂可以促进VSMCs增殖(P<0.01);以miR-125b基因上游3 700 bp作为研究对象,生物信息学分析发现miR-125b启动子区含有一个长度为792bp(1881-2672区域)的CpG岛,且在Hcy干预下miR-125b的甲基化水平增强(P<0.01);而用AZC干预后,发现miR-125b表达上调,差异有显著性(P<0.05)。结论 Hcy可能通过下调miR-125b表达从而促进VSMCs增殖,可能通过上调miR-125b基因甲基化水平从而下调miR-125b表达。 刘现梅 曹成建 田珏 赵丽 孔繁琪 周龙霞 陈久凯 王艳华 杨晓玲 贾月霞 姜怡邓关键词:同型半胱氨酸 DNA甲基化 血管平滑肌细胞 动脉粥样硬化 同型半胱氨酸对血管平滑肌细胞中PTEN甲基化的影响 2014年 目的:探讨同型半胱氨酸(homocysteine, Hcy)磷酸酶与张力蛋白同源缺失性基因(phosphatase and tensin homology deleted on chromosome ten, PTEN)启动子区DNA甲基化的影响。方法原代培养血管平滑肌细胞(VSMCs),100 M Hcy刺激48h后,以实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测PTEN mRNA表达水平的变化,western blot检测PTEN蛋白表达变化;生物信息学分析PTEN启动子区CpG岛,巢式降落时甲基化特异性PCR(nMS-PCR)检测PTEN DNA甲基化水平。结果与正常对照组相比(0 M Hcy),给予100 M Hcy刺激后,VSMCs中PTEN mRNA及蛋白表达水平均降低;其启动子区存在数个CpG岛,其DNA甲基化水平升高。结论 Hcy可下调VSMCs中PTEN的表达,而PTEN DNA启动子区的高甲基化可能在这一过程中起到关键调控作用。 徐弋 曹成建 赵丽 徐华 韩学波 杨晓玲 田珏 姜怡邓关键词:同型半胱氨酸 PTEN DNA甲基化 血管平滑肌细胞 动脉粥样硬化 氧化苦参碱对感染性休克大鼠肾组织JAK_2/STAT_3信号通路的影响 被引量:5 2013年 目的:观察氧化苦参碱(oxymatrine,OMT)对感染性休克大鼠肾组织JAK2/STAT3信号通路的影响。方法:采用大鼠盲肠结扎穿孔法(cecal ligation and puncture,CLP)复制大鼠感染性休克模型,随机将56只SD大鼠分为假手术组、OMT对照组、模型组(CLP)、CLP+OMT高、中、低剂量组(52,26,13 mg·kg-1)、阳性对照组(CLP+地塞米松10 mg·kg-1)。光镜下观察大鼠肾组织病理学改变,采用尿酶法测定血清尿素氮(BUN)含量,RT-PCR法测定肾组织肿瘤坏死因子-α(TNF-α),白细胞介素-1β(IL-1β)mRNA的表达;Western blot测定肾组织JAK2,STAT3的表达;放射免疫分析法测定肾组织匀浆中TNF-α及IL-1β蛋白含量的改变。结果:不同剂量的OMT能抑制肾组织JAK2,STAT3的活化(P<0.05),减少JAK2,STAT3的蛋白表达(P<0.05)及TNF-α,IL-1βmRNA的表达(P<0.05),降低肾组织匀浆中TNF-α及IL-1β的含量(P<0.05),降低血清BUN含量(P<0.05),改善肾组织充血、水肿和炎性细胞浸润等病变,并且该作用在OMT高、中剂量组与阳性对照组的结果相一致。结论:OMT能通过抑制JAK2/STAT3信号通路的活化,减少肾组织TNF-α,IL-1β等促炎因子的表达,进而对感染性休克大鼠肾损伤性病变发挥治疗作用。 