修江帆
- 作品数：38 被引量：59H指数：5
- 供职机构：贵州医科大学更多>>
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- 相关领域：生物学医药卫生农业科学文化科学更多>>
- 家蝇(Musca domestica)羧肽酶基因克隆及原核表达被引量：2
- 2014年
- 从构建的家蝇幼虫cDNA质粒文库中筛选到羧肽酶(Carboxypeptidase,CP)基因,以该基因的cDNA文库质粒为模板,通过PCR扩增,获得CP基因完整编码序列(登录号:KF939629.1)。运用生物信息学方法对该基因及其编码蛋白的基本理化性质、信号肽和亚细胞定位等进行预测和分析。构建PEASY-E1-CP重组质粒,转化到大肠杆菌OrigamiB(DE3)中进行诱导表达。研究结果表明,CP基因ORF全长1 284 bp,编码428个氨基酸,理论分子量47.8ku,等电点为6.10,具有CP家族的蛋白保守结构域;重组原核质粒pEASY-E1-CP经IPTG诱导,蛋白在大肠杆菌中获得表达。
- 修江帆魏川川尚小丽国果吴沁怡吴建伟
- 关键词：家蝇羧肽酶克隆原核表达
- 家蝇伴侣蛋白CCTη基因序列分析与表达模式被引量：2
- 2015年
- 目的对家蝇伴侣蛋白CCTη(MD-CCTη)基因进行序列分析,克隆其c DNA序列并检测家蝇CCTη基因的表达情况。方法采用表达序列标签(EST)测序技术从已构建的家蝇幼虫c DNA文库中筛选MD-CCTη基因,对其进行序列测定和分析;提取家蝇3日龄幼虫RNA,逆转录c DNA为模板,PCR扩增,并与p MD-19T载体连接,转化大肠杆菌DH5α中;采用实时荧光PCR技术分析MD-CCTη基因在家蝇不同生长发育阶段及3日龄幼虫组织中表达模式。结果 MD-CCTη基因开放阅读框(ORF)全长1 632 bp,编码543个氨基酸,理论分子量59.3 k Da,等电点6.27;该基因推导的氨基酸序列与其他昆虫同源序列比较有较高的相似性(93%),聚类分析结果显示,家蝇与地中海实蝇和果蝇的亲缘关系最近(100%);MD-CCTη在发育阶段以卵期表达量最高,其次为1日龄幼虫,雄性成虫表达量最低;MD-CCTη基因在家蝇3日龄幼虫组织中气管表达量最高,其次为唾液腺,在体壁中表达量最低。结论成功克隆出MD-CCTη基因的c DNA序列,MD-CCTη在家蝇不同发育阶段及组织中表达模式存在明显差异。
- 赵学军国果修江帆吴建伟陶如玉
- 关键词：家蝇克隆实时荧光
- 中国洞穴动物概况被引量：2
- 2015年
- 本文介绍了中国洞穴动物的研究历史、主要研究概况,总结了最近中国在洞穴动物研究方面所取得的成果,在分析洞穴动物研究动态后,展望了中国洞穴生物研究的前景。并对中国洞穴动物保护提出来一些想法。
- 赵文静张晶修江帆
- 关键词：洞穴动物
- 家蝇MSP蛋白在抗菌方面的应用
- 本发明涉及家蝇MSP蛋白在抗菌方面的应用，属于生物技术领域。家蝇MSP蛋白，具有SEQ ID NO:1所示的氨基酸序列。生物信息学分析结果显示：MSP基因ORF全长495bp，编码164个氨基酸，理论分子量17.4kDa...
- 国果陶如玉修江帆杨蔚锦付萍吴建伟
- 生物技术专业本科毕业论文设计性实验的初探——以环带库蚊ISSR-PCR反应体系建立及优化为例被引量：4
- 2014年
- 毕业论文作为本科教学过程中的一个重要环节,具有不可替代的作用。以环带库蚊ISSR-PCR反应体系建立及优化为例,从毕业论文的选题、可行性分析、实验准备及实验研究等方面介绍贵阳医学院生物技术专业毕业论文实验的设计过程。学生顺利完成本科毕业论文实验,建立了环带库蚊稳定的ISSR-PCR反应体系,为今后系统研究环带库蚊的种群遗传多样性奠定了基础,达到了生物技术专业本科毕业论文实践教学的目的。
- 修江帆赵文静张春林陈汉彬
- 关键词：生物技术专业毕业论文
- 家蝇热休克蛋白HSP20基因克隆、表达和序列分析被引量：5
- 2015年
- 目的对家蝇热休克蛋白20(HSP20)基因进行生物信息学分析,并进行克隆、表达研究。方法利用美国国家生物技术信息中心和瑞士生物信息学研究所的蛋白分析专家系统中有关基因和蛋白序列的分析工具,结合其他生物信息学分析软件包,从Gen Bank上家蝇基因组序列识别出编码HSP20的基因,分析预测该蛋白质的结构功能;设计引物PCR扩增HSP20基因,将其克隆到原核表达质粒PEASY-E1中,重组质粒在大肠杆菌Origmi B/DE3中经用异丙硫代-β-D半乳糖苷(IPTG)诱导表达,表达产物用十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDSPAGE)鉴定。结果 HSP20基因序列全长865bp,最大开放阅读框(ORF)为567bp,编码188个氨基酸,理论分子量为21443.2 Da,等电点为5.96;所构建的重组质粒经PCR、双酶切及测序鉴定成功;SDS-PAGE分析结果显示,重组质粒在Origmi B/DE3中表达并纯化,得到的融合蛋白相对分子质量约为21443.2 Da,诱导12 h蛋白表达量最高,SDS-PAGE法得到的蛋白条带与目的蛋白大小相符。结论成功构建PEASY-E1-HSP20重组原核表达质粒并表达出融合HSP20蛋白,为进一步研究该蛋白的功能奠定基础。
