王利月
- 作品数:19 被引量:14H指数:2
- 供职机构:河北农业大学更多>>
- 发文基金:河北省自然科学基金国家自然科学基金家畜疫病病原生物学国家重点实验室开放基金更多>>
- 相关领域:农业科学生物学医药卫生更多>>
- 重组鸡IL-7的制备及对法氏囊病毒灭活苗免疫原性的增强作用
- 引言传染性法氏囊病(IBD)是由传染性法氏囊病毒(IBDV)引起的急性、高度接触性传染病,此病发病率和死亡率高,严重威胁养鸡业的发展,目前该病尚未得到完全控制。目前主要使用弱毒苗和灭活苗进行预防,但不能完全抵抗强毒的攻击...
- 崔丹张建楼霍珊珊张永红王利月左玉柱李秀锦仲飞
- 重组猪白介素7在大肠杆菌中分泌表达及生物学功能分析
- <正>白介素-7(IL-7)是一种由胸腺基质等细胞产生的具有刺激B细胞生长和Pre-B细胞分化和增殖的细胞因子,能使处于抑制的免疫系统恢复其功能。研究证明猪的许多病毒性传染病的发病过程与病毒致机体免疫抑制有关,如猪的蓝耳...
- 王利月温洁霞林洪羽张永红李文艳张建楼李秀锦仲飞
- 文献传递
- 重组鸡IL-7的制备及其抑制传染性法氏囊病毒感染的研究
- 白细胞介素是鸡体内一类重要的细胞因子,在机体的免疫应答中起重要作用,可作为免疫治疗剂、免疫增强剂、构建新型基因工程疫苗等。IL-7主要由胸腺基质细胞产生,其它细胞如骨髓基质细胞,肠上皮细胞等也能产生,另外,脾细胞、巨噬细...
- 王利月林洪羽李文艳温洁霞张永红李秀锦仲飞
- 文献传递
- 基于膜受体阻断犬细小病毒感染的分子机制研究
- 仲飞李秀锦仲峰李文艳王微温洁霞潘素敏潘红丽李楠王幸兴韩冬梅王利月林洪羽张永红张建楼
- 基于细小病毒VP2蛋白与宿主细胞膜TfR特异结合并介导病毒感染的特性,利用宿主细胞的TfR细胞外区(也称可溶性的TfR,即sTfR)重组蛋白封闭细小病毒颗粒,从而达到阻止细小病毒感染宿主细胞的目的。在项目研究过程中,课题...
- 关键词:
- 关键词:细小病毒感染分子生物学
- 单增李斯特菌对小鼠巨噬细胞炎性体的激活及其对滋养层细胞的免疫调节作用
- 试验目的:研究单增李斯特菌(LM)激活小鼠巨噬细胞的分子机制及其对小鼠滋养层细胞的免疫调节作用。试验方法:用野生型LM和溶血素(LLO)基因敲除的LM(LLO-/--LM)分别感染小鼠巨噬细胞系B6细胞和NLRP3-/-...
- 李文艳王利月林洪羽温洁霞张永红张建楼李秀锦黄河玲仲飞
- 表达绿色荧光蛋白的北美Ⅱ型PRRSV感染性克隆的制备及特性分析
- 目的:由猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)感染引起的猪繁殖与呼吸综合征(PRRS),一直是危害养猪业最为严重的传染病之一,给国内外养猪业带来巨大的经济损失。为在分子水平上研究PRRSV与宿主的相互作用及其致病机制,本试...
- 王利月
- 关键词:猪繁殖与呼吸综合征绿色荧光蛋白感染性克隆
- 文献传递
- PRRSV对猪树突细胞可溶性CD83释放影响的分析
- 2015年
- 为研究猪繁殖与呼吸障碍综合征病毒(PRRSV)感染是否促进猪树突细胞可溶性CD83(sCD83)的释放,在体外用PRRSV感染猪树突细胞,通过ELISA检测了树突细胞培养基sCD83的含量,结果显示PRRSV可明显提高猪树突细胞培养基sCD83的含量,表明PRRSV促进树突细胞sCD83的释放。为研究PRRSV对猪树突细胞CD83表达的影响,用RT-PCR和流式细胞术分别检测了细胞CD83mRNA的水平和细胞膜CD83的含量。结果显示PRRSV可提高猪树突细胞CD83 mRNA的水平,然而对细胞膜CD83的含量影响不大,说明PRRSV促进sCD83释放的作用高于刺激CD83表达的作用,致使膜结合的CD83保持较低的水平。PRRSV诱导树突细胞sCD83的释放为探讨PRRSV感染引起免疫抑制提供了重要的线索。
- 李秀锦霍珊珊张永红张建楼徐建林洪羽王利月仲飞
- 关键词:PRRSV免疫抑制
- 猪肺泡/羊水表面活性蛋白A的分离纯化及抗菌和抗病毒活性的分析被引量:2
- 2017年
- 为探讨猪肺泡表面活性蛋白A(SP-A)的抗菌和抗病毒活性,需要从猪肺泡液和羊水中分离纯化SP-A。首先通过化学交联法将麦芽糖共价交联在Sepharose胶粒上,制成能够与SP-A结合的胶粒,即麦芽糖-Sepharose(MS)。采集肺泡灌洗液(BLAF)和羊水(AF),以11 000r/min转速离心40 min获得富含SP-A的沉淀;将沉淀溶解于含8mol/L尿素的缓冲液I中使SP-A变性,再以无尿素的缓冲液I透析使其复性。然后在含Ca2+的结合缓冲液中用MS吸附SP-A,用含EDTA的洗脱液洗脱,洗脱的SP-A过Sephadex G-75凝胶柱得到纯化的SP-A。SDS-PAGE和Western blot鉴定结果显示:在相对分子质量为35 000和70 000处出现特异的SP-A蛋白带(或杂交带)。菌体凝集试验显示:SP-A具有凝集E.coli的作用,表明制备的SP-A具有生物活性。抑菌试验证实SP-A对致病性E.coli、肠沙门杆菌、肺炎链球菌和金黄色葡萄球菌的增殖均有不同程度的抑制作用,特别是对E.coli和肠沙门杆菌抑制作用更为明显。抗病毒检测结果显示:SP-A可明显抑制猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)在MARC-145细胞中的增殖,同时对猪细小病毒(PPV)在PK-15细胞中的增殖也有一定的抑制作用。结果表明:制备的猪SP-A在体外具有明显的抗菌和抗病毒活性,这为以后进一步研究猪SP-A的生物学特性及抗菌、抗病毒活性提供了必要的条件。
- 张永红霍珊珊张建楼徐建左玉柱王利月崔丹李秀锦仲飞
- 关键词:抗病毒活性
- 重组猪IL-7在真核细胞的分泌表达及生物活性分析被引量:1
- 2013年
- 为了解猪IL-7(pIL-7)在防治猪免疫抑制性传染病及疫苗生物佐剂中的作用,通过RT-PCR方法从猪脾脏中扩增出含有自身信号肽序列的pIL-7 cDNA基因,将其克隆到pcDNA3.1A表达载体上,构建出羧基端与Myc/His融合的pIL-7基因真核表达载体pcDNA3.1A-pIL-7/MH。由磷酸钙介导将pcDNA3.1A-pIL-7/MH质粒转染人类胚胎肾细胞293T(HEK293T)使其进行瞬时表达,以Western-blot检测构建的pIL-7基因表达载体是否可介导重组pIL-7在真核细胞中进行分泌型表达。然后利用Ni-NTA琼脂糖亲和层析纯化表达的重组pIL-7,并通过淋巴细胞增殖试验检测其的生物活性。结果表明,扩增的pIL-7基因序列与GenBank序列完全一致;构建的表达载体可介导重组pIL-7在真核细胞HEK293T中进行分泌型表达。表达的重组pIL-7对猪脾淋巴细胞有明显的促增殖效应。由此可见,利用真核细胞表达的重组pIL-7具有生物活性。
- 温洁霞林洪羽王利月李文艳张考陈慧慧仲飞李秀锦
- 关键词:真核表达
- 传染性法氏囊病毒的致病机理
- 传染性法氏囊病(Infectious bursal disease,IBD)是由传染性法氏囊病毒(Infectious bursal disease virus,IBDV)引起的一种严重危害养鸡业的传染性疾病。IBDV是...
- 王利月张永红仲飞
- 关键词:传染性法氏囊免疫抑制致病机理
- 文献传递