武涛 作品数:52 被引量:239 H指数:9 供职机构: 东北农业大学 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 国家高技术研究发展计划 国家科技支撑计划 更多>> 相关领域: 农业科学 生物学 更多>>
赤霉素合成基因的克隆以及其相关矮化突变体 被引量:21 2005年 矮化突变体在阐明植物茎的生长发育调节机制和植物育种中具有十分重要的作用。研究表明,赤霉素(GA)与植物矮化突变体的产生有密切关系。目前运用各种不同的方法,几乎所有编码GA合成过程中的酶的基因都被克隆出来了。近年来,一系列新方法更加促进了GA调控的研究进展。现就GA合成过程中相关基因的克隆、GA的信号转导以及如何进行GA调控等方面进行综述。 武涛 曹家树 虞慧芳关键词:赤霉素 生物合成 基因克隆 矮化突变体 信号转导 生长发育 CsGolS1作为黄瓜低硝态氮胁迫标记基因及其应用 本发明涉及一种黄瓜受低硝态氮胁迫标记基因及其应用,属于植物生物技术领域。利用该标记基因,即肌醇半乳糖苷合成酶 CsGolS1 ,能够在低硝态氮胁迫下不同黄瓜品种中稳定上调表达的特性,以该基因CDS序列为模板设计引物。对不... 武涛 范莲雪 秦智伟文献传递 拟南芥Mo敏感突变体基因克隆及功能分析 被引量:1 2018年 为了了解Mo的分子功能,对26 000粒拟南芥EMS诱变突变体种子进行了筛选,鉴定出一个对正常Mo敏感的突变体4-10。在正常170 nmol/L Mo条件下,4-10突变体的根部伸长发育受到抑制,而340μmol/L Mo处理能部分恢复突变体根长。在170 nmol/L Mo条件下4-10和Col-0幼苗的根长分别为(1.56±0.13)cm和(11.89±0.71)cm;而在340μmol/L Mo条件下,4-10和Col-0的根长分别为(3.3±0.17)cm和(6.8±0.73)cm。此外,340μmol/L Mo处理能够恢复4-10异常的根形态。Mo含量测定结果表明,4-10突变体植株根部Mo含量显著低于野生型植株;除了对正常Mo敏感外,4-10突变体叶色对NH_4^+也敏感,其花青素含量显著高于Col-0。为了鉴定4-10突变体候选基因,利用图位克隆技术将候选基因定位到1号染色体一个23 kb区域(26.809~26.832 Mb),进一步基因组重测序结果表明,在该区域存在1个非同义突变SNP,包含该SNP的基因At1g71100编码核糖-5-磷酸异构酶(RPI),初步证明,RPI基因为4-10突变体的候选基因。利用At RPI基因纯合突变植株和4-10突变体进行的等位性检测结果表明,4-10突变体和等位基因突变体rsw10-1杂交的F1仍然对NH_4^+敏感,从而确定RPI基因为4-10突变体基因。通过表型分析注意到除了过量Mo能恢复4-10突变体根长之外,外源尿苷处理同样可以恢复4-10突变体的根长。结果表明,过量的Mo通过尿苷转运作用促进了补救合成途径进程。 杜亚琳 陈海燕 郝宁 藤原徹 武涛关键词:拟南芥 图位克隆 钼 黄瓜ABC转运蛋白基因(abca19)的克隆及其对农药霜霉威胁迫的响应 被引量:6 2015年 ABC转运蛋白基因与植物的多抗耐药性密切相关,是植物抗农药机理研究的热点。克隆黄瓜ABC转运蛋白基因abca19,分析其编码蛋白的氨基酸序列、理化性质和结构,了解其在霜霉威胁迫条件下的表达规律,为abca19的研究奠定基础,为黄瓜抗农药霜霉威机理研究积累材料。以D0351为材料,根据黄瓜基因组数据库中Csa7M368750.1基因编码区全序列,应用Primer Premier 5.0软件设计引物,从黄瓜果实cDNA中克隆abca19基因的开放阅读框。定量PCR分析霜霉威胁迫处理条件下,黄瓜果实不同处理时间和黄瓜不同部位abca19的表达变化。abca19序列长度为921bp,注册到Gene Bank,登录号为KC123181。abca19编码306个氨基酸,与大豆(Glycine max)等植物abca19的同源性为80%。该蛋白是一个疏水蛋白,无跨膜结构,包含6个α-螺旋结构,无信号肽。具有蛋白激酶C磷酸化位点、N-豆蔻酰化位点、N-糖基化位点和酪蛋白激酶Ⅱ磷酸化位点等多个活性位点。霜霉威处理条件下,0.5-6h黄瓜果实处理组abca19相对表达量极显著高于对照,9-48h对照组abca19相对表达量高于处理组,但二者间差异不显著。不同处理时间点(3、9和24h),叶片中abca19相对表达量最高,果实中其次,茎中最低。成功克隆到黄瓜abca19,该基因具有已知物种abca19的特征。霜霉威处理条件下,黄瓜果实abca19参与农药霜霉威胁迫响应,反应迅速且具有时限性。在黄瓜叶片和果实中,abca19积极参与对农药霜霉威胁迫的响应,茎中响应较弱。 