- 彭传林王宇吴建伟修江帆魏川川国果
- 关键词：家蝇克隆
- 家蝇核糖体蛋白S18基因的克隆及表达模式研究被引量：5
- 2016年
- 旨为证实核糖体蛋白S18(Ribosomal protein S18,RPS18)基因在家蝇体内的表达稳定性。从构建家蝇幼虫c DNA文库中筛选到核糖体蛋白S18基因,以c DNA为模板,通过PCR扩增,获得RPS18基因完整编码序列(登录号:KT006855),运用生物信息学方法对该基因及其编码蛋白进行预测和分析。构建p ET28a/RPS18重组质粒,转化到大肠杆菌Transetta(DE3)中进行诱导表达及蛋白纯化,制备多克隆抗体并进行抗血清特异性分析。应用RT-PCR、q PCR及Western-blot从转录、翻译水平上分析RPS18基因在家蝇不同发育时期和三龄幼虫不同组织中的表达情况。结果表明,RPS18基因ORF全长459 bp,编码152个氨基酸,理论分子量为17 590.5 Da,等电点为10.48;将构建的重组质粒转入大肠杆菌Transetta(DE3)中,纯化得到RPS18蛋白;将该纯化蛋白免疫大白兔获得多克隆抗体,His单抗鉴定及抗血清特异性分析显示,其均可见单一条带;RT-PCR、q PCR及Westernblot分析表明,RPS18基因在家蝇不同发育时期及幼虫不同组织均能够稳定表达;综合分析表明,该基因在家蝇不同发育时期及幼虫不同组织均保持较好的表达稳定性。
- 胡亚卢诚魏川川修江帆吴建伟
- 关键词：家蝇内参基因原核表达
- 家蝇GNBP3基因克隆及感染白色念珠菌后的表达被引量：4
- 2017年
- 对家蝇GNBP3基因进行克隆及生物信息学分析,并对该基因在感染白色念珠菌Candida albicans后的表达情况进行研究。从构建的家蝇Musca domestica幼虫c DNA质粒文库中筛选到GNBP3基因,克隆并运用生物信息学方法对该基因及其编码蛋白进行预测和分析。白色念珠菌注射感染家蝇幼虫并收集标本,逆转录,通过荧光定量PCR检测感染样本中GNBP3基因的表达情况,结果进行统计学分析。研究结果表明,GNBP3基因ORF全长1473 bp,编码490个氨基酸,理论分子量为55.8 k Da,等电点为6.85;感染后不同时间点,感染组与对照组比较,在3 h、12 h、36 h、48 h GNBP3 mRNA的表达明显增高,两组比较有显著性差异(P<0.05),而24 h表达差异性最小;感染后不同组织中感染组与对照组比较,3 h和12 h时,在体壁、血淋巴、脂肪体中的表达量升高,具有显著性差异(P<0.05);24 h时,在血淋巴中的表达量较对照组高,而在唾液腺和脂肪体中的表达量呈下降趋势,均具有显著性差异(P<0.05);48 h,在血淋巴和脂肪体中表达量较对照组高,在中肠的表达量较对照组低,均具有显著性差异(P<0.01)。成功克隆GNBP3基因且在家蝇感染白色念珠菌后GNBP3的表达水平随时间的推移呈现先升高后降低再升高的趋势,在各组织中以在免疫组织(血淋巴、脂肪体)中的表达显著增高,推测其在真菌识别过程中发挥潜在作用。
- 胡亚罗嫚王宇王涛尚小丽张迎春修江帆吴建伟
- 关键词：实时荧光定量PCRMRNA水平家蝇
- 利用工程蝇生物转化器建设国酒茅台循环型酿酒生态工业的技术工艺创新及相关理论研究
- 传统酿酒工业粗放的生产与丟糟方式造成了资源的过度浪费与生态环境的日益恶化，严重制约了我国白酒酿造业循环经济的建立以及生态环境的可持续发展。本文以循环经济模式为构建理念，与国酒茅台集团展开合作，利用工程蝇对有机废物的生态转...
- 吴建伟尚小丽罗振华王宇修江帆徐楠
- 关键词：生物转化有机废物生态工业
- 家蝇变应原Tropomyosin基因的克隆、序列分析及诱导表达被引量：1
- 2014年
- 对家蝇变应原原肌球蛋白(Tropomyosin)基因进行同源克隆,序列分析;构建原核表达载体并在大肠杆菌中表达。从家蝇幼虫cDNA文库中筛选获得Tropomyosin基因。以该基因的cDNA文库质粒为模板,进行PCR扩增,获得家蝇Tropomyosin完整编码序列。运用生物信息学方法对该基因及其编码蛋白的基本理化性质、信号肽、二级结构、三级结构、抗原表位和亚细胞定位等方面进行预测和分析。构建pEASY-E1-Tropomyosin重组质粒,转化到大肠杆菌OrigamiB(DE3)中进行诱导表达。Tropomyosin基因ORF全长828 bp,编码275个氨基酸,理论分子量31.6 kD;等电点为4.65,具有Tropomyosin家族的蛋白保守结构域。成功构建重组原核表达pEASY-E1-Tropomyosin并诱导表达重组蛋白。
- 魏川川修江帆王宇国果彭传林吴沁怡吴建伟
- 关键词：家蝇TROPOMYOSIN克隆生物信息学变应原
