周晗
- 作品数：75 被引量：94H指数：6
- 供职机构：东北农业大学动物医学学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金哈尔滨市科技创新人才研究专项资金“十二五”国家科技计划农村领域更多>>
- 相关领域：农业科学生物学医药卫生轻工技术与工程更多>>
- 猪流行性腹泻病毒RT-LAMP快速检测方法的建立及应用被引量：8
- 2021年
- 为建立一种适用于现场快速检测猪流行性腹泻病毒(PEDV)的环介导等温扩增(RT-LAMP)检测方法,本研究以PEDV N基因的保守序列为靶基因设计引物,优化并建立了基于RT-LAMP的PEDV快速检测方法。结果显示,RT-LAMP方法的最佳反应条件为:反应温度为61℃,反应时间为50 min,Mg2+和dNTPs浓度分别为8.0 mmol/L和4.0 mmol/L,外引物和内引物最佳浓度比为1.4。特异性试验结果显示,该方法只能检测出PEDV,对其他病原检测均为阴性,具有良好的特异性;敏感性试验结果显示,该方法能够检测出的最低RNA浓度为6.52×10^(-5)mg/L,而常规RT-PCR能检测到最低浓度为6.52×10-3mg/L,表明RT-LAMP敏感性是RT-PCR的100倍;重复性试验结果显示,批内和批间重复性试验结果无明显差异,重复性较好。利用RT-LAMP和RT-PCR方法分别对3份已知阳性样品,5份已知阴性样品以及52份未知临床样品进行检测。阳性样品经RT-LAMP和RT-PCR方法均检测到PEDV,阴性样品均未检测到PEDV。52份临床样品中,RT-LAMP对PEDV检测阳性率为23.08%(12/52);RT-PCR检测阳性率为17.31%(9/52),二者的符合率为94.23%。以上结果表明,建立的RT-LAMP方法具有成本低、检测快、灵敏度高、特异性强等优点。且结果易于判定、便于现场检测,在病原检测方面具有良好的应用前景,为该病的流行病学调查及综合防制提供重要的实验依据。
- 狄亚心谭飞秦松跃于晓丽崔文姜艳平王丽唐丽杰周晗王晓娜乔薪瑗
- 关键词：猪流行性腹泻病毒RT-LAMPRT-PCR
- 1株E亚群禽白血病病毒的分离鉴定及遗传进化分析被引量：5
- 2022年
- E亚群禽白血病病毒(ALV-E)是指存在于鸡染色体中的内源性逆转录病毒基因组DNA或片段。具有转录活性的ALV-E既会对鸡的生产性能(体重和产蛋率)产生负面影响,又能从抗体水平干扰对外源性ALV的鉴别诊断。为对黑龙江省某鸡场内一禽白血病病毒RT-PCR阳性病料进行病毒分离鉴定及分析其基因组特征和遗传进化情况,通过分子生物学、病毒形态学及全基因组序列测定方法对病毒培养物进行鉴定和分析,结果显示,该分离株可在CEF细胞盲传至第9代,电镜下可观察到近似球形、直径约为80 nm,并具有囊膜和纤突结构的病毒粒子,将其命名为HLJE2020株。序列分析结果显示,其全基因组序列中的gag和pol基因相对保守,LTR和env基因与ALV-E同属一个进化分支,而gp85基因则与ALV-E和ALV-B均具有较高相似性,遗传进化分析显示在ALV-E和ALV-B间出现一个单独的分支,结合RDPv.4和SimPlot软件分析结果,推测该毒株gp85基因可能存在E亚群AF229株与B亚群SDAU09C1株的重组现象。本研究为了解禽白血病病毒基因组遗传演化情况提供数据资料,并为ALV的防控提供参考和依据。
- 王萌张森豪张柳李佳璇王晓娜崔文崔文周晗姜艳平乔薪瑗周晗唐丽杰
- 关键词：禽白血病病毒基因组分析
- 用于猪传染性胃肠炎病毒检测的DPO引物组、含有该引物组的试剂盒及其应用
- 本发明公开了一种用于猪传染性胃肠炎病毒检测的DPO引物组、含有该引物组的试剂盒及其应用。所述的用于猪传染性胃肠炎病毒检测的DPO引物组由上游引物和下游引物组成。此外，本发明采用该DPO引物组结合实时荧光定量PCR方法，建...