吴鹏 郭茜茜 武涛 秦智伟关键词:黄瓜 克隆 霜霉威 胁迫响应 黄瓜细胞质型谷氨酰胺合成酶基因(GS1)的克隆及其在低氮条件下的表达 被引量:16 2012年 【目的】分离和克隆黄瓜谷氨酰胺合成酶GS1基因,分析其序列特征,了解其在低氮条件下的表达情况。【方法】依据黄瓜基因组数据库中Csa015274基因编码区全序列,应用引物设计软件Primer Premier 5.0设计引物,从黄瓜叶片cDNA中克隆该基因,用生物信息学方法对获得的cDNA序列及推定氨基酸序列进行分析鉴定,并用实时荧光定量PCR法研究GS1基因在不同氮素浓度下的表达变化。【结果】分离到GS1基因,GenBank登录号为JQ277263。该基因长1 071 bp,编码356个氨基酸,与甜瓜(Cucumis melo L.)GS1基因同源性高达97%。该基因编码的蛋白是1个不稳定的疏水蛋白,无跨膜结构,无信号肽,存在蛋白激酶C磷酸化位点,酪蛋白激酶Ⅱ磷酸化位点,N-十四酰化位点,酪氨酸激酶磷酸化位点等活性位点。GS1基因表达模式分析显示,在低氮条件下,该基因下调表达,随着氮素浓度的增高GS1基因的表达量增加。在高浓度的氮素水平下,该基因的表达同样受到抑制。【结论】成功从黄瓜叶片中分离克隆到GS1基因,该基因具有已知物种GS1基因的特征,可用于该基因的功能研究。 冯卓 秦智伟 武涛 何红梅关键词:黄瓜 克隆 水果型黄瓜新品种东农804的选育 2009年 东农804是利用优势育种法选育的水果型黄瓜一代杂种。母本D0420是强雌性自交系,父本D0202是高代稳定自交系。植株长势强,叶片深绿色,茎秆粗壮,分枝少、主蔓结瓜,节成性好,第7~8节以上每节有瓜,高抗细菌性角斑病和枯萎病,抗霜霉病、白粉病。瓜长22~24cm,瓜粗3cm左右,单瓜质量150~180g,标准瓜率大于85%。果实深绿色,有光泽,瓜腔小于瓜横径1/2,每667m2产量3800~4300kg。适宜在华北、东北地区春秋保护地栽培。 周秀艳 秦智伟 张艳菊 刘宏宇 王桂玲 武涛关键词:水果型黄瓜 一代杂种 黄瓜S-腺苷-L-高半胱氨酸水解酶全长cDNA的克隆及表达分析 被引量:3 2012年 【目的】克隆黄瓜S-腺苷-L-高半胱氨酸水解酶基因的cDNA,并进行生物信息学和表达分析,为研究该基因的功能奠定基础。【方法】通过对乙烯利诱导黄瓜茎尖SSH文库的筛选,采用RT-PCR和电子克隆技术,获得黄瓜CsSAHH基因的cDNA全长序列(NCBI编号:HQ444960,CsSAHH)。运用半定量RT-PCR,分析CsSAHH基因在乙烯利诱导后的茎尖和雌雄花不同部位的表达。通过生物信息学方法预测CsSAHH基因的蛋白结构。【结果】黄瓜CsSAHH基因的cDNA全长1 545 bp,编码485个氨基酸,其理论上的等电点pI=5.66,分子量MW=53.1 kD。CsSAHH基因在黄瓜茎尖受乙烯利诱导增强表达,在黄瓜雄花中的雄蕊表达较弱。CsSAHH理化性质表明,该蛋白无明显的信号肽;蛋白二级结构主要由loop环和α螺旋构成,含少量的β折叠,预测发现该蛋白分别在85—99氨基酸残基和262—279氨基酸残基处各有1个S-腺苷-L-高半胱氨酸水解酶活性功能区。CsSAHH基因氨基酸序列与苜蓿的同源性为63%,与水稻、玉米、拟南芥等作物同源性较低。【结论】成功克隆黄瓜CsSAHH基因cDNA序列,在85—99氨基酸残基和262—279氨基酸残基处各有1个S-腺苷-L-高半胱氨酸水解酶活性功能区。该基因在茎尖受乙烯利诱导增强表达,在雄蕊中表达较弱。在未处理的雌雄花芽发育不同阶段,雌花芽中表达强于幼果和雄花芽。 金晓霞 秦智伟 周秀艳 武涛关键词:黄瓜 蛋白结构预测 黄瓜雌性性状的QTL定位分析 以黄瓜雌性系D0420×强雄性系D06103的211株F2单株为作图群体,应用SSR分子标记进行多态性筛选,得到与黄瓜雌性性状相关的标记位点21个,分属4个连锁群,连锁群全长为98.5 cM,标记间平均距离4.9 cM,... 厉建梅 辛明 秦智伟 武涛 周秀艳关键词:黄瓜 SSR QTL 文献传递 黄瓜新品种东农810的选育 2013年 东农810是以D0420为母本,以649为父本配制而成的黄瓜一代杂种。植株长势强,主蔓结瓜,第1雌花节位为第4~5节,雌花节率73.9%,强雌性。商品瓜为圆筒形,皮色深绿少刺、无光泽、微棱,瓜长16.0 cm,横径3.15 cm,单瓜质量140 g左右,瓜肉浅绿色。抗细菌性角斑病、枯萎病和霜霉病,中抗白粉病。平均产量4 600 kg·(667 m2)-1。适合东北、华北地区保护地栽培。 周秀艳 秦智伟 辛明 张艳菊 武涛 王新国关键词:黄瓜 一代杂种 南瓜属植物再生体系的建立及其应用 被引量:8 2007年 对南瓜属植物再生体系的研究及其应用作了介绍,并对存在问题和改进措施进行了分析讨论。 张亚锋 曹家树 武涛关键词:南瓜属