王秀玉 张鸣号 杨美玲 姜怡邓 李桂忠 杨晓玲 徐华 曹军关键词:氧化苦参碱 感染性休克 JAK2 叶酸、维生素B12对HHcy小鼠血清TNF-α、IL-6干预作用的研究 2014年 目的:探讨叶酸、维生素B12(VB12)对高同型半胱氨酸血症(HHcy)ApoE-/-小鼠血清TNF-α、IL-6的干预效应。方法健康5周龄雄性纯合子ApoE-/-小鼠(SPF级近交系)36只,随机平均分为三组:模型对照组、HHcy组、干预组;另选健康5w龄雄鼠(SPF级C57BL/6J)12只作为正常对照组。喂养18w后处死,眼球取血并采用酶联免疫吸附实验(Elisa)方法测定血清Hcy及TNF-α、IL-6水平。结果 HHcy组血清同型半胱氨酸Hcy、TNF-α、IL-6水平明显高于正常对照组与模型对照组(P<0.01);干预组Hcy、TNF-α(P<0.01)、IL-6(P<0.05)水平与HHcy组相比均有所下降。结论叶酸、VB12可有效降低HHcy ApoE-/-小鼠血清TNF-α、IL-6的水平,缓解HHcy引起的血管损伤。 焦运 周龙霞 杨安宁 陈久凯 杨晓玲 曹军 姜怡邓关键词:叶酸 维生素B12 高同型半胱氨酸血症 以留学生病理生理学课程体系建设为契机的教学探索 2014年 留学生的教学水平是当前衡量各高校综合能力的重要指标,建立良好的课程体系对提高留学生教学质量至关重要。病理生理学作为医学留学生的必修课程,是沟通基础医学与临床医学的桥梁学科。以建立留学生病理生理学课程体系为契机,探索适合留学生的病理生理学的教学方法及手段,旨在提高教学质量。 杨文军 李桂忠 姜怡邓 徐华 田珏 杨晓玲关键词:病理生理学 留学生 全英文教学 两种方法复制水肿模型的实验比较 2013年 目的:比较蟾蜍后肢灌流法与蟾蜍体循环灌流法复制水肿模型的优劣。方法:分别制备蟾蜍后肢及蟾蜍体循环灌流标本,依次按顺序灌流:(1)3.65%葡萄糖溶液20-25cm水柱高度(等渗常压晶体)灌流,(2)25%葡萄糖溶液20-25cm水柱高度(高渗常压晶体)灌流,(3)3.65%葡萄糖溶液80-100cm水柱高度(等渗高压晶体)灌流,(4)6%中分子右旋糖酐溶液20-25cm水柱高度(等渗常压胶体)灌流。结果:蟾蜍后肢灌流法与体循环灌流法在等渗常压晶体灌流、高渗常压晶体灌流及等渗常压胶体灌流时增加(或减轻)数量无显著性差异(P>0.05),而在等渗高压晶体灌流时,蟾蜍体循环灌流法比蟾蜍后肢灌流法增加数量有显著性差异(P<0.05)。结论:复制水肿模型蟾蜍体循环灌流法优于蟾蜍后肢灌流法。 赵迅霞 杨晓玲 李桂忠 姜怡邓 田珏 贾月霞关键词:水肿 MST1启动子区DNA低甲基化在ApoE^(-/-)小鼠肾损伤中的作用 被引量:1 2016年 目的探讨哺乳动物不育系20样激酶1(MST1)及其DNA甲基化在载脂蛋白E基因敲除(Apo E-/-)小鼠肾损伤中的作用及意义。方法实验动物分为2组:(1)Apo E-/-组(n=10):雄性Apo E-/-鼠饲以高蛋氨酸饮食;(2)对照组(n=10):雄性C57BL/6J鼠饲以高蛋氨酸饮食。喂养14周后,全自动生物化学分析仪测定小鼠血清肌酐和尿素氮水平;PAS染色及透射电子显微镜观察小鼠肾脏组织损伤情况;实时定量PCR及Western blot分别检测小鼠肾脏中MST1 mRNA和蛋白表达水平。巢式甲基化特异性PCR(n MS-PCR)检测小鼠肾脏MST1 DNA甲基化水平。结果与对照组比较,Apo E-/-组血清肌酐和尿素氮分别升高了1.1倍和1.6倍(P<0.01);PAS染色和透射电镜结果显示,Apo E-/-组较对照组肾脏明显损伤;Apo E-/-小鼠肾脏MST1表达分别与血清肌酐和尿素氮水平呈正相关(R2=0.7571,P=0.0012;R2=0.7342,P=0.0015);n MS-PCR结果显示,Apo E-/-组肾脏中MST1 DNA甲基化水平较对照组显著降低(P<0.01)。