- 徐义刚 王紫微王丽周晗唐丽杰李一经
- 表达猪乳铁蛋白肽重组屎肠球菌对断奶仔猪生长性能的影响及其抗ETEC感染效果研究被引量：6
- 2018年
- 本试验以表达猪乳铁蛋白肽的重组屎肠球菌(pNZ8112-PLFcin/Ef)饲喂断奶仔猪,研究其对仔猪生长性能的影响和抗产肠毒素大肠杆菌(enterotoxigenic Escherichia coli,ETEC)感染的效果。选取28日龄体重相近的健康断奶仔猪36头,随机分为3组(重组屎肠球菌组、空载体组和培养基组),每组3个重复,每个重复4头仔猪。重组屎肠球菌组和空载体组分别饲喂添加pNZ8112-PLFcin/Ef(6×1012 CFU/kg)和pNZ8112/Ef(6×1012 CFU/kg)的基础日粮,而培养基组饲喂含有相同体积的GM17液体培养基的基础日粮。试验期26d。结果显示,与培养基组相比,重组屎肠球菌组断奶仔猪的平均日增重极显著提高(P<0.01);料重比显著降低(P<0.05);腹泻率明显降低,肠道菌群的均匀度和多样性指数均下降。为进一步探究表达猪乳铁蛋白肽的重组屎肠球菌对断奶仔猪抵抗ETEC感染的保护作用,在连续饲喂21d后,每个重复中随机挑选1头体况相近的断奶仔猪灌服ETEC。结果发现,与培养基组相比,攻菌后重组屎肠球菌组断奶仔猪血清白细胞介素-2(IL-2)、免疫球蛋白G(IgG)含量、肠黏液中分泌型免疫球蛋白A(sIgA)水平均显著升高(P<0.05);脾脏指数显著提高(P<0.05),但胸腺指数、肠段长度及重量则均无显著差异(P>0.05)。综上所述,表达猪乳铁蛋白肽的重组屎肠球菌能够起到促进断奶仔猪生长及抗ETEC感染的保护作用。
- 解伟纯王玉峰皮若冰赵东方姜艳平崔文乔薪瑗王丽周晗徐义刚李一经唐丽杰
- 关键词：断乳仔猪
- 基于RT-PCR和RFLP技术鉴别鸡传染性法氏囊病病毒强弱毒株的试剂盒及其应用
- 本发明公开了一种基于RT‑PCR和RFLP技术鉴别鸡传染性法氏囊病病毒强弱毒株的试剂盒及其应用。所述的试剂盒含有用于扩增鸡传染性法氏囊病病毒VP2基因的引物对以及SpeI、SacI和StuI限制性内切酶。本发明所建立的基...
- 唐丽杰周晗王丽徐义刚李一经韩冰林庆宇
- 发酵过程中不同理化因素对乳酸菌噬菌体的影响被引量：3
- 2021年
- 乳酸菌已被广泛应用于食品和生物制品生产中,但由于噬菌体污染普遍存在,引起发酵过程减慢、周期延长,甚至导致发酵失败,造成严重的经济损失。通过对发酵介质中不同理化因素对噬菌体及宿主菌的影响分析,结果表明,噬菌体对高温较敏感,56℃处理噬菌体Lc、Lpen及Lbre,分别于20、45 min及10 min后全部灭活;噬菌体对酸、碱有较强的耐受性,在pH=3~12范围内噬菌体活性相对稳定,宿主菌在pH=4~9范围内活性相对稳定。对二价阳离子Ca^(2+)或Mg^(2+)影响的检测结果表明,宿主菌在MCM、MRS-Ca、MRS-Mg、MRS培养基中均能正常生长,而噬菌体Lc、Lpen、Lbre在未添加Ca^(2+)或Mg^(2+)条件下,效价下降了2~4个数量级。发酵介质添加T-20(0.1%、1%、2%)时,当T-20浓度增加到2%时,宿主菌仍可正常生长,噬菌体Lc效价下降3个数量级,噬菌体Lpen和Lbre可完全灭活。发酵介质添加不同浓度NaCl(1%、2%、3%和5%)时,宿主菌均能正常生长,当NaCl添加量为5%时,噬菌体Lc效价下降2个数量级,噬菌体Lpen可完全灭活,Lbre耐受性较强,不能被灭活。
- 于晓丽赵莉程溪秦松跃狄亚心崔文姜艳平王丽李一经唐丽杰徐义刚周晗乔薪瑗
- 关键词：乳酸菌噬菌体发酵防控措施
- 一种用于检测IBDV抗体的免疫磁珠间接ELISA试剂盒及其应用
- 本发明公开了一种用于检测IBDV抗体的免疫磁珠间接ELISA试剂盒及其应用。所述的试剂盒中含有偶联有IBDV VP3蛋白的免疫磁珠，其中，所述的IBDV VP3蛋白是通过毕赤酵母表达系统表达，纯化后获得。本发明利用毕赤酵...
- 唐丽杰周晗王丽徐义刚乔薪瑗龚如月崔文姜艳平李一经
- 蓝舌病病毒型特异性竞争ELISA检测试剂盒及其应用
- 本发明公开了一种蓝舌病病毒型特异性竞争ELISA检测试剂盒及其应用。所述试剂盒包括以下两组组分：组分I中包括包被蓝舌病病毒抗原I的酶标板和用于蓝舌病病毒型特异性检测的单克隆抗体I，所述的单克隆抗体I由杂交瘤细胞株8B3G...
- 唐丽杰王丽周晗臧明鑫李一经姜艳平崔文徐义刚刘敏乔薪瑗
- 组成型表达鸡传染性法氏囊病毒vp2基因重组乳酸菌的构建及免疫原性分析
- <正>传染性法氏囊病(IBD)是由传染性法氏囊病毒(IBDV)引起的鸡的一种免疫抑制性传染病,给养禽业造成了巨大的经济损失。因此,开发安全有效的IBDV疫苗对该病的预防意义重大。为了评价乳酸菌系统表达IBDV vp2蛋白...
- Maqsood Tram周晗王丽乔薪瑗徐义刚唐丽杰李一经
- 关键词：鸡传染性法氏囊病毒VP2免疫原性分析组成型表达
- 乳酸杆菌丙酮酸水合酶基因组成型启动子的预测及功能鉴定
- <正>乳酸菌是公认的安全级(Generally recognized as safe,GRAS)微生物,基于乳酸菌的诸多益生特点,使其成为传递外源抗原蛋白,进行肠道免疫的重要候选菌株。目前,乳酸菌级表达载体多以诱导型为主...
- 陈佩佩周晗王丽乔薪瑗徐义刚唐丽杰李一经
- 关键词：兽医学乳酸杆菌组成型启动子
