张海峰
- 作品数:9 被引量:2H指数:1
- 供职机构:中国科学院微生物研究所更多>>
- 发文基金:北京市自然科学基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域:环境科学与工程生物学更多>>
- 阻断集胞藻6803 PHB合成途径提高胞内NADPH含量被引量:2
- 2011年
- 蓝藻是探索利用太阳能生产化学品的重要微生物,但产量低限制了蓝藻化学品的工业应用。提高宿主还原力水平是提高微生物合成化学品产量的重要手段。为提高集胞藻细胞内NADPH含量,利用同源重组方法,获得敲除聚羟基丁酸酯PHB合酶编码基因phaC和phaE的集胞藻Synechocystis sp.PCC 6803突变体S.ΔphaC&E。PCR结果证明突变体S.ΔphaC&E基因组中phaC和phaE已完全被氯霉素抗性基因取代。生长曲线结果显示S.ΔphaC&E的生长与野生型无明显差异,说明敲除phaC和phaE对蓝藻生长的影响很小。用气相色谱检测胞内PHB含量,野生藻S.wt中PHB为细胞干重的2.3%,而突变体S.ΔphaC&E中没有PHB生成,该结果说明敲除phaC和phaE能够有效阻断集胞藻中PHB合成。通过对野生藻与突变体进一步比较分析,发现S.ΔphaC&E胞内NADPH浓度明显提高,在第3天时差异最为明显,S.ΔphaC&E胞内NADPH浓度是S.wt的2.85倍。总之,敲除phaC和phaE不仅可以通过阻断副产物PHB的合成,而且还节约了NADPH,使胞内还原力NADPH的水平明显提高。因此为提高蓝藻化学品产量提供了可以改变碳流向和具有充足还原力的工程集胞藻。
- 解鹃周杰张海峰李寅
- 关键词:蓝藻集胞藻代谢工程NADPH
- 一种酿酒酵母工程菌及其在生产乙醇中的应用
- 本发明公开了一种酿酒酵母工程菌及其在生产乙醇中的应用。本发明提供了酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)W32N55,其保藏号为CGMCC NO.6090。还提供了酿酒酵母(Saccharomyce...
- 张延平张博张海峰孙红兵李寅马延和
- 文献传递
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- 蓝藻整合表达载体及其应用
- 本发明公开了一种蓝藻整合表达载体及其应用。本发明所提供的载体为环状载体,包含如序列1所示的启动子Pcpc,以及位于所述启动子Pcpc下游如序列2所示的终止子TrbcL;所述环状载体还包含如下1)或2):1)位于所述启动子...
- 周杰张海峰张延平李寅
- 文献传递
- 一种产乳酸的重组蓝藻及其制备方法与应用
- 本发明公开了一种产乳酸的重组蓝藻及其制备方法与应用。本发明提供的方法,为代谢途径改造并将D-乳酸脱氢酶编码基因导入蓝藻的基因组中,得到产光学纯D-乳酸的重组蓝藻;所述D-乳酸脱氢酶的氨基酸序列为序列表中的序列3。本发明的...
- 周杰张海峰李寅
- 文献传递
- 一种利用蓝藻将CO<Sub>2</Sub>生物转化为异丙醇的技术
- 本发明公开了一种利用蓝藻将CO<Sub>2</Sub>生物转化为异丙醇的技术。本发明提供了如下6种方法制备的重组蓝藻:(1)将辅酶A转移酶基因、乙酰乙酸脱羧酶基因和醇脱氢酶基因导入蓝藻(2)将辅酶A转移酶基因和乙酰乙酸脱...
- 周杰张海峰张延平李寅
- 一种利用蓝藻将CO<Sub>2</Sub>转化为丙酮及异丙醇的技术
- 本发明公开了一种利用蓝藻将CO<Sub>2</Sub>生物转化为异丙醇的技术。本发明提供了如下6种方法制备的重组蓝藻:(1)将辅酶A转移酶基因、乙酰乙酸脱羧酶基因和醇脱氢酶基因导入蓝藻(2)将辅酶A转移酶基因和乙酰乙酸脱...
- 周杰张海峰张延平李寅
- 文献传递
- 一种产乳酸的重组蓝藻及其制备方法与应用
- 本发明公开了一种产乳酸的重组蓝藻及其制备方法与应用。本发明提供的方法,为代谢途径改造并将D-乳酸脱氢酶编码基因导入蓝藻的基因组中,得到产光学纯D-乳酸的重组蓝藻;所述D-乳酸脱氢酶的氨基酸序列为序列表中的序列3。本发明的...
- 周杰张海峰李寅
- 蓝藻整合表达载体及其应用
- 本发明公开了一种蓝藻整合表达载体及其应用。本发明所提供的载体为环状载体,包含如序列1所示的启动子Pcpc,以及位于所述启动子Pcpc下游如序列2所示的终止子TrbcL;所述环状载体还包含如下1)或2):1)位于所述启动子...
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