结论 MST1表达上调可能在Apo E-/-小鼠肾损伤中发挥重要作用,而MST1启动子区DNA低甲基化改变可能是MST1表达上调的重要机制。 卢冠军 马胜超 和杨杨 徐灵博 毛彩艳 郭伟 张辉 王艳华 田珏 杨晓玲 姜怡邓关键词:肾损伤 DNA甲基化 载脂蛋白E APOE-/-小鼠 一种用于描记家兔呼吸曲线的组合装置 一种用于描记家兔呼吸曲线的组合装置。它是把传统的玛丽氏气鼓和现在的张力换能器通过挂钩和悬挂线连接到一起,玛丽氏气鼓远端用乳胶管将张力强度和频率传输至动物气管插管的一个侧管,避免了单纯用张力换能器描记呼吸曲线造成的张力换能... 姜怡邓 杨晓玲 赵迅霞 徐华 杨安宁文献传递 外源性硫化氢对人脐静脉平滑肌细胞钙化的影响及其可能机制 被引量:2 2015年 目的探寻外源性硫化氢对人脐静脉平滑肌细胞(HUSMC)钙化的影响及机制。方法在成功复制HUSMC钙化模型基础上,给予硫氢化钠(Na HS)进行培养,实验分为6组(n=6):对照组、钙化组、单纯Na HS组(8.0×10-6mol/L Na HS)、钙化+Na HS高剂量组(4.0×10-5mol/L Na HS)、钙化+Na HS中剂量组(8.0×10-6mol/L Na HS)、钙化+Na HS低剂量组(1.6×10-6mol/L Na HS)。对各组HUSMC进行Von Kossa染色、显微图像分析,并检测各组碱性磷酸酶活性、钙离子含量,荧光定量PCR法检测细胞中骨桥蛋白mRNA的表达,放射免疫法检测培养液中骨桥蛋白含量。结果硫化氢可明显减少HUSMC钙结节的聚集生长,Von Kossa染色显示细胞聚集处棕褐色钙结节较钙化组明显减轻,差异有统计学意义(P<0.05);钙化+Na HS高剂量组、钙化+Na HS中剂量组、钙化+Na HS低剂量组钙化细胞百分比、细胞钙含量和碱性磷酸酶活性较钙化组明显降低,差异有统计学意义(P<0.05),培养液中骨桥蛋白含量及其细胞内骨桥蛋白mRNA表达均较钙化组减少,差异有统计学意义(P<0.05)。结论硫化氢可以减轻HUSMC钙化的程度,其机制可能是通过下调细胞内骨桥蛋白mRNA的表达,进而导致骨桥蛋白生成减少而实现的。 刘爽 武慧娟 昝海英 杨晓玲 徐华 张鸣号 曹军 李桂忠关键词:细胞钙化 平滑肌细胞 硫化氢 骨桥蛋白 同型半胱氨酸对FABP4启动子活性的影响 被引量:1 2018年 目的通过克隆脂肪酸结合蛋白4(FABP4)基因启动子,确定其活性核心区和功能片段,分析心血管疾病独立危险因子同型半胱氨酸(Hcy)对FABP4启动子活性的影响。方法应用生物信息学预测FABP4基因启动子区顺式转录作用元件和反式作用因子,以pGL3-Basic为载体,采用基因重组法构建启动子截取片段,转染HEK-293A细胞,观察不同截取片段的荧光素酶活性变化,确定活性最强的片段。进一步将核心启动子片段(-2000/-1)转染巨噬细胞,观察不同浓度Hcy和DNA甲基化抑制剂5-氮杂胞苷(AZC)对FABP4基因启动子活性的影响。结果不同长度截取片段转染HEK-293A细胞后检测荧光素酶活性结果显示,与pGL3对照组比较,-2000/-1片段转录活性最强。将核心启动子片段(-2000/-1)转染巨噬细胞并用不同浓度Hcy干预后,与0μmol/L Hcy组比较,100和200μmol/L Hcy组启动活性升高;与100μmol/L Hcy组比较,在100μmol/L Hcy基础上用AZC干预后,FABP4基因启动活性升高(P <0.05)。结论成功克隆FABP4启动子的4个片段,且确定FABP4基因核心启动子位于-2000/-1片段;Hcy可以促进FABP4基因核心启动子片段活性,补充AZC后可以进一步促进Hcy引起的FABP4启动子活性升高。 熊建团 李旭生 杨安宁 杨松昊 邓梅 王磊 高源 李南 杨晓玲 贾月霞 姜怡邓关键词:启动子活性 同型半胱氨酸