李亚刚
- 作品数：3 被引量：3H指数：1
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- 鼠双微粒体-2基因沉默对人肝癌HepG2细胞移植瘤生长的抑制作用被引量：2
- 2013年
- 目的构建鼠双微粒体-2基因（MDM2）靶向小分子干扰RNA（siRNA）质粒，研究其对人肝癌HepG2细胞裸鼠皮下移植瘤生长的抑制作用，探讨其在肝癌基因治疗中的可行性。方法构建MDM2的siRNA真核表达载体pSilencer-siRNA-MDM2（siMDM2），建立裸鼠荷瘤模型，分别给予阴性对照质粒和siMDM2质粒处理。监测肿瘤生长变化，RT-PCR、Westernblot方法检测MDM2及p53mRNA和蛋白的表达变化。正态分布数据的组间比较用单因素方差分析及LSD检验。结果裸鼠体内实验结果显示，转染siMDM2-1和siMDM2-2组与对照组相比，肿瘤增长受到明显抑制，抑瘤率分别为60．6％和54．6％。RT-PCR和Westernblot结果示MDM2的mRNA和蛋白质表达下调，而p53的mRNA和蛋白质表达上调。与空白组比较，转染siMDM2-1和siMDM2-2组的MDM2mRNA表达分别下调62．80／0和61．6％，MDM2蛋白表达分别下调60．7％和59．5％；p53mRNA表达分别上调47．1％和45．6％，p53蛋白表达分别上调45．9％和44．3％，差异均具有统计学意义（F值分别为75．099、47．860、17．676和235．770，P值均〈0．01）。结论siRNA沉默MDM2基因能抑制人肝癌HepG2细胞裸鼠皮下移植瘤的形成，可能与其在体内有效下调MDM2和上调p53的mRNA及蛋白质表达有关。
- 赵燕颖李亚刚孙远杰刘海鹏杨泽成张舵舵赵春燕
- 关键词：基因沉默小分子干扰基因
- 小干扰RNA抑制MDM2对HepG2细胞的影响及机制
- 2014年
- 目的探讨小干扰RNA对HepG2细胞泛素蛋白链接酶(MDM2)基因表达的干扰效应和增殖影响的分子机制。方法建立装载靶向MDM2基因小干扰RNA(siRNA)的表达载体;用脂质体法将此表达载体转染HepG2细胞株,以转染阴性对照质粒组作对照;采用RT-PCR检测MDM2,p53,Bcl2和p21基因的表达;MTT法检测细胞增殖抑制情况,流式细胞仪检测细胞凋亡情况,划痕实验检测细胞迁移能力的改变。结果转染siRNA MDM2后的HepG2细胞MDM2和Bcl2基因表达明显减低,而p53和p21基因表达被明显增强,与空白组比差异具有显著性。siRNA MDM2明显抑制了HepG2的增殖并诱导其凋亡,同时使细胞迁移能力明显下降。但转染阴性对照质粒组未出现基因的表达变化和增殖抑制及凋亡。结论 siRNA MDM2可明显抑制HepG2增殖诱导其凋亡,并减弱肿瘤细胞迁移力。可能与抑制MDM2,增强p53表达,从而影响细胞周期和凋亡相关的基因表达变化有关。
- 赵燕颖李亚刚赵春燕杨泽成张舵舵孙远杰
- 关键词：MDM2SIRNAP53
- siRNA抑制人肝癌细胞MDM2表达及细胞增殖的研究被引量：1
- 2012年
- 目的探讨siRNA对人肝癌HepG2细胞MDM2基因表达的抑制作用及对增殖的影响。方法体外合成针对MDM2基因的siRNA质粒,转染HepG2细胞株;应用RT-PCR和western blot方法检测siRNA对MDM2和P53基因和蛋白表达的影响,并用MTT法检测siRNA对细胞增殖抑制作用,流式细胞仪检测细胞周期。结果和空白组比转染siMDM2-1,2的HepG2细胞的MDM2基因和蛋白表达减低,而P53基因和蛋白表达增加。阴性对照质粒组的基因表达未见明显改变。转染siRNA MDM2后细胞生长受到抑制,转染siMDM2-1,2和阴性对照质粒后的抑制率分别是46.3%、56.1%和3%。和对照组比较,转染siMDM2-1,2的hepG2细胞的细胞周期发生明显改变,而转染对照质粒的hepG细胞周期未发生明显变化。结论 siRNA MDM2可以有效抑制HepG2细胞株中MDM2的表达,促进P53的表达,同时可以使细胞周期发生变化,这可能是其抑制肿瘤细胞增殖的主要机制之一。
- 赵燕颖李亚刚杨泽成张舵舵赵春燕
- 关键词：肝细胞癌MDM2SIRNA
