浦颖艳
- 作品数:5 被引量:9H指数:1
- 供职机构:南京师范大学生命科学学院更多>>
- 相关领域:医药卫生生物学更多>>
- MDA-7基因的腺病毒载体构建及对肿瘤细胞凋亡的影响被引量:1
- 2008年
- 目的:构建一种端粒酶启动子调控目的基因MDA-7/hIL24表达的复制缺陷型腺病毒,并初步探索其抗肿瘤活性。方法:通过基因操作技术将启动子(hTERTp)+目的基因(MDA-7)插入到5型腺病毒E1A区域,构建复制缺陷型腺病毒AdTP-mda7;同时构建对照病毒AdTP-EGFP。TCID50法测定病毒滴度。应用蛋白质印迹法检测MDA-7在肿瘤细胞株中的表达状态;通过结晶紫染色实验检测两种病毒对肿瘤细胞的杀伤差异。结果:成功构建携带目的基因的腺病毒载体,PCR鉴定正确;蛋白质印迹结果表明MDA-7选择性地在多种肿瘤细胞株中表达,诱导肿瘤细胞凋亡,如A549,SGC-7901等,在以相同MOI值感染原代成纤维细胞时,原代细胞中没有检测到MDA-7表达;结晶紫染色试验结果表明AdTP-mda7对肿瘤细胞株的杀伤能力明显高于对照病毒AdTP-EGFP。结论:成功构建复制缺陷型腺病毒AdTP-mda7,并证实MDA-7蛋白在肿瘤细胞中过表达诱导多种肿瘤细胞株发生凋亡。
- 王艳浦颖艳方琳孙丽君胡晓翠邱红苏长青曹祥荣江淑芳
- 关键词:复制缺陷型腺病毒肿瘤基因治疗
- 肿瘤特异性溶瘤腺病毒载体的构建及表达的初步研究
- <正>目的:构建一种由人端粒酶逆转录酶启动子(hTERTp)控制的能够在肿瘤细胞中特异性增殖的新型肿瘤基因治疗溶瘤腺病毒载体系统。方法:利用基因重组技术将hTERTp插入
- 浦颖艳方琳沈权孙丽君胡小翠王艳曹祥荣苏长青
- 关键词:基因治疗溶瘤腺病毒肿瘤
- 文献传递
- 改良组织块法培养人肺成纤维细胞及其形态学观察被引量:8
- 2008年
- 王艳浦颖艳方琳孙丽君胡晓翠邱红苏长青曹祥荣江淑芳
- 关键词:成纤维细胞组织块法免疫细胞化学波形蛋白
- 肿瘤特异性溶瘤腺病毒载体的构建及其在肿瘤细胞中特异性的表达
- 2008年
- 为构建一种由人端粒酶逆转录酶启动子(hTERTp)调控的能够在肿瘤细胞中特异性增殖的新型肿瘤基因治疗溶瘤腺病毒载体系统,利用基因重组技术将hTERTp插入5型腺病毒E1A基因上游,构建肿瘤特异性增殖腺病毒AdSU,使其携带绿色荧光蛋白报告基因.同时构建增殖缺陷型腺病毒Ad-EGFP作为对照.通过Westernblot分析表明该特异性增殖腺病毒AdSU-EGFP在肿瘤细胞中特异性表达EIA.而通过荧光显微镜观察两者增殖实验发现,AdSU-EGFP在正常成纤维细胞株BJ及原代子宫成纤维细胞中无增殖,在肝癌细胞株MH-CC和肺癌细胞株A549中,则可见病毒增殖并裂解细胞的现象.由此可认为成功构建了肿瘤基因治疗的特异性溶瘤腺病毒载体系统AdSU,该系统能够在肿瘤细胞中特异性增殖并表达所携带的外源基因,这对肿瘤的定向基因治疗有着重要意义.
- 浦颖艳方琳沈权孙丽君胡小翠王艳曹祥荣苏长青
- 关键词:基因治疗溶瘤腺病毒肿瘤
- 毛冠鹿睾丸组织cDNA文库的构建及P1精蛋白基因的克隆
- <正>毛冠鹿在种内出现多样性的染色体数目和形态(雄性2n=47,48,雌性2n=46,47,48)其染色体多态体现在性染色体上,可能是染色体进化过程中的一个过渡状态。本文利用SMART(Switching Mechani...
- 张文汤文文曹祥荣张锡然浦颖艳
- 